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顯微成像案例:THUNDER技術(shù)圖庫(一)

瀏覽次數(shù):455 發(fā)布日期:2024-9-13  來源:徠卡顯微鏡

將計(jì)算清晰度與寬場(chǎng)顯微鏡的速度、熒光信號(hào)靈敏度和易用性相結(jié)合,實(shí)時(shí)解碼三維生物學(xué)*。

為了幫助您回答重要的科學(xué)問題,THUNDER技術(shù)消除了使用基于相機(jī)的熒光顯微鏡觀察厚樣品時(shí)產(chǎn)生的焦外模糊現(xiàn)象。THUNDER技術(shù)采用了我們?nèi)碌墓怆姅?shù)字技術(shù)--Computational Clearing。因此,可以對(duì)多種三維樣品(包括模式生物、組織切片和三維細(xì)胞培養(yǎng)物)進(jìn)行高速、高質(zhì)量成像。請(qǐng)看這些圖片,了解THUNDER技術(shù)是如何幫助研究人員揭示樣品深處最精細(xì)的結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)的。

當(dāng)您看到THUNDER技術(shù)實(shí)現(xiàn)的無霧圖像質(zhì)量后,請(qǐng)?jiān)L問我們的產(chǎn)品頁面了解更多信息。解THUNDER技術(shù)如何將Computational Clearing與寬場(chǎng)顯微鏡的速度、熒光信號(hào)靈敏度和易用性相結(jié)合,從而實(shí)時(shí)解碼三維生物學(xué)*。(*符合 ISO/IEC 2382:2015 標(biāo)準(zhǔn))
 

小鼠淋巴結(jié) - 了解炎癥研究的全貌0:11

使用THUNDER技術(shù)三維細(xì)胞培養(yǎng)獲得的小鼠淋巴結(jié)。視頻由德國慕尼黑 Selina Keppler 博士提供。

凱普勒實(shí)驗(yàn)室的部分工作涉及利用炎癥疾病的臨床前模型來了解炎癥期間細(xì)胞之間的相互作用。為了了解細(xì)胞在器官內(nèi)的分布情況,實(shí)驗(yàn)室研究人員需要將淋巴結(jié)的二維冷凍切片成像方法改為能夠觀察整個(gè)器官的方法。

他們制定了一套清除方案,為淋巴結(jié)成像做好準(zhǔn)備。起初,他們使用共聚焦顯微鏡進(jìn)行成像實(shí)驗(yàn),但這種方法僅對(duì)半個(gè)淋巴結(jié)成像就需要長達(dá) 18 個(gè)小時(shí)。他們無法使用傳統(tǒng)的寬場(chǎng)系統(tǒng),因?yàn)榻M織發(fā)出的自發(fā)熒光使他們無法看到大量所需的信號(hào)。

“只有使用THUNDER技術(shù),我們才能考慮使用基于寬場(chǎng)的系統(tǒng)來研究我們的器官”。

Selina Keppler 博士,德國慕尼黑。

 

僅需幾分鐘就能為淋巴結(jié)內(nèi)的相關(guān)細(xì)胞成像。

Keppler 實(shí)驗(yàn)室的研究人員發(fā)現(xiàn),使用THUNDER技術(shù),他們只需幾分鐘就能對(duì)淋巴結(jié)內(nèi)的相關(guān)細(xì)胞進(jìn)行清晰成像。在圖中所示的例子中,他們能夠清楚地研究濾泡細(xì)胞(黃色)和血管(品紅色)的分布。然后,他們繼續(xù)研究野生型淋巴結(jié)與發(fā)炎淋巴結(jié)的差異。在短短 15 分鐘內(nèi)獲得初步概覽,有助于他們開發(fā)出更高效的篩選工作流程,然后他們可以選擇想要詳細(xì)分析的區(qū)域,使用共聚焦顯微鏡進(jìn)行更詳細(xì)的分割或單細(xì)胞分析。

 

“THUNDER技術(shù)提高了我們的研究效率,節(jié)省了時(shí)間,而且更加全面,因?yàn)槲覀儸F(xiàn)在可以觀察整個(gè)結(jié)構(gòu),而不僅僅局限于觀察器官的部分結(jié)構(gòu)”。

Selina Keppler 博士,德國慕尼黑。

 

擬南芥根 - THUNDER技術(shù)

擬南芥根;早期內(nèi)質(zhì)體標(biāo)記蛋白(與 GFP 融合);隨時(shí)間變化的最大投影 Z 疊圖

圖片提供: 德國海德堡生物研究中心(COS)卡琳-舒馬赫(Karin Schumacher)博士,教授

 

Hela 細(xì)胞 - THUNDER技術(shù)

