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顯微成像案例:THUNDER技術(shù)圖庫(二)

瀏覽次數(shù):359 發(fā)布日期:2024-9-12  來源:徠卡顯微鏡
將計算清晰度與寬場顯微鏡的速度、熒光信號靈敏度和易用性相結(jié)合,實時解碼三維生物學*。

為了幫助您回答重要的科學問題,THUNDER技術(shù)消除了使用基于相機的熒光顯微鏡觀察厚樣品時產(chǎn)生的焦外模糊現(xiàn)象。THUNDER技術(shù)采用了我們?nèi)碌墓怆姅?shù)字技術(shù)--Computational Clearing。因此,可以對多種三維樣品(包括模式生物、組織切片和三維細胞培養(yǎng)物)進行高速、高質(zhì)量成像。請看這些圖片,了解THUNDER技術(shù)是如何幫助研究人員揭示樣品深處最精細的結(jié)構(gòu)細節(jié)的。

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類有機體集群 - THUNDER技術(shù)

類器官集群,細胞核用 DAPI 染色,細胞質(zhì)膜用 GFP 染色。圖片由奧地利維也納醫(yī)科大學癌癥研究所 Dana Krauß 提供。

顱神經(jīng)的發(fā)育 - THUNDER技術(shù)-3D細胞培養(yǎng)

這些圖像是使用 20 倍的多色散物鏡采集的,物鏡的數(shù)值孔徑為 0.75,工作距離接近 700 微米。圖像由 32 塊拼接而成,成像深度為 672 微米(337 步)。圖片由美國華盛頓特區(qū)喬治華盛頓大學 Anastas Popratiloff 提供

胰島 - THUNDER技術(shù)-3D細胞培養(yǎng)

對離體人類胰島進行 EDoF 重建,以實驗檢測單個人類胰島細胞中促炎細胞因子 IL-17 的表達。圖像具有以下標記:胰島素(AF488;綠色)、胰高血糖素(AF555;紅色)和 IL-17(AF647;品紅色)以及 Hoechst(細胞核;藍色)。圖片由美國加利福尼亞州拉霍亞免疫學研究所 Matthias Von Herrath 實驗室提供

小鼠大腦 - THUNDER技術(shù)

紅色 - AMPK,綠色 - Iba1。圖片由美國德克薩斯農(nóng)工大學的 Maheedhar Kodali 和 Ashok K. Shetty 提供

花粉花 - THUNDER技術(shù)

用 20x/0.8 物鏡拍攝,面積為 6mm²,深度為 100μm。15 幅 4 種顏色(DAPI/GFP/TRITC/Cy5)的拼接圖像,共計 13020 幅圖像。視頻由美國徠卡顯微系統(tǒng)公司 James Marr 提供

C.elegans Gonades - THUNDER技術(shù)

成年雌雄同體,染色:藍色 - DAPI(細胞核),綠色 - SP56(精子),紅色 - RME-2(卵母細胞),紅斑 - PGL-1(RNA + 蛋白顆粒)。圖片由德國哈勒馬丁路德大學 Christian Eckmann 博士教授提供

小鼠主動脈 - THUNDER技術(shù)-3D細胞培養(yǎng)

RAW 延時攝影 - 在涂有明膠的 1.5 號蓋玻片上對培養(yǎng)一周的腹主動脈外植體成像 48 小時。小鼠的基因被編碼為平滑肌細胞特異性tttomato。轉(zhuǎn)錄事件發(fā)生后,平滑肌細胞切除tttomato,并開始表達 eGFP。圖片由美國夏洛茨維爾弗吉尼亞大學 Laura S. Shankman 博士提供。

小鼠主動脈 - THUNDER技術(shù)-3D細胞培養(yǎng)

THUNDER延時攝影 - 在涂有明膠的 1.5 號蓋玻片室載玻片上對培養(yǎng)一周的腹主動脈外植體成像 48 小時。小鼠的基因被編碼為平滑肌細胞特異性tttomato。轉(zhuǎn)錄事件發(fā)生后,平滑肌細胞切除tttomato,并開始表達 eGFP。圖片由美國夏洛茨維爾弗吉尼亞大學 Laura S. Shankman 博士提供。

小鼠肌纖維上的肌營養(yǎng)不良蛋白染色-THUNDER技術(shù)

受感染的 MDCK 上皮細胞 - THUNDER技術(shù)

感染鼠傷寒沙門氏菌的 MDCK 上皮細胞顯示細菌誘導的廣泛肌動蛋白重排(紅色)(綠色,纖毛中的 GFAP 蛋白)。物鏡:HC PL APO 40x/0.95 DRY。圖片由英國布里斯托爾大學 Mark Jepson 博士提供。
 

受狂犬病感染的雪貂腦-THUNDER Imager 3D 細胞培養(yǎng)儀

受狂犬病感染的神經(jīng)元 - 紅色,細胞核 - 藍色。采用 DISCO 方法進行化學清除。物鏡:HC PL FLUOTAR L 20x/0.40 DRY,410 µm z-stack。圖片由德國里姆斯 Friedrich-Loeffler 研究所 Stefan Finke 博士提供。
 

