產(chǎn)品信息
細(xì)胞名稱(chēng) 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞株轉(zhuǎn)染 OVA；MC-38/OVA
細(xì)胞別稱(chēng) MC-38/OVA

產(chǎn)品規(guī)格 1 × 106cells/T25 培養(yǎng)瓶
生長(zhǎng)特性 半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 混合生長(zhǎng)
培養(yǎng)體系 RPMI 1640＋10% FBS＋1% P/S
傳代比例 1:2
消化時(shí)間 1-2min
凍存條件 無(wú)血清細(xì)胞凍存液（科研級(jí)）
培養(yǎng)環(huán)境 氣相：空氣，95% ；二氧化碳，5% 。溫度：37℃。

注意事項(xiàng)
收集細(xì)胞瓶中完全培養(yǎng)基做過(guò)渡對(duì)比培養(yǎng);每傳 10  代左右，用嘌呤霉素 （4ug/ml）鞏固一下。 

常溫細(xì)胞收貨后處理方法
1.    收到細(xì)胞后，首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)基外溢、渾濁等現(xiàn)象， 請(qǐng)及時(shí)拍照并與我們聯(lián)系。
2.    用 75%酒精對(duì)培養(yǎng)瓶表面進(jìn)行消毒處理，將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng) 2~4 h ， 以 恢復(fù)細(xì)胞狀態(tài)。
3.    靜置完成后，取出培養(yǎng)瓶，顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存 （40× , 100× ,200×各一張）前三天照片為重要售后依據(jù)。如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞異常請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系， 如果細(xì)胞簽收三天內(nèi)未與我們聯(lián)系，則默認(rèn)為收貨良好。
4.    若細(xì)胞密度超過(guò) 80% ，則可以根據(jù)提供的細(xì)胞培養(yǎng)步驟進(jìn)行傳代或凍存；若細(xì)胞密度未達(dá) 到 80% ，收集懸浮細(xì)胞，加入 5mL 完全培養(yǎng)基到原瓶中，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
凍存細(xì)胞收貨后處理方法
1.    收到細(xì)胞后，首先觀察泡沫箱中干冰是否有剩余，凍存管是否完好，是否有解凍情況，若 發(fā)現(xiàn)干冰完全汽化或凍存管有解凍現(xiàn)象，請(qǐng)及時(shí)拍照并與我們聯(lián)系。如果細(xì)胞簽收三天內(nèi) 未與我們聯(lián)系，則默認(rèn)為收貨良好。
2.    復(fù)蘇第一管如有活性、狀態(tài)問(wèn)題及時(shí)與我們聯(lián)系，會(huì)有技術(shù)人員與您溝通指導(dǎo)后再?gòu)?fù)蘇第 二管。
特別說(shuō)明：未與我方聯(lián)系，擅自復(fù)蘇第二管出現(xiàn)問(wèn)題不予售后

細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1.    復(fù)蘇細(xì)胞：從液氮灌或-80℃冰箱中查找到需要復(fù)蘇的細(xì)胞，水浴鍋提前打開(kāi)預(yù)熱37℃。
1)    將查找到的凍存細(xì)胞在 37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2)    將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml  完全培養(yǎng)基的離心管中，1000rpm  離心 5min；
3)    棄去上清液，補(bǔ)加 4-6mL 完全培養(yǎng)基后吹勻，接種于 T25 培養(yǎng)瓶中（或 6cm 皿中）， 培養(yǎng)過(guò)夜，第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2.    細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90% ，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1)    懸浮細(xì)胞用離心管收集細(xì)胞懸液，1000rpm  離心 5min ，棄去上清液；
2)    貼壁細(xì)胞用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次；
3)    加 1-2mL 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消 化 1-2min ，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回 操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后，加 5mL 以上含 10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化；
4)    輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在 1000RPM 條件下離心 5-8min ，棄去上清液；
5)    將懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞收集到的細(xì)胞沉淀，加 1-2mL 完全培養(yǎng)基吹打混勻；
6)    按 5-6mL/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按 1:2 的比例分到新的含 5-6 mL 培養(yǎng)液的培養(yǎng) 皿中或者培養(yǎng)瓶中。
（即 1 個(gè) T25 傳代接種至 2 個(gè) T25 或者 2 個(gè)直徑為 6cm 的培養(yǎng)皿）
3.    細(xì)胞凍存：細(xì)胞收集參照傳代步驟 1~2 ；按凍存數(shù)量加入無(wú)血清凍存液后直接放-80℃冰箱 過(guò)夜，后續(xù)可轉(zhuǎn)入液氮罐中長(zhǎng)期保存。