名稱：C2C12 小鼠成肌細胞

名稱	C2C12 （小鼠成肌細胞）
別稱	C2c12；C2-C12；C12
種屬	小鼠
生長特性	貼壁細胞
細胞形態(tài)	成肌細胞樣
傳代融合度	70%
凍存液	55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 40% FBS + 5% DMSO
推薦傳代比例	1:3 - 1:4
推薦換液頻率	2-3次/周

 

 

細胞簡介

圖片來源：ATCC

推薦培養(yǎng)體系：

DMEM 【VivaCell C3113】＋ 10% FBS 【VivaCell C04002】＋ 1% P/S 【VivaCell C3420】

 

 

 

細胞培養(yǎng)步驟 

待細胞融合度約70%時即可進行傳代。

以T25培養(yǎng)瓶為例：

1. 吸出原培養(yǎng)液；加入2ml左右PBS【VivaCell C3580】，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞，吸出PBS丟棄；

2. 加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液【VivaCell C3530】，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞后放入培養(yǎng)箱消化約3 min，顯微鏡下觀察多半呈流沙狀，終止消化；（全程不要拍打培養(yǎng)瓶）

3. 離心，300g、3min，離心完吸出上清丟棄；

4. 加入新鮮培養(yǎng)基，將細胞吹到成單個，經(jīng)計數(shù)，均勻接種到新培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)基至5ml，放培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

 

 

細胞誘導(dǎo)分化  

由于C2C12細胞分化很快，對于研究對理解肌肉細胞發(fā)育和修復(fù)（再生）是非常重要的。低濃度的馬血清能夠有效刺激C2C12成肌細胞向成熟細胞分化。

 

我們在這里也簡單介紹下誘導(dǎo)分化的相關(guān)知識：

01

  誘導(dǎo)體系： 

DMEM 【VivaCell C3113】＋ 馬血清 【VivaCell C2510】（常見比例為2%）＋ 1% P/S 【VivaCell C3420】

 

 

02

  簡述細胞誘導(dǎo)步驟： 

待細胞生長至融合度約過80%時。

1. 用PBS【VivaCell C3580】潤洗細胞后吸出PBS丟棄；

2. 換誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基，后續(xù)每24h換液一次，在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長狀況。

 

03

  誘導(dǎo)時刻關(guān)鍵步驟： 

• 誘導(dǎo)前提：低代次，細胞狀態(tài)很好的C2C12細胞

• 融合時間：在其融合率剛過80%，換含有馬血清（一般是2%比例）完全培養(yǎng)液。之后需要每天進行換液

• 誘導(dǎo)時間：正常7天內(nèi)可成功

• 提示：誘導(dǎo)的期間會有不少的死亡細胞，也有又成肌細胞的緩慢生長，是正常的

• 成功的標志：最后可以看見肌管，表現(xiàn)為厚的管狀結(jié)構(gòu)，有時為多核

 

圖片來源：網(wǎng)絡(luò)，侵刪
 
 

歡迎關(guān)注公眾號留言咨詢，給您最合適的解決方案~

了解詳細信息可戳原文，轉(zhuǎn)載請標明出處。
BI 中國市場部：上海逍鵬生物科技有限公司
詳情點擊：閱讀原文