02 驗證項目
精密度

批內精密度：選取至少5個新鮮全血樣品，樣品的淋巴細胞亞群細胞計數應覆蓋低中高水平。每個標品從熒光染 色到上機檢測重復3次，并確保所有測試都在同一臺儀器的同一批內測定，整個操作過程由同一個操作 人員完成。先計算每個樣品重復3次后檢測結果的CV,然后計算所有樣品的平均CV，所有樣品的平均CV 宜＜10％，最大不超過20％。實驗室可根據不同水平的淋巴細胞亞群細胞計數設定不同程度的可接受CV 標準。

日間精密度：宜使用正常和異常兩個濃度水平的全血質控品，每天從熒光染色到上機測定重復操作3次， 至少重 復4天，整個操作過程可由不同操作人員完成。先計算每天每個全血質控品重復3次檢測結果的CV值，然 后據此計算每個全血質控品4天的平均CV，最后得出兩個全血質控品檢測結果的平均CV。判定標準同上。

穩(wěn)定性

樣品穩(wěn)定性：驗證樣品在確定的抗凝及處置條件下的穩(wěn)定性。采集健康人或患者的樣品至少 5 份，即刻染色-裂 解-固定并上機測定，以此結果作為基線參考水平，按照實驗室的具體環(huán)境溫度控制條件和預期的樣品待檢時間，在抗凝劑保存時間內，設置不同的時間點對上述樣品進行重復處理和上機測定，獲取檢測結果，并與基線水平結果進行比較，以相對偏差或絕對偏差表示，檢測結果應符合實驗室制定的驗證要求。淋巴細胞亞群計數過低者，宜以絕對偏差進行驗證；亦可對試劑說明書聲明的穩(wěn)定性條件進行驗證。

處理后標本穩(wěn)定性：旨在明確處理后標本的最長待檢時間。采集健康人或患者的樣品至少5份，對完成染色-裂解-固定 后的標本即刻上機檢測結果作為基線水平。按實驗室獲得檢測結果的最長可接受時間為期限，設置不同 的時間點對固定后標本進行上機檢測。結果判定同上一條。亦可對試劑說明書聲明的穩(wěn) 定性條件進行驗證。

線性范圍

適用于淋巴細胞亞群絕對細胞計數。根據試劑說明書聲明的線性范圍，取一份淋巴細胞計數或亞群 計數接近線性范圍上限的臨床樣品，采用樣品稀釋液按照比例制備 5～9 個不同濃度的標本，濃度范圍應覆蓋臨床醫(yī)學決定水平；通過染色-裂解-固定后，上機測定， 每個標本重復測定 4 次，取均值。分析實際測定的亞群細胞數量均值與理論值之間的相關性，相關系數 r 應≥0.975。

可比性

抗體試劑批次變更前后的可比性驗證：宜使用至少3份健康人的新鮮全血樣品和2份不同濃度質控品，采用新批號抗體試劑和當前批號抗體 試劑進行熒光染色、上機檢測，以當前批號試劑檢測結果為參考，計算相對偏差或絕對偏差。檢測結果 應符合實驗室制定的驗證要求。驗證要求的制定應考慮不同水平的淋巴細胞亞群計數設定不同程度的偏 差值，淋巴細胞亞群計數過低者，宜以絕對偏差進行驗證。

不同檢測系統(tǒng)間的可比性驗證：宜使用至少 5 份新鮮全血樣品（樣品的淋巴細胞亞群細胞計數應覆蓋低中高水平）和 2 份不同濃度 水平的全血質控品，完成染色-裂解-固定后，分別采用待評價檢測系統(tǒng)和比對檢測系統(tǒng)進行檢測。比對 檢測系統(tǒng)應為儀器性能良好、規(guī)范開展室內質量控制、室間質量評價成績合格的淋巴細胞亞群常規(guī)檢測 系統(tǒng)，以比對檢測系統(tǒng)的測定結果為參考，計算相對偏差或絕對偏差。檢測結果應符合實驗室制定的驗 證要求。驗證要求的制定應考慮不同水平的淋巴細胞亞群計數設定不同程度的偏差值，淋巴細胞亞群計 數過低者，宜以絕對偏差進行驗證。

不同檢測人員間的可比性驗證：宜使用至少5份新鮮全血樣品和2份不同濃度水平的全血質控品，分別由實驗室內淋巴細胞亞群檢測 培訓合格的不同檢測人員完成染色-裂解-固定、上機檢測和數據分析，計算不同檢測人員間檢測結果的 相對偏差或絕對偏差。驗證結果應符合實驗室制定的驗證要求。

準確度

可使用室間質評回報結果驗證淋巴細胞亞群項目的準確度。