活細(xì)胞成像用于共培養(yǎng)研究
瀏覽次數(shù):694 發(fā)布日期:2024-5-16
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細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是目前體外實驗中最常用的方法。單層的細(xì)胞培養(yǎng)因不能完全模擬多細(xì)胞相互作用的體內(nèi)環(huán)境、細(xì)胞趨向單一化,而無法探討多細(xì)胞間的關(guān)系。因此,為了滿足科研需要,細(xì)胞共培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)運而生。細(xì)胞共培養(yǎng)又稱為復(fù)合培養(yǎng)或混合培養(yǎng),是指將2種或2種以上細(xì)胞放在同一培養(yǎng)系統(tǒng)中進行培養(yǎng)。
與單層細(xì)胞培養(yǎng)相比,細(xì)胞共培養(yǎng)模型更接近人體內(nèi)環(huán)境,更有利于研究細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與培養(yǎng)環(huán)境間的相互作用,通過檢測不同細(xì)胞因子之間的關(guān)系,探討藥物的作用機制和可能的作用靶點。目前,共培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于體外生理及病理模型、組織工程、細(xì)胞分化研究、藥物研發(fā)、藥物分析以及藥物作用機制和部位的研究。
細(xì)胞共培養(yǎng)方法分為三種:
①直接接觸共培養(yǎng) ②間接接觸共培養(yǎng) A、條件培養(yǎng)基共培養(yǎng)法 B、“爬片式”共培養(yǎng)法 C、嵌入式細(xì)胞共培養(yǎng)法 ③三維細(xì)胞共培養(yǎng)法
為了研究NK細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞在直接接觸共培養(yǎng)后對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用,我們使用Celloger
® Mini Plus對樣本進行延時記錄。Celloger
® Mini Plus是一款全自動活細(xì)胞成像系統(tǒng),配備了最先進的熒光/明場顯微鏡、自動聚焦和實時多位點成像技術(shù)。Mini Plus提供可以獲得最佳圖像和準(zhǔn)確結(jié)果的所有工具,各種基于細(xì)胞的研究工作和應(yīng)用都可以用這個全方位的系統(tǒng)來完成。該成像設(shè)備使用全自動鏡頭可以分別在X/Y軸移動117mm x 77mm,可以根據(jù)實驗人員的設(shè)置(時間間隔、周期、總時長)在移動范圍里獲取多個位點的圖像。
應(yīng)用實例:Celloger® Mini Plus用于共培養(yǎng)研究
將Calcein-AM標(biāo)記的K562細(xì)胞與NK92細(xì)胞共培養(yǎng),研究K562與NK92細(xì)胞之間的相互作用,使用Celloger
® Mini Plus在4x物鏡、明場與綠色熒光通道下記錄兩者細(xì)胞間的相互作用,每隔30分鐘記錄一次圖像,共記錄18小時。下圖為明場與熒光代表性的Merge圖像。
圖. K562與NK92細(xì)胞共培養(yǎng)的明場與熒光Merge圖像
結(jié)論
Celloger
® Mini Plus儀器體積小巧,可以放置在普通細(xì)胞培養(yǎng)箱中,并且可以承受自生熱量,從而實現(xiàn)長期成像。通過優(yōu)化熒光濾光片和光路,可以用最小的光強實時獲得清晰的活細(xì)胞明場圖像以及熒光圖像。此外,Celloger
® Mini Plus兼容多種類型的培養(yǎng)容器,位置重現(xiàn)性高,多點成像時掃描性能穩(wěn)定。因此,Celloger
® Mini Plus將為您的研究帶來可靠的結(jié)果。