藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程是一條漫長(zhǎng)而充滿挑戰(zhàn)的道路，不僅風(fēng)險(xiǎn)高，而且成本巨大。從發(fā)現(xiàn)一種新藥到最終獲批上市，通常需要10年以上的時(shí)間。
 
基于生物層干涉技術(shù)（BLI）的Octet®非標(biāo)記分子互作分析系統(tǒng)專為精準(zhǔn)親和力分析和高通量性能而生，能夠大大縮短藥物研發(fā)時(shí)間，提高下游開(kāi)發(fā)的成功率。
歐洲藥品管理局（EMA）和美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）可提供詳盡的藥物評(píng)估資料。這些資料詳盡記錄了已經(jīng)獲批準(zhǔn)上市藥物的質(zhì)量研究、藥理、藥代動(dòng)力學(xué)、毒理等非臨床研究，以及臨床研究的詳細(xì)資料（均可免費(fèi)下載）。分析這些資料發(fā)現(xiàn)，多款在2023年上市藥物在藥理學(xué)評(píng)估中用到了Octet®！

 
BRIUMVI
BRIUMVI是TG Therapeutics開(kāi)發(fā)的CD20單克隆抗體，針對(duì)B細(xì)胞上的CD20的獨(dú)特表位，是目前唯一被批準(zhǔn)用于復(fù)發(fā)型多發(fā)性硬化癥患者的單抗藥物。一年只需注射兩次，一次一個(gè)小時(shí)。BRIUMVI 與另一種治療方法（特立氟胺）作為對(duì)照進(jìn)行了臨床研究。543名接受BRIUMVI治療的患者與 546名接受特立氟胺治療的患者的結(jié)果顯示，BRIUMVI 在減少?gòu)?fù)發(fā)和顯著降低磁共振成像（MRI）的腦損傷方面被證明優(yōu)于特立氟胺^[1]。

 
本研究使用Octet®測(cè)試了BRIUMVI（TG-1101）與Fc受體的親和力^[2]。結(jié)果顯示：BRIUMVI與Fc受體親和力強(qiáng)于其他上市CD20單克隆抗體藥物，這說(shuō)明其可以增強(qiáng)ADCC效應(yīng)。而FcRn親和力和其他抗體差不多，這意味著其半衰期與其他抗體藥物一致^[3]。
 

圖2. BRIUMVI提交EMA申報(bào)資料中關(guān)于Octet®實(shí)驗(yàn)的描述


表1. Octet®測(cè)試BRIUMVI與Fc受體數(shù)據(jù)，將Fc受體固化在HIS1K傳感器上與不同濃度的抗體測(cè)試
 
 
Beyfortus
阿斯利康（AstraZeneca）和賽諾菲（Sanofi）合作開(kāi)發(fā)的Beyfortus（nirsevimab）是一種針對(duì)呼吸道合胞病毒（RSV）表面F蛋白的單克隆抗體，已在美國(guó)獲批用于預(yù)防在第一個(gè)RSV季節(jié)出生或進(jìn)入第一個(gè)RSV季節(jié)的新生兒和嬰兒的下呼吸道疾病（LRTD）。RSV是一種傳染性很強(qiáng)的病毒，可導(dǎo)致嬰兒患上嚴(yán)重的呼吸道疾病，是美國(guó)一歲以下嬰兒住院的主要原因。Beyfortus是第一個(gè)被批準(zhǔn)用于保護(hù)廣大嬰兒群體的RSV預(yù)防藥物，可在RSV季節(jié)開(kāi)始或者之后單劑量靈活給藥^[4]。
 
在研究中Octet®系統(tǒng)被用于檢測(cè)RSV F蛋白突變體與1G7（nirsevimab的親本抗體）的結(jié)合動(dòng)力學(xué)^[5]。1G7與RSV A2和RSV B9320融合前F蛋白的結(jié)合親和力（KD值）分別為0.12nM和1.22nM。1G7對(duì)攜帶N208Y和N67I/N208Y取代的RSV A F蛋白的結(jié)合親和力降低，與親本F蛋白相比，KD值分別降低了約5倍和56倍。1G7對(duì)攜帶K68N和N201S取代的RSV B F蛋白的結(jié)合親和力也降低，KD值分別降低了12倍和29倍�？贵w對(duì)這些F變異體的結(jié)合親和力降低主要是由于解離速率常數(shù)koff變大（解離更快）。在實(shí)驗(yàn)條件下，未檢測(cè)到對(duì)含有N208D、N208S和雙重取代K68N/N201S和K68N/N208S的RSV B F蛋白的結(jié)合活性。Octet®檢測(cè)的抗體結(jié)合動(dòng)力學(xué)和病毒中和活性存在非常好的相關(guān)性。病毒耐藥機(jī)制的產(chǎn)生可能是突變體與抗體的親和力削弱或者完全消失。
 

