未來(lái),個(gè)性化醫(yī)療將成為醫(yī)學(xué)發(fā)展的主旋律,而實(shí)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞水平的精準(zhǔn)分析將是這一趨勢(shì)的關(guān)鍵。一種名為T(mén)IGR組織研磨分離儀的技術(shù)正在引領(lǐng)這場(chǎng)變革。這項(xiàng)創(chuàng)新技術(shù)不僅能夠快速、高效地從腫瘤組織中提取細(xì)胞,還能夠保持細(xì)胞的完整性和純度,為個(gè)性化醫(yī)療開(kāi)啟了新的篇章。
TIGR組織研磨分離儀核心部件是該系統(tǒng)的重要組成部分
圖2展示了組織解離工作流程和臺(tái)式儀器。(a) 轉(zhuǎn)子插件位于離心管的蓋子中。(b) 組織樣品放置在轉(zhuǎn)子磨牙之間的自由空間中。(c) 磨牙單元的定子插件插入標(biāo)準(zhǔn)尼龍細(xì)胞過(guò)濾器中。(d)在接下來(lái)的準(zhǔn)備步驟中,將離心管放在蓋子上并旋緊。(e) 通過(guò)形狀匹配連接,研磨管和臺(tái)式儀器相結(jié)合。齒輪電機(jī)旋轉(zhuǎn)與轉(zhuǎn)子插件連接的軸。旋轉(zhuǎn)方向可以設(shè)置為順時(shí)針或逆時(shí)針。
表格1:TIGR組織研磨分離儀的技術(shù)參數(shù)的概覽
技術(shù)參數(shù)
通量 |
4管并行運(yùn)行 |
細(xì)胞篩(尼龍) |
40、70、100μm網(wǎng)格大小 |
一次性平臺(tái) |
標(biāo)準(zhǔn)50 mL的錐形離心管 |
載量/管 |
50-300 mg組織加500 μL緩沖液 |
電機(jī)額定功率 |
2.5 W |
扭矩 |
0.6 Nm |
研磨速度 |
30~100 rpm |
旋轉(zhuǎn)模式 |
剪切/研磨和兩者組合 |
作為概念驗(yàn)證,我們使用新鮮切除的小鼠肝臟樣本驗(yàn)證了組織研磨器的性能。與傳統(tǒng)的gentleMACS®標(biāo)準(zhǔn)酶處理相比,TIGR組織研磨分離儀展現(xiàn)了非酶解離的優(yōu)勢(shì)。在進(jìn)行了細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞存活率和解離等級(jí)的測(cè)定后,結(jié)果顯示組織研磨分離儀在較短的處理時(shí)間內(nèi),大部分情況下能夠達(dá)到或超過(guò)活細(xì)胞數(shù)量和產(chǎn)量。盡管酶預(yù)處理在組織樣本的解離等級(jí)上表現(xiàn)出一定優(yōu)勢(shì),但明顯可見(jiàn),酶處理導(dǎo)致了組織結(jié)構(gòu)的松弛,使得解離更加完全。在這項(xiàng)研究中,組織研磨分離儀的解離時(shí)間不到兩分鐘,而gentleMACS®方法需要約60分鐘,因此可以顯著節(jié)省時(shí)間,尤其是考慮到多個(gè)樣本的并行處理。這些結(jié)果表明,組織研磨分離儀在解離實(shí)驗(yàn)中具有高效性和可行性,為未來(lái)個(gè)性化醫(yī)療領(lǐng)域提供了一種快速而有效的腫瘤樣本處理方法。
圖3:TIGR組織研磨分離儀和gentleMACS®分離肝組織后的細(xì)胞產(chǎn)量和分離等級(jí)。A) 與GM-、GM+和TG相比,肝組織分離后的細(xì)胞產(chǎn)量。B) 從剩余組織中量化的分離等級(jí),對(duì)比了GM-、GM+和TG。
傳統(tǒng)的組織解離方法存在諸多限制,而無(wú)酶機(jī)械分離技術(shù)通過(guò)一種快速、可重復(fù)的方式,將細(xì)胞從組織基質(zhì)中溫和地移除,大大提高了分析的效率和準(zhǔn)確性。這一技術(shù)不僅適用于腫瘤細(xì)胞等純凈的單個(gè)細(xì)胞群體,還可以應(yīng)用于多種組織類(lèi)型,為未來(lái)的個(gè)性化醫(yī)學(xué)方法提供了廣闊的應(yīng)用前景。
隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和優(yōu)化,無(wú)酶機(jī)械分離技術(shù)將成為個(gè)性化診斷領(lǐng)域的重要突破口。通過(guò)結(jié)合高通量的分析技術(shù),我們可以實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的異質(zhì)性等復(fù)雜問(wèn)題的深入研究,為個(gè)性化治療提供更精準(zhǔn)的指導(dǎo)。讓我們共同期待無(wú)酶機(jī)械分離技術(shù)為個(gè)性化醫(yī)療帶來(lái)的革命性變革!