用活細(xì)胞染料 SIR-Tubulin 染色的 Hela 細(xì)胞。視頻顯示了寬場(chǎng)照明和 TIRF 照明的直接對(duì)比,以及不同THUNDER方法(此處為 ICC 和 LVCC)如何進(jìn)一步改善圖像中的對(duì)比印象。使用配備 Infinity TIRF 的THUNDER 3D活細(xì)胞成像儀,以 638nm 激光線和 110nm 穿透深度進(jìn)行 TIRF 掃描。延時(shí)和記錄時(shí)間為 5 分鐘。記錄了一個(gè)小的 Z 堆棧,以便為THUNDER LVCC 獲取足夠的數(shù)據(jù)(堆棧大。1µm,5 個(gè)平面)。由徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Oliver Schlicker 博士提供

 

小鼠大腦皮層 - THUNDER技術(shù)

小鼠大腦皮層,血管周圍空間顯示 500 nm 綠色熒光珠。血管用與 Alexa 594 熒光團(tuán)連接的 WGA 凝集素染色。樣本由芬蘭奧盧大學(xué)奧盧生物中心 Mika Kaakinen 博士和 Abhishek Singh 碩士提供。樣品由 Immuno Diagnostic Oy 的 Janne Ylärinne 博士提供。

 

小鼠胚胎腎臟 - THUNDER技術(shù)

第 12.5 天的小鼠胚胎腎臟。E-Cadherin(紅色),非特異性(綠色)。樣品由 Kristen Kurtzeborn 碩士制備,由芬蘭赫爾辛基大學(xué)腎臟發(fā)育組 Satu Kuure 教授提供使用。樣本由 Immuno Diagnostic Oy 的 Janne Ylärinne 博士進(jìn)行成像。

 

小鼠食管器官組織 - THUNDER技術(shù)

小鼠食管器官組織。Integrin alpha6(AlexaFluor 488,綠色),Sox2(AlexaFluor 568,紅色),細(xì)胞核(Dapi,藍(lán)色)。

樣本由芬蘭坦佩雷大學(xué) Fabio Tadeu Arroso Martins 博士提供。樣本由 Immuno Diagnostic Oy 的 Janne Ylärinne 博士提供。

 

小鼠全裝載視網(wǎng)膜 - THUNDER技術(shù)

小鼠全裝載視網(wǎng)膜:Iba1+ 小膠質(zhì)細(xì)胞(Alexa Fluor® 488),三維視圖(彩色編碼)顯示兩層膠質(zhì)細(xì)胞(40x/0.95,LVCC)。圖片由西班牙穆爾西亞大學(xué)實(shí)驗(yàn)眼科小組提供。

 

1 毫米小鼠大腦切片 - THUNDER技術(shù)

1 毫米小鼠腦切片。立方體已清除。染色血管和細(xì)胞核。

視頻由中國上海交通大學(xué)李小偉教授提供

 

C.elegans. 轉(zhuǎn)基因 GFP - THUNDER技術(shù)

C. elegans. 轉(zhuǎn)基因 GFP。

視頻由中南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院馬龍教授提供

 

小鼠皮層神經(jīng)元 - THUNDER技術(shù)

小鼠皮層神經(jīng)元。轉(zhuǎn)基因 GFP(綠色)。

圖片由中南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院郭輝教授提供

 

成年果蠅肌肉 - THUNDER技術(shù)

成年果蠅肌肉。肌動(dòng)蛋白(Phalloidin-Cy3,紅色),線粒體(mito-GFP,綠色)。

視頻由中南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院譚潔瓊教授提供。

 

果蠅胚胎 - THUNDER技術(shù)

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中表達(dá) GCaMP 的果蠅胚胎,用于觀察發(fā)育過程中的神經(jīng)活動(dòng)。

視頻由美國 Arnaldo Carreira-Rosario 提供

 

小鼠心臟 - THUNDER技術(shù) 3D 細(xì)胞培養(yǎng)

圍產(chǎn)期第 5 天小鼠心臟 Col1a1-GFP 轉(zhuǎn)基因。

美國檀香山夏威夷大學(xué) Michelle Tallquist 教授提供

 

果蠅蓇葖果 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)

卵泡在 THUNDER 3D 細(xì)胞培養(yǎng)成像系統(tǒng)上以 63X/1.4 油浸物鏡成像。上面的圖像是 27.5 微米厚 Z 疊的三維最大投影。圖片由美國加州大學(xué)伯克利分校 Mark Khoury 和 David Bilder 提供。

皮層神經(jīng)元 - THUNDER技術(shù)
皮層神經(jīng)元在微流室中培養(yǎng) 10 天。用 4% PFA 固定。免疫熒光 Tubulin alpha(綠色),Tau(紅色),DAPI(藍(lán)色)。圖片由美國 Wei Wang 提供

海馬區(qū)的小膠質(zhì)細(xì)胞 - THUNDER技術(shù)

野生型小鼠海馬 CAB 區(qū)的免疫染色。染色:小膠質(zhì)細(xì)胞(綠色)、神經(jīng)元(品紅色)、細(xì)胞核(青色)。圖片由奧地利因斯布魯克市因斯布魯克醫(yī)科大學(xué) Jenny Luna-Choconta 提供。

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