液相色譜的介紹及其在食品、獸藥及生物化學(xué)和生物工程等領(lǐng)域中的應(yīng)用
瀏覽次數(shù):337 發(fā)布日期:2024-9-6
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在色譜法中存在兩相,一相是固定不動(dòng)的,我們把它叫做固定相;另一相則不斷流過(guò)固定相,我們把它叫做流動(dòng)相。
色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來(lái)進(jìn)行分離的。
使用外力使含有樣品的流動(dòng)相(氣體、液體)通過(guò)一固定于柱中或平板上、與流動(dòng)相互不相溶的固定相表面。當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。
由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著流動(dòng)相的移動(dòng),混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合,實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。
應(yīng)用
一、在食品研究中的分析應(yīng)用
1.食品中的天然成分碳水化合物類(lèi)脂化合物、甘油三酸酯、膽固醇脂肪酸和有機(jī)酸蛋白、肽、氨基酸2.食品添加劑酸味劑、甜味劑、香精、乳化劑抗氧化劑、防腐劑顏料和染料(色素〕維生素3.污染物霉菌(黃曲霉毒素)農(nóng)藥和獸藥殘留多環(huán)芳烴(PAHS)和亞硝酸
二、在獸藥研究中分析應(yīng)用
1.在醫(yī)藥研究中分析應(yīng)用藥物分析有USP、BP、CP等標(biāo)準(zhǔn)常用藥物研究中的應(yīng)用:解熱鎮(zhèn)痛藥、鎮(zhèn)靜藥、安定藥、心血管藥、磺胺類(lèi)消炎藥等。
甾體藥物研究中的應(yīng)用:腎上腺皮質(zhì)激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等。
抗菌素類(lèi)藥物研究中的應(yīng)用:青霉素、頭孢菌素、慶大毒素、四環(huán)素、氯霉素、諾氟沙星等。
中草藥研究中的應(yīng)用:生物堿、甙類(lèi)(皂甙、強(qiáng)心甙、黃酮甙等)、萜類(lèi)
手性藥物研究中的應(yīng)用:光學(xué)異構(gòu)體的拆分(如解毒劑D-青霉胺毒性小,L-異構(gòu)體毒性很強(qiáng))
醫(yī)療藥物的檢測(cè)、新藥研究、藥物代謝、藥代動(dòng)力學(xué)研究。
三、在生物化學(xué)和生物工程中的應(yīng)用
1.氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)的分析研究核堿、核苷、核苷酸和核酸的分析研究生物胺的分析研究(兒茶酚胺類(lèi))
在精細(xì)化工分析中的應(yīng)用
1.醇、醛和酮、醚的分離分析
2.酸和酯的分離分析表面活性劑的分析聚合物的分析研究
3.藥物、農(nóng)藥、染料、炸藥等工業(yè)產(chǎn)品在無(wú)機(jī)離子分析中應(yīng)用4.飲用水、酸雨、土壤中陰離子和陽(yáng)離子分析
四、在公安、刑警破案工作需要毒品分析等
1.在環(huán)境污染分析中的應(yīng)用
2.廢氣、廢水、廢渣中多環(huán)芳烴、多氯聯(lián)苯、農(nóng)藥殘留酚類(lèi)和胺類(lèi)的檢測(cè)
液相色譜圖相關(guān)術(shù)語(yǔ)
色譜峰-Peak
1.色譜柱流出組分通過(guò)檢測(cè)器時(shí)產(chǎn)生的響應(yīng)信號(hào)的微分曲線(xiàn)
峰底-Peak Base峰的起點(diǎn)與終點(diǎn)之間連接的直線(xiàn)
峰高 - Peak Height峰最大值到峰底的距離
峰寬-Peak Width在峰兩側(cè)拐點(diǎn)處所作切線(xiàn)與峰底相交兩點(diǎn)之間的距離
半(高)峰寬-Peak Width at Half Height通過(guò)峰高的中點(diǎn)作平行于峰底的直線(xiàn),其與峰兩側(cè)相交兩點(diǎn)之間的距離峰面積-Peak Area峰與峰底之間的面積,又稱(chēng)響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)偏差;σ-Standard Error0.607倍峰高處所對(duì)應(yīng)峰寬的一半拖尾峰 - Tailing Peak后沿較前沿平緩的不對(duì)稱(chēng)峰
前伸峰- Leading Peak前沿較后沿平緩的不對(duì)稱(chēng)峰
鬼峰- Ghost Peak并非由試樣所產(chǎn)生的峰;亦稱(chēng)假峰
基線(xiàn)-Baseline在正常操作條件下,僅由流動(dòng)相所產(chǎn)生的響應(yīng)信號(hào)的曲線(xiàn)
基線(xiàn)飄移-Baseline Drift基線(xiàn)隨時(shí)間定向的緩慢變化
基線(xiàn)噪聲:N-Baseline Noise由各種因素所引起的基線(xiàn)波動(dòng)
譜帶擴(kuò)展- Band Broadening由于縱向擴(kuò)散,傳質(zhì)阻力等因素的影響,使組分在色譜柱內(nèi)移動(dòng)過(guò)程中譜帶寬度增加的現(xiàn)象
死時(shí)間to-Dead time不被固定相滯留的組分,從進(jìn)樣到出現(xiàn)峰最大值所需的時(shí)間
保留時(shí)間,tR-Retention time組分從進(jìn)樣到出現(xiàn)峰最大值所需的時(shí)間
死體積,Vo-Dead volume不被固定相滯留的組分,從進(jìn)樣到出現(xiàn)峰最大值所需的流動(dòng)相體積
保留體積,VR-Retention volume組分從進(jìn)樣到出現(xiàn)峰最大值所需的流動(dòng)相體積