分子相互作用儀(MP-SPR)在活細(xì)胞領(lǐng)域的應(yīng)用
瀏覽次數(shù):989 發(fā)布日期:2024-1-10
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從藥物開(kāi)發(fā)、再生醫(yī)學(xué)和即時(shí)診斷,到生物傳感器開(kāi)發(fā)和免疫或癌癥的生物學(xué)研究,基于活細(xì)胞的檢測(cè)方法在各種應(yīng)用中都極具價(jià)值。自2013年發(fā)表第一項(xiàng)研究以來(lái),MP-SPR技術(shù)已成為研究活細(xì)胞的一種有價(jià)值的工具,可以替代熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)等傳統(tǒng)方法。雖然使用傳統(tǒng)SPR儀器進(jìn)行的細(xì)胞研究很少,但在最近的一些研究中,MP-SPR能夠闡明納米顆粒攝取動(dòng)力學(xué)、藥物吸收途徑和GPCR激活譜。
MP-SPR是市場(chǎng)上少有的允許活細(xì)胞的生物學(xué)相關(guān)反應(yīng),同時(shí)保持這些活模型的復(fù)雜性的實(shí)時(shí)技術(shù)。使用MP-SPR,根據(jù)研究需要,活細(xì)胞測(cè)定可采用以下兩種主要方法:
1、在傳感器表面生長(zhǎng)細(xì)胞
使用標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)方案在傳感器表面培養(yǎng)細(xì)胞,樣品分析物(納米顆粒,藥物化合物)被引入到流程中,對(duì)分析物的實(shí)時(shí)細(xì)胞反應(yīng)進(jìn)行評(píng)估,并闡明細(xì)胞激活或細(xì)胞攝取概況。這種方法有助于研究:
a、給定藥物化合物的吸附路線
b、藥物遞送的最佳納米顆粒
c、活細(xì)胞樣品最大有效濃度(EC50)的一半
d、納米顆;虿《具M(jìn)入細(xì)胞的方式
MP-SPR技術(shù)已經(jīng)成功地進(jìn)行了基于細(xì)胞的分析,分析物范圍從小分子藥物化合物、激素和蛋白質(zhì),到無(wú)機(jī)納米顆粒、脂質(zhì)體和細(xì)胞外囊泡。
2、在傳感器表面注入活細(xì)胞
活細(xì)胞被引入流過(guò)傳感器表面的液體(細(xì)胞介質(zhì))中,表面用給定的表面涂層(如脂質(zhì)膜)或表面配體(受體)修飾。該方法適用于結(jié)合/粘附研究,并提供以下信息:
a、細(xì)胞對(duì)表面受體(如肽)的親和力
b、細(xì)胞附著涂層的動(dòng)力學(xué)特征
c、結(jié)合細(xì)胞與表面的分離率
d、給定細(xì)胞群的表面特異性
e、表面的最佳防污或抗菌性能
MP-SPR技術(shù)已經(jīng)在細(xì)胞和細(xì)菌中進(jìn)行了探索,使用不同的涂層,如羥基磷灰石、脂質(zhì)膜、聚合物,并使用各種配體(如肽、抗體和蛋白質(zhì)復(fù)合物)進(jìn)行功能化。
3、MP-SPR面對(duì)活細(xì)胞的其他優(yōu)勢(shì):
a、適用于多種活細(xì)胞
b、無(wú)標(biāo)簽的實(shí)時(shí)結(jié)合/粘附研究
c、擴(kuò)展數(shù)據(jù)集從細(xì)胞響應(yīng)在樣本加載
d、靈活選擇細(xì)胞兼容的表面
e、測(cè)量期間保持的生理相關(guān)條件
f、MP-SPR與電化學(xué)和熒光的結(jié)合