延時成像技術(shù):精準(zhǔn)監(jiān)測胚胎發(fā)育形態(tài)學(xué)的創(chuàng)新利器
瀏覽次數(shù):294 發(fā)布日期:2024-10-16
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胚胎發(fā)育形態(tài)學(xué)評估:
胚胎發(fā)育是一個高度變化的動態(tài)過程,但使用傳統(tǒng)形態(tài)評估方法檢測胚胎發(fā)育,可能會忽略胚胎的關(guān)鍵階段,特別是胚胎分裂和異常的合子卵裂模式。除形態(tài)學(xué)評分外,有研究者建議篩查染色體錯誤以改進(jìn)優(yōu)質(zhì)胚胎的篩選,然而,基因分析成本高昂,而且需要在活檢過程中仔細(xì)操作以保持胚胎的存活率。所以在評估胚胎質(zhì)量時,形態(tài)動力學(xué)參數(shù)具有重要價值。利用
延時成像技術(shù),可對胚胎從受精到移植的整個過程進(jìn)行非侵入性的
連續(xù)觀察。這項(xiàng)技術(shù)目前已被用于檢測囊胚形成、倍性和胚胎植入潛力等關(guān)鍵事件。
延時成像培養(yǎng)系統(tǒng)(Time lapse system,TLS):
利用培養(yǎng)箱內(nèi)置的顯微鏡和成像系統(tǒng),在
設(shè)定的時間間隔對胚胎進(jìn)行拍攝,并將拍攝的圖像集成創(chuàng)建為實(shí)時圖像。
延時成像培養(yǎng)系統(tǒng)的優(yōu)勢:
- 實(shí)現(xiàn)對胚胎進(jìn)行動態(tài)、連續(xù)地觀測
- 閉合式培養(yǎng),培養(yǎng)環(huán)境穩(wěn)定
- 提供形態(tài)動力學(xué)參數(shù)(卵裂時間間隔、卵裂方式等),優(yōu)化胚胎選擇
延時成像培養(yǎng)系統(tǒng)(TLS)可以提供以下形態(tài)動力學(xué)參數(shù):
形態(tài)動力學(xué)參數(shù) |
tPB2 |
第二極體出現(xiàn)時間 |
tPNf |
原核消失的時間 |
tn |
分裂n細(xì)胞的時間(例如t8,分裂成8細(xì)胞的時間) |
tSB |
從授精到囊胚形成腔隙的時間 |
tB |
從授精到囊腔充滿整個囊胚的階段,囊胚直徑的增加<10% |
tEB |
從授精到囊腔向外擴(kuò)張的時間,囊腔直徑的增加>30%,透明帶變薄 |
tHB |
從授精到囊胚透明帶孵出的時間 |
碎片 |
卵裂球來源的無核結(jié)構(gòu),碎片程度以碎片占胚胎總體積的百分比表示(ESHRE 2000) |
不規(guī)則卵裂(AC) |
非階段特異性卵裂模式 |
直接不均等卵裂(DUC) |
一個卵裂球分裂成三個而不是兩個子細(xì)胞 |
DUC1 |
配子時期直接卵裂形成3-4個卵裂球 |
DUC2 |
二細(xì)胞時期胚胎直接卵裂形成5或6個卵裂球 |
DUC3 |
四細(xì)胞時期胚胎直接卵裂形成≥9個卵裂球 |
逆向卵裂(RC) |
卵裂球融合 |
囊胚皺縮 |
囊胚階段透明帶和滋養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生自分離 |
多核 |
2細(xì)胞或4個細(xì)胞階段或第2天或第4天,至少一個卵裂球存在多個核 |
延時成像技術(shù)在胚胎發(fā)育形態(tài)學(xué)評估的應(yīng)用:
2023年5月23日,Scientific reports發(fā)表題為《
Embryo morphokinetics derived from fresh and vitrified bovine oocytes predict blastocyst development and nuclear abnormalities》的研究論文,展示了通過
延時成像技術(shù)描述玻璃化冷凍牛卵母細(xì)胞形成的胚胎發(fā)育形態(tài)動力學(xué)特征。
圖1.延時成像期間胚胎評估和分析參數(shù)的示意圖
該研究利用
延時成像技術(shù)監(jiān)測新鮮與玻璃化冷凍牛卵母細(xì)胞的胚胎發(fā)育,建模分析早期囊胚卵裂時間和模式,以探索其與第8天囊胚發(fā)育的關(guān)聯(lián)。通過邏輯回歸和ROC特征曲線分析形態(tài)動力學(xué)參數(shù)的預(yù)測潛力,確定了最佳閾值點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn),停滯期與胚胎發(fā)育高度相關(guān),快速的第一次卵裂增加囊胚發(fā)育機(jī)會,而異常的合子卵裂事件則降低囊胚發(fā)育質(zhì)量。玻璃化冷凍雖對胚胎生產(chǎn)損害不大,但顯著影響囊胚發(fā)育,主要表現(xiàn)為卵裂速度慢、停滯期發(fā)生率低和早期胚胎發(fā)育停滯增加?傊,通過
延時成像技術(shù)評判的第一次卵裂時間、停滯期的存在以及無合子卵裂異常是預(yù)測牛卵母細(xì)胞發(fā)育成囊胚能力的最佳指標(biāo)。
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參考文獻(xiàn):
[1]Bamford T, Barrie A, Montgomery S, et al. 2022. Morphological and morphokinetic associations with aneuploidy: a systematic review and meta-analysis. Hum Reprod Update [J], 28: 656-686.
[2]Angel-Velez D, De Coster T, Azari-Dolatabad N, et al. 2023. Embryo morphokinetics derived from fresh and vitrified bovine oocytes predict blastocyst development and nuclear abnormalities. Sci Rep [J], 13: 4765.