1.什么是中和抗體
 
中和抗體（Neutralizing Antibody,NAb）是一種特殊的抗體，可與細菌毒素、病原體(如病毒)及其產(chǎn)物特異性結(jié)合并發(fā)揮中和作用。病原微生物侵入機體時會產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，中和抗體能夠與病毒表面的抗原結(jié)合，并直接阻止病毒黏附靶細胞受體，防止病毒侵入細胞。也有將能夠與特定蛋白質(zhì)結(jié)合，并阻斷其功能的抗體稱為中和抗體。  
2.中和抗體的工作原理
中和抗體可以通過影響病原體表面的分子進入體內(nèi)細胞的方式來阻止病原體感染人體。在包膜病毒（脂質(zhì)膜內(nèi)的熱敏病毒細胞）中，中和抗體會阻止病毒附著在細胞上以及病毒進入細胞。在無包膜病毒（一種沒有脂質(zhì)膜的耐熱病毒細胞）中，中和抗體可以與衣殼蛋白結(jié)合，衣殼蛋白是包圍病毒細胞內(nèi)遺傳信息的蛋白質(zhì)外殼。
中和抗體還可以使病原體并改變其結(jié)構(gòu)和形狀（稱為構(gòu)象變化）以阻止其進入細胞并在細胞內(nèi)復(fù)制。在細菌感染中，中和抗體可以阻止毒素的有害影響。這已被證明發(fā)生在白喉藥物中，盡管它們不再被推薦用于預(yù)防白喉感染。一旦病原體被 NAb 中和，病原體就會被白細胞降解，脾臟會過濾病原體，然后通過尿液或糞便排出體外。
 
3.中和抗體的應(yīng)用
中和抗體在醫(yī)學(xué)中的常見用途是被動免疫。在此過程中，對疾病沒有免疫力的人從已經(jīng)對疾病免疫的人那里獲得抗體。這種保護不會持續(xù)很長時間，但它確實可以立即保護和抵抗感染。在嬰兒出生后的頭幾個月，被動免疫可以通過母乳喂養(yǎng)自然傳遞。
疫苗接種也利用中和抗體，這被稱為主動免疫。疫苗旨在通過將病毒或細菌的活性標本或部分病毒或細菌注射到體內(nèi)來模擬對感染的自然免疫反應(yīng)�？梢杂|發(fā)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生中和抗體以響應(yīng)疫苗中的病毒或細菌，如果人第二次接觸病原體，這些抗體將自然識別并抵抗感染。

4.中和抗體制備方法
目前有多種方法可用于中和抗體制備，包括雜交瘤技術(shù)，噬菌體展示技術(shù)，抗體人源化等。
 
5.卡梅德生物可以提供高質(zhì)量的牛中和抗體制備服務(wù)
卡梅德生物提供的中和抗體制備服務(wù)，只接受病毒樣品。以牛中和抗體制備為例，主要實驗流程如下：抗原制備，動物免疫，獲得牛抗血清，抗體純化，效價檢測，客戶交付血清。
 
 

 
 
5.1 抗原信息
客戶需要提供純病毒作為免疫源。
 
5.2 牛免疫
挑選24個月齡健康牛，通過肌肉注射的方式，按照免疫程序免疫4-5針，5ml/次，按照表1免疫進程表進行免疫。
表1 牛免疫規(guī)劃進程表

流程	時間	描述	日期
陰性血清采集	Day 0	免疫前血清采集10mL	2022/08/05
一免	Day 1	5ml純病毒VT-101肌肉注射	2022/08/05
二免	Day 14	5ml純病毒VT-101肌肉注射	2022/08/19
三免	Day 28	5ml純病毒VT-101肌肉注射	2022/09/02
三免血清采集	Day 35	采集血清30ml寄送客戶	2022/09/09
四免	Day 42	5ml純病毒VT-101肌肉注射	2022/09/16
四免血清采集	Day 49	采集檢測血清10ml，檢測中和效價	2022/09/23
五免（可選）	Day 56	5ml純病毒VT-101肌肉注射	2022/09/30
五免血清采集	Day 63	采集檢測血清10ml，檢測中和效價	2022/10/07
血清采集	Day 73	滿足中和效價1:1024，采集牛血清2.5-3.5L	2022/10/17

 
5.3獲得牛抗血清
獲得高穩(wěn)定性抗體血清。
 
5.4抗體純化
采用多種抗體純化技術(shù)：Protein A、Protein G、抗原親和純化等方案可供客戶選擇。
 
5.5中和效價測定
（1）取三免和四免抗體血清，分別用1640完全培養(yǎng)基將抗體血清稀釋8倍，即得測定原液，用1640完全培養(yǎng)基連續(xù)倍比稀釋測定原液至2048倍（即稀釋至：16倍、32倍、64倍、128倍、256倍、512倍、1024倍、2048倍），包含測定原液共9個待測稀釋血清；
（2）取100ul不同濃度的稀釋血清分別與100ul病毒混合，同時加入800ul細胞培養(yǎng)基，混合后，置37℃水浴作用1h；
（3）取血清病毒混合液0. 1ml分別加到293T細胞已長成單層的96孔細胞培養(yǎng)板中，每一稀釋度接種8孔細胞，同時設(shè)8孔正常細胞對照和8孔病毒對照；
（4）將96孔細胞培養(yǎng)板置37℃、5% CO2溫箱中孵育，每日觀察細胞病變情況。
（5）無菌處理：將血清12000r/min離心20min，然后用0.45um濾膜過濾，最后超凈臺內(nèi)用0.22um無菌濾膜過濾，即得無菌血清。
 
5.6交付血清
可交付大規(guī)模達5L�？贵w血清。
 
中和抗體在抗病毒類藥物研發(fā)、疫苗生產(chǎn)中發(fā)揮著重要作用。尤其自2019年新冠病毒爆發(fā)以來，已有多種新冠抗體中和藥物獲得批準，作為預(yù)防和治療使用�？�梅德生物可以提供高特異性和親和力的中和抗體制備服務(wù)，其中牛中和抗體制備和鼠中和抗體制備已多次為客戶定制開發(fā)服務(wù)，我們擁有完善的蛋白、抗體平臺，以為您科研之路添磚加瓦。