流式分析儀因其可對(duì)單顆粒樣品進(jìn)行高通量多參數(shù)分析，已廣泛應(yīng)用于當(dāng)前備受關(guān)注的小顆粒樣品分析工作中。當(dāng)前市場(chǎng)流式細(xì)胞儀品類繁多，那么又該如何選擇更加適合自己研究項(xiàng)目，特別是適合臨床級(jí)實(shí)驗(yàn)高可靠性要求的流式分析方案呢？

近日來(lái)自丹麥奧爾堡大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)系和其醫(yī)院臨床生化系的Jaco Botha等研究人員，使用包括英國(guó)Apogee Flow公司超靈敏高分辨率納米流式分析儀A60 Micro-PLUS在內(nèi)三種不同的流式分析儀系統(tǒng)進(jìn)行外泌體微囊泡（EVs）可靠性比較分析，包括大小分析定量，熒光標(biāo)記分析，濃度測(cè)定重復(fù)性及大量樣品重復(fù)檢測(cè)穩(wěn)定性等[1]，為不同應(yīng)用場(chǎng)景和不同分析需求，選擇最佳分析方案提供了堅(jiān)實(shí)的參考信息。

Apogee超靈敏納米流式分析儀，專為小顆粒分析優(yōu)化設(shè)計(jì)，在EVs等小顆粒分析應(yīng)用工作中，參與發(fā)表數(shù)百篇文章，充分體現(xiàn)其靈敏度，穩(wěn)定性和可靠性等性能出眾，備受認(rèn)可。

Jaco Botha等人的研究成果，大量直接對(duì)比數(shù)據(jù)再次體現(xiàn)出Apogee超靈敏納米流式分析儀：

》》分析<300nm Silica標(biāo)準(zhǔn)微球（相對(duì)Polystyrene材質(zhì)，Silica材質(zhì)折射率更加接近EVs樣品折射率）, 散射光性能更加出眾可靠（圖1）：可檢測(cè)出更小的顆粒，更準(zhǔn)確的濃度

》》分析不同大小不同材質(zhì)納米級(jí)標(biāo)準(zhǔn)微球，計(jì)數(shù)穩(wěn)定性表現(xiàn)更為突出（圖2）：更低的CV數(shù)值

》》分析熒光標(biāo)記EVs樣品，同一天/不同天不同批次樣品之間，大量樣品不同批次總體分析之間，系統(tǒng)分析穩(wěn)定性同樣更為可靠（圖3）：更低的變異系數(shù)

圖1，不同流式分析技術(shù)散射光分析不同大小，不同材質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)微球可靠性比較

圖2，不同流式分析技術(shù)分析不同大小Silica標(biāo)準(zhǔn)微球計(jì)數(shù)穩(wěn)定性性比較
 

圖3，不同流式分析技術(shù)分析不同大小Silica標(biāo)準(zhǔn)微球計(jì)數(shù)穩(wěn)定性性比較

部分節(jié)選內(nèi)容參考如下：

 “In line with observations for LoD and LoQ, Apogee A60 Micro-PLUS tended to be more sensitive in detecting small silica nanospheres, scattering very small amounts of light than all other platforms, followed by ImageStream X Mk II and, lastly, FACS Aria III. For larger silica nanospheres, all platforms performed similarly. Finally, results for fluorescent polystyrene nanospheres reflected those for silica nanospheres, where Apogee A60 Micro-PLUS performed better than other platforms in detecting small nanospheres”

  “In summary, the Apogee A60 Micro-PLUS demonstrated the overall lowest variabilities in EV concentration determinations, and global and inter-day variabilities did not differ much from intra-day variabilities. The FACS Aria III performed similarly and ex- hibited somewhat increased variabilities in EV concentration determinations compared to the Apogee A60 Micro-PLUS. Finally, although the average concentrations of EV phe- notypes did not differ between analysis days on the ImageStream X Mk II, it presented with the highest intra-day and global variabilities in EV concentrations across EV samples and phenotypes”

更多其他相關(guān)內(nèi)容，可參考文章全文。

參考資料

1. Botha J, Pugsley H R, Handberg A. Conventional, High-Resolution and Imaging Flow Cytometry: Benchmarking Performance in Characterisation of Extracellular Vesicles[J]. Biomedicines, 2021, 9(2): 124.

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