使用柱前衍生及柱后衍生法進(jìn)行食品及飼料中伏馬毒素檢測(cè)

瀏覽次數(shù)：1084　發(fā)布日期：2023-12-4　來(lái)源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

✦ 關(guān)于伏馬毒素 ✦

伏馬毒素 (Fumonisin FB) 是一種霉菌毒素，是由串珠鐮刀菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。主要污染糧食及其制品，并對(duì)某些家畜產(chǎn)生急性毒性及潛在的致癌性，已成為繼黃曲霉毒素之后的又一研究熱點(diǎn)。目前我國(guó)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中真菌毒素限量》（GB2761-2017）尚未涉及伏馬毒素的限量，不過(guò)在《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB 13078—2017）規(guī)定了部分飼料原料和飼料產(chǎn)品中的FB1和FB2總量的限量標(biāo)準(zhǔn)。其中飼料原料玉米及其加工產(chǎn)品、玉米酒糟類產(chǎn)品、玉米青貯飼料和玉米秸稈中伏馬毒素的限量為 60 mg/kg，其他飼料產(chǎn)品中伏馬毒素的限量在5～50 mg/kg。

✦ 關(guān)于檢測(cè)方法✦

GB 5009.240-2023 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中伏馬菌素的測(cè)定（將于2024年3月實(shí)施）

LS/T 6130-2017 糧油檢驗(yàn) 糧食中伏馬毒素B1、B2的測(cè)定超高效液相色譜法

本方案采用IAC-107伏馬毒素免疫親和柱

IAC-107伏馬毒素免疫親和柱能夠特異性的純化與濃縮樣品中的伏馬毒素B1 、B2 、B3 . 伏馬毒素免疫親和柱廣泛地應(yīng)用于糧食、食品、飼料、等樣品的提取，該方法速度快、操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確性高，對(duì)準(zhǔn)確靈敏的測(cè)定樣品中的伏馬毒素起到十分重要的作用。

✦ 操作流程✦

一、樣品前處理

1.樣品提取及稀釋
1.1 稱取25.0g(精確到0.1g)過(guò)篩樣品于均質(zhì)杯中,加入乙腈水(5+5) 100mL，以均質(zhì)器高速攪拌提取2min或振蕩提取20min,定量濾紙過(guò)濾。
1.2 移取2.0mI濾液加入48mL0.1%的吐溫/PBS稀釋混勻。

2.樣品凈化
2.1將免疫親和柱連接于玻璃注射器下準(zhǔn)確移取50.0mL上述樣品溶液注入玻璃注射器中。
2.2將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/s的流速緩慢通過(guò)免疫親和柱,直至空氣進(jìn)入親和柱中。
2.3用10mL水淋洗親和柱流速為1滴/s~2滴/s.直至空氣進(jìn)入親和柱中,棄去全部流出液，抽干小柱。
2.4準(zhǔn)確加入3mL甲醇-乙酸溶液( 98+2 洗脫流速約為1滴/s,收集洗脫液。50°C下氮?dú)鉂饪s吹干后，用乙腈水 (5+5) 定容至1 mL，待檢測(cè)。

二、液相條件及衍生方法

柱前衍生法
色譜柱: Cloversil-C18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)
流動(dòng)相: 甲醇:0.1MNaH2PO4(77: 23 體積比)用磷酸將PH值調(diào)到3.3
檢測(cè)器: 激發(fā)波長(zhǎng)335nm 發(fā)射波長(zhǎng)440nm
進(jìn)樣體積: 20uL
衍生方法：取100uL標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品凈化液于進(jìn)樣瓶中加入100uL OPA衍生試劑A渦旋混合30s，在 2分鐘內(nèi)進(jìn)樣分析。

柱后衍生法
色譜柱: Cloversil-C18 4.6*150mm (5um) 或4.6*250mm (5um)
流動(dòng)相: 甲醇/(65+35)
檢測(cè)器:激發(fā)波長(zhǎng)335nm發(fā)射波長(zhǎng)440mm
進(jìn)樣體積: 20uL
衍生泵流速: 0.4mL/min
衍生溫度: 50℃
衍生泵流動(dòng)相: OPA行生試劑B

HP-L10柱后衍生系統(tǒng)

HP-L20柱后衍生系統(tǒng)

✦ 實(shí)驗(yàn)結(jié)果✦

1、柱效回收：

2、樣品添加回收：取玉米樣品，伏馬B1B2B3混標(biāo)添加各1000ppb。

3、標(biāo)準(zhǔn)品及樣品圖譜

圖1 柱前衍生標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖（出峰順序B1，B3，B2）

圖2 柱后衍生標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖（出峰順序B1，B3，B2）

圖3 玉米本底液相色譜圖

圖4 玉米加標(biāo)液相色譜圖

✦ 訂購(gòu)信息✦

本方案所需要的產(chǎn)品及儀器見下表

C/N編號(hào)	物品
HP-L10 HP-L20	CLOVER柱后衍生裝置
C1015	鄰苯二甲醛 (HPLC 法用)
C1016	2-疏基乙醇(HPLC 法用)
ZJ0612	科樂福 CLOVER 多位位泵流操作架(配有1臺(tái)空氣泵，6個(gè)10mL 針簡(jiǎn))
20202	高速勻質(zhì)器，轉(zhuǎn)速可達(dá) 18.000 r/in~22.000 r/min
31955-C	科樂福 CLOVER微纖維濾紙 (1.5um，100 張/盒)
31240-C	折疊式槽紋濾紙 (100 張/盒)，或中速定性濾紙
36010-C	一次性塑料燒杯(25/包)
34000-C	一次性無(wú)熒光測(cè)試管(250 支/包)
36020-C	塑料漏斗(10 個(gè)/包)
CLOVER-1ST7224/5/6	伏馬毒素標(biāo)準(zhǔn)品 B1/B2/B3
35016	色譜純級(jí)的甲醇(4升/瓶)
C546150-U	科樂福 Cloversil C18 反相色譜柱 4.6*150mm (5um)
C546250-U	科樂福 Cloversil C18 反相色譜柱 4.6*250mm (5um)
FCMF3-CCP320C	玉米、飼料等基質(zhì)含有不同水平伏馬毒素的質(zhì)控樣品(FAPAS/Trilogy)

索取資料

來(lái)源：北京中檢維康生物技術(shù)有限公司
聯(lián)系電話：400-6677-658/15010301983
E-mail：1609095159@qq.com

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標(biāo)簽：伏馬檢測(cè) GB 5009 前處理耗材

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