外泌體是直徑為30-150 nm的小細胞外囊泡。在生理和病理條件下，幾乎所有類型的細胞都可以釋放外泌體，在細胞通訊和表觀遺傳調(diào)控中發(fā)揮重要作用。外泌體天然存在于體液中，包括血液，唾液，尿液和腦脊液等，內(nèi)部含有其來源細胞的核酸，蛋白等物質(zhì)，因此基于外泌體的疾病診斷和治療方法得到了深入的研究。但是如何拿到純凈的外泌體一直是外泌體研究所面臨的難題之一，因此研究人員也開發(fā)了許多外泌體分離的方法，來一起看一下吧。

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TFF技術的原理和特點
TFF技術是一種過濾技術，其特點是液體流動方向與過濾方向垂直。這種技術在外泌體研究中具有獨特優(yōu)勢，因為它不會直接擠壓外泌體，而是通過輕柔的切向作用流過濾膜，從而減少對外泌體等柔性囊泡的破壞，保證其完整性‌。TFF技術還通過增加濾液與納米多孔膜的接觸面積，提高了分離效率，防止了膜的堵塞‌。

TFF技術的優(yōu)點
高效分離：TFF技術能夠?qū)崿F(xiàn)出色的分離效率，尤其是在處理大體積樣本時，它能夠在較短時間內(nèi)獲得高純度的外泌體。
減少樣品損失：由于TFF技術采用的是循環(huán)過濾方式，減少了樣品在過濾過程中的損失，提高了回收率。
操作簡便：相比于傳統(tǒng)的超速離心法，TFF技術的操作更為簡便，不需要復雜的離心步驟和設備。
適應性強：TFF技術適用于不同來源的體液樣本，包括血液、尿液等，具有廣泛的適用性。
維護囊泡完整性：外泌體作為一種納米尺寸的柔性顆粒，容易受到物理力的影響而受損。TFF技術通過切向流的方式減少了對外泌體的機械應力，有助于保持其完整性和生物學活性。
綜上所述，TFF技術在外泌體分離中的優(yōu)勢在于其高效性、簡便性、適應性和對囊泡完整性的保護。這些優(yōu)勢使得TFF技術成為外泌體研究和應用中的一種重要工具。

切向流過濾（TFF）在外泌體研究中的應用‌
‌TFF技術（切向流過濾）在外泌體分離中的應用主要體現(xiàn)在其能夠高效、無損地分離外泌體‌。TFF技術通過輕柔的切向作用流過濾膜，減少了對外泌體等柔性囊泡的破壞，保證了其完整性‌1。此外，TFF技術操作簡便，時間更短（<120分鐘），且純度更高（82.8%），回收率顯著提高（77.8%）‌。

TFF技術在外泌體分離中的應用
TFF技術在外泌體分離中的應用主要體現(xiàn)在其能夠高效、無損地分離外泌體。東南大學劉松琴教授團隊開發(fā)了一種基于雙切向流（DTFF）的微流控分離裝置，該裝置結合了雙切向技術和兩種孔徑的納米多孔膜，能夠高效分離和富集直徑在30 nm至200 nm之間的外泌體‌。這種裝置通過構建兩種不同尺寸的分離界面，限定待分離生物囊泡的上下限，從而提高了分離效率，防止了膜的堵塞‌1。

TFF技術在臨床應用中的前景
基于TFF技術的微流控裝置在臨床應用中顯示出良好的前景。從不同疾病患者血清中分離出的外泌體的蛋白質(zhì)組學分析結果顯示，該方法能夠提供更豐富的疾病相關信息，證明了其在未來臨床上的實用性‌。綜上所述，切向流過濾技術在保證外泌體完整性的同時，提高了分離效率，具有廣泛的臨床應用前景。