糖尿病腎病是糖尿病病人最重要的合并癥之一，糖尿病病人中約有30%的人會發(fā)生糖尿病腎病，可導(dǎo)致腎功能衰竭和尿毒癥，是最難治的一種腎病，即將成為我國尿毒癥的第一大病因。 其發(fā)病機(jī)制至今尚未闡明，因此，建立理想的實(shí)驗(yàn)動物模型是研究糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制、疾病防治、新藥開發(fā)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

杭州赫貝致力于動物疾病模型研究與開發(fā)，在糖尿病并發(fā)癥的臨床前研究上有豐富的經(jīng)驗(yàn)。本文將對糖尿病腎病模型進(jìn)行詳細(xì)的介紹。

糖尿病腎病(DKD)動物疾病模型

造模方法
STZ誘發(fā)型I型糖尿病模型，72小時后會出現(xiàn)血糖穩(wěn)定升高、“三多”癥狀(多飲、多食和多尿)明顯，檢測血糖在11.1mmol/L時即制成無炎性I型糖尿病。每周測晨起血糖及體重，8周后剔除血糖恢復(fù)動物，其余動物繼續(xù)常規(guī)飼養(yǎng)。每周監(jiān)測血清肌酐、尿蛋白。

關(guān)鍵點(diǎn)

合適的STZ劑量以保持長期的高血糖狀態(tài)。
不同誘導(dǎo)時間腎臟病變進(jìn)程具有一定差異。

模型評價
實(shí)驗(yàn)過程中與正常對照組(Naive)小鼠對比，所有DKD模型組(Model)小鼠毛發(fā)干枯無光澤，形體消瘦;精神狀態(tài)不佳，嗜睡;飲食飲水多，小便異常頻繁。

與Naïve組相比Model組體重持續(xù)下降，血糖穩(wěn)定升高，血肌酐和尿蛋白均高于正常對照組。

 

 

病理評價：

試驗(yàn)終點(diǎn)Model組小鼠腎臟病變明顯，HE染色顯示腎小管萎縮，纖維增生，腎小囊壁增厚，炎細(xì)胞浸潤。Masson 染色可見明顯的腎小間質(zhì)纖維增生。PASM染色可見細(xì)胞核、腎小囊壁、基膜和系膜區(qū)呈黑色，各組未見基膜增厚。電鏡下可見不同程度足細(xì)胞染色質(zhì)邊聚核固縮、足突融合及基膜增厚。

 

糖尿病腎臟病變進(jìn)程

 

糖尿病腎病動物模型誘導(dǎo)成功的關(guān)鍵在于把握病變進(jìn)程，誘導(dǎo)時間較短則腎臟無損傷，誘導(dǎo)時間過長腎臟損傷嚴(yán)重則不能作為藥效評價的有效模型。

HE染色顯示：4周時間點(diǎn)腎間質(zhì)未見炎癥浸潤，腎小管內(nèi)未見蛋白管型，偶見上皮空泡化，腎小球內(nèi)基膜系膜未見明顯增厚。10周時間點(diǎn)除見腎小管上皮輕度水腫外，無明顯病變。12周和13周樣本間質(zhì)可見少量炎細(xì)胞浸潤。18周腎間質(zhì)水腫，腎小管上皮細(xì)胞壞死或擴(kuò)張，個別腎小管萎縮，萎縮周圍可見較多炎細(xì)胞浸潤和成纖維細(xì)胞增生，腎小球可見輕微囊壁增厚。21周可見腎小管上皮有壞死，部分腎小球囊壁及間質(zhì)輕微纖維化。詳見下圖。

Masson染色顯示：4周時間點(diǎn)腎小球內(nèi)基膜系膜結(jié)構(gòu)清晰，未見基膜系膜增生。10周、12周、13周和21周可見腎間質(zhì)纖維增生，多集中于動脈周圍。