表2. 在Octet®上測(cè)量單抗與RSV A2和B9320三聚體融合前蛋白的結(jié)合動(dòng)力學(xué)：三聚體F蛋白和F蛋白變異體（20 μg/mL）加載到生物傳感器上300秒，然后在動(dòng)力學(xué)緩沖液中平衡60秒，隨后單抗結(jié)合（250-62.5nM）60秒，結(jié)合解離180秒；使用Octet®數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和曲線擬合
 
 
Elrexfio
FDA在2023年8月加速批準(zhǔn)ELREXFIO™用于治療復(fù)發(fā)或難治性多發(fā)性骨髓瘤（RRMM）的成人患者。ELREXFIO™是一種通過(guò)皮下遞送的B細(xì)胞成熟抗原（BCMA）-CD3雙特異性抗體（BsAb）免疫療法，它能夠同時(shí)與骨髓瘤細(xì)胞上的BCMA和T細(xì)胞上的CD3結(jié)合，將它們結(jié)合在一起并激活T細(xì)胞以殺死骨髓瘤細(xì)胞。II期臨床數(shù)據(jù)（NCT04649359）發(fā)現(xiàn)：在ELREXFIO™之前已經(jīng)接受四線或更多線治療的患者（n=97）中，總體緩解率為58%，且估計(jì)82%的患者將緩解維持至少9個(gè)月^[6]。
 
BCMA能夠結(jié)合2種生物配體——B細(xì)胞活化因子（BAFF）和增殖誘導(dǎo)配體（APRIL）。通過(guò)Octet®評(píng)估elranatamab對(duì)BCMA/配體相互作用的阻斷作用[7]。當(dāng)elranatamab捕獲人BCMA時(shí)，未檢測(cè)到人APRIL或人BAFF與BCMA的結(jié)合。這表明elranatamab阻斷了BCMA與其配體的相互作用。


圖3. ELREXFIO申報(bào)資料中關(guān)于Octet®實(shí)驗(yàn)的論述
 
 
為什么有越來(lái)越多的藥物
使用Octet®進(jìn)行數(shù)據(jù)申報(bào)呢？

1  Octet®的BLI技術(shù)被《美國(guó)藥典》和國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心認(rèn)可的檢測(cè)動(dòng)力學(xué)的技術(shù)之一：
15年的等待！BLI技術(shù)正式列入《美國(guó)藥典》（USP-NF）
CDE重磅發(fā)布！生物層干涉技術(shù)寫(xiě)入ADC指導(dǎo)原則
 
2  通量高，使用成本低，檢測(cè)更快速

3  是生物制藥的“多面手”，貫穿抗體研發(fā)和生產(chǎn)的各個(gè)環(huán)節(jié)中，無(wú)論是前期抗體庫(kù)構(gòu)建后的大規(guī)模篩選、親和力的精準(zhǔn)測(cè)定、研發(fā)后期的免疫原性測(cè)定、細(xì)胞株的篩選、還是生產(chǎn)階段的殘留物監(jiān)控和抗體活性檢測(cè)。
  
 


《生物層干涉技術(shù)小分子應(yīng)用文集_{（第一版）}》


下載文檔

 
《生物層干涉技術(shù)小分子應(yīng)用文集（第一版）》詳細(xì)介紹了生物層干涉（BLI）技術(shù)的原理，及其在小分子領(lǐng)域的多個(gè)應(yīng)用場(chǎng)景，并對(duì)BLI技術(shù)應(yīng)用于小分子研究的20余篇代表性文獻(xiàn)進(jìn)行了整理匯總：內(nèi)容涵蓋從防御機(jī)制到垂釣驗(yàn)證，再到小分子篩選、表征、優(yōu)化等多個(gè)方面，全展示了BLI技術(shù)在小分子研究中的強(qiáng)大潛力和實(shí)踐成果。


-參考文獻(xiàn)-
[1] https://briumvi.com/
[2] EMA Assessment report Briumvi
[3] US patent 11807689
[4] Beyfortus approved in the US for the prevention of RSV lower respiratory tract disease in infants (astrazeneca.com)
[5] US FDA: APPLICATION; NUMBER:761328Orig1s000; INTEGRATED REVIEW
[6] Pfizer’s ELREXFIO™ Receives U.S. FDA Accelerated Approval for Relapsed or Refractory Multiple Myeloma | Pfizer
[7] EMA Assessment report ELREXFIO