肺上皮細胞(豬)中的流感-THUNDER Imager 3D 細胞培養(yǎng)儀

流感病毒 - 紅色,纖毛 - 綠色,細胞核 - 藍色。物鏡:HC PL APO 40x/0.95 DRY,35 µm z-stack,最大投影。圖片由德國里姆斯 Friedrich-Loeffler 研究所 Stefan Finke 博士提供

肺器質(zhì)體 - THUNDER技術(shù)-3D細胞培養(yǎng)

從肺泡干細胞和祖細胞中提取的小鼠肺器官組織。20x 空氣透過 1 毫米塑料底。樣本由德國巴特諾海姆心肺研究 MPI 的 Pumaree Kanrai 博士提供。
 

假小細胞(胰島β細胞)-THUNDER Imager 3D 細胞培養(yǎng)儀

生長為假小體(胰島β細胞)的 MIN6 細胞。DAPI(藍色)、胰島素(Alexa488,綠色)、膜受體(Alexa594,紅色)、類磷脂質(zhì)蛋白(Alexa647,白色)。樣本由德國巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 Rémy Bonnavion 博士提供。

蝗蟲神經(jīng)節(jié) - THUNDER技術(shù)-3D組織成像

顯示最大投影的蝗蟲神經(jīng)節(jié)圖像。樣本厚度為 110 微米,數(shù)據(jù)量為 376 MB,使用計算清除功能的采集時間為 3 秒。圖片由德國徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Korinna Schoch 拍攝。
 

HeLa 細胞球-THUNDER Imager 3D活細胞和3D細胞培養(yǎng)儀

用 Alexa Fluor 568 磷脂酰蛋白(肌動蛋白)和 YOYO 1 碘化物(細胞核)染色的 HeLa 細胞球。

圖片由德國徠卡顯微系統(tǒng)公司 Jan Schumacher 博士拍攝。


斑馬魚-THUNDER技術(shù)-3D活細胞和3D細胞培養(yǎng)

斑馬魚幼體(受精后 72 小時)。血管用綠色(熒光)表示。樣本由德國巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所的 Almary Guerra 博士和 Didier Stainier 博士提供。
 

小鼠腎臟切片 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像

小鼠腎臟切片,含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。樣品為美國馬薩諸塞州沃爾瑟姆市賽默飛世爾科技公司生產(chǎn)的 FluoCells™ 制備的 3 號載玻片。
 

皮層神經(jīng)元培養(yǎng)-THUNDER技術(shù)-3D細胞培養(yǎng)

培養(yǎng)的皮層神經(jīng)元,其中綠色表示 beta-III-tubulin,藍色表示細胞核。由 59 個平面組成的圖像堆棧體積為 21 µm³。樣本由德國馬格德堡 FAN GmbH 提供。

 

培養(yǎng) VERO 細胞-THUNDER技術(shù) 3D細胞培養(yǎng)儀

用 STAR488 波形蛋白(綠色)、STAR580 Tom20(黃色)和 DAPI(藍色)染色的培養(yǎng) VERO 細胞。樣本由德國哥廷根 Abberior GmbH 提供。

YFP 小鼠腦切片 - THUNDER技術(shù)-組織成像
用 GFAP-A647 染色的 YFP 小鼠腦切片。用THUNDER技術(shù)組織成像。美國費城賓夕法尼亞大學 Hong Xu 博士提供。

果蠅三齡幼蟲 - THUNDER技術(shù)-組織成像
用 AlexaFluor™647 標記突觸后位點、AlexaFluor™555 與類磷脂結(jié)合、AlexaFluor™488 標記運動神經(jīng)元亞群的果蠅三齡幼蟲小片。樣本由美國馬里蘭州貝塞斯達 NIH/NIMH 的 Amicia Elliott 博士提供。

Cyclops - THUNDER技術(shù)-組織成像
Cyclops sp. 顯示細胞核(綠色)、乙;-微管蛋白(紅色)和血清素(青色)。圖像堆棧的總體積為 332 微米 x 332 微米 x 84 微米,有三種顏色,每種顏色有 305 個 Z 平面。使用的物鏡為 HC PL FLUOTAR 40x/1.30 OIL。樣品由羅斯托大學生物學博士 Thomas Frase 提供。Thomas Frase 提供。

斑馬魚--THUNDER技術(shù)-模式生物成像
斑馬魚幼體視頻(1x Plan APO 物鏡,變焦系數(shù) 11:1,18 z 切片堆疊,約 300 µm z 深度),其中綠色(kdrl:GFP)顯示血管生成,紅色(GATA1:dsRed)顯示紅細胞和血小板。由德國巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所的 Almary Guerra 博士和 Didier Stainier 教授博士提供。

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