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植物表型葉綠素?zé)晒獬上衲K在植物病理病害中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):760 發(fā)布日期:2023-5-29  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

植物病理學(xué)是研究植物病害的病原、發(fā)生、發(fā)展以及防治的一門應(yīng)用學(xué)科。它以植物病害為研究對象,探討發(fā)病的原因,或在解剖學(xué)、生理學(xué)或生物化學(xué)上,探討感染和癥狀出現(xiàn)的過程。為了確立防病和治病的方法,還研究形成病原的環(huán)境條件、病原體傳染途徑以及病害的診斷法等,另外還研究防病的藥劑對病原體或植物體的藥理作用,以及包括所有與植物病害有關(guān)的廣闊領(lǐng)域。
 

WIWAM植物表型成像系統(tǒng)整合了LED植物智能培養(yǎng)、自動化控制系統(tǒng)、葉綠素?zé)晒獬上衲K、植物熱成像模塊、植物近紅外成像模塊、植物高光譜模塊、植物多光譜模塊、植物CT斷層掃描模塊、等多項(xiàng)先進(jìn)技術(shù),以較優(yōu)化的方式實(shí)現(xiàn)大量植物樣品——從擬南芥、玉米到各種其它植物的生理生態(tài)與形態(tài)結(jié)構(gòu)成像分析,用于高通量植物表型成像分析測量、植物脅迫響應(yīng)成像分析測量、植物生長分析測量、植物病理學(xué)、性狀識別及植物生理生態(tài)分析研究等。
 

當(dāng)一株健全的植物受到干擾,導(dǎo)致器官和組織的生理機(jī)制局部的或系統(tǒng)的反常植物自身表現(xiàn)了病狀(symptom),并能從患病部位提取出的物質(zhì)具有相應(yīng)病原物的病征(sigh),就是發(fā)生了植物病害。干擾植物正常生理機(jī)制的因素,主要是外來的,內(nèi)在的因子導(dǎo)致遺傳性病害;外來的因子有的是非生物性的,有的是生物性的。因此,根據(jù)誘發(fā)病害因子的本質(zhì),植物病害可分為非侵染性病害和侵染性病害兩大類。
 

非侵染病害

植物在長期的進(jìn)化歷程中,逐漸適應(yīng)了各種不斷變化的環(huán)境,產(chǎn)生了較強(qiáng)的適應(yīng)能力。但對各類環(huán)境因素的適應(yīng)能力有一定限度,如果植物所處的環(huán)境中某些物理如光照、水分、溫度或化學(xué)因素如營養(yǎng)元素失調(diào)再貨生存環(huán)境發(fā)生惡化,連續(xù)不斷影響植物,其強(qiáng)度又較過植物忍耐限度,就會對植物的生長發(fā)育產(chǎn)生不利影響,擾亂正常生理和代謝活動,甚至對植物造成嚴(yán)重傷害,使植物在生理和外觀上表現(xiàn)異常,產(chǎn)生病變。
 

侵染病害

侵染性病害是植物病原物在外界條件影響下相互斗爭并導(dǎo)致植物生病的病害具有感染性。常見的植物病原體有真菌如黑粉病、銹病、白粉病等;卵菌如腐霉、霜霉等;原核生物以細(xì)菌為主如土壤桿菌、支原體、衣原體等;病毒如馬鈴薯Y病毒、黃征病毒、煙草花葉病毒等;高等植物如菟絲子、列當(dāng)獨(dú)腳金等;原生動物如線蟲。其中以細(xì)菌、真菌、病毒、支原體和線蟲誘發(fā)的病害較普遍和嚴(yán)重,尤以真菌性病害為較,如水稻的瘟病、小麥銹病、棉花的萎蔫病等。各種病原體的生理、生態(tài)、增殖方法和生活史以及侵染寄主的方式、途徑和時期各不相同。
 

WIWAM葉綠素?zé)晒獬上衲K是革新性的植物葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng),是專門針對整個植株成像的相機(jī)系統(tǒng),成像方式為遠(yuǎn)程成像,高分辨率和高速成像。生成圖像提供了光合作用性能信息。該模塊有兩種版本: 高分辨率版本和高速版本。同時配有分析軟件,可為科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用提供少有的解決方案。所依據(jù)的原理是基于持續(xù)激發(fā)成像熒光計,用以測量Kautsky響應(yīng)曲線。采用了高能紅燈來使光合作用飽和,通過使用敏感相機(jī),在不同時間點(diǎn)對相應(yīng)曲線成像以測量F0和Fm。依賴于所拍攝圖像的有效信號/噪音比,相機(jī)積分時間是從20µs-1ms。紅光燈的典型照射強(qiáng)度是1000-5000µmol/(m2s)。
 


科研應(yīng)用方向

植物生長、活力以及品質(zhì)主要依賴于其水分吸收、營養(yǎng)、二氧化碳以及光合作用中光的作用。光合作用中,生成了糖和淀粉。光在此過程中作用非常關(guān)鍵,因光吸收累積了化學(xué)能,是植物生長的能量來源。脅迫條件,如干旱,惡劣溫度、病害,害蟲、除草劑以及營養(yǎng)缺乏會降低其生長速度。


光合作用

通過測量光合作用中的光吸收利用程度,植物的監(jiān)控,活力以及品質(zhì)可以數(shù)字表述:光合作用效率。該數(shù)字指示了多少百分百的光轉(zhuǎn)化到生長當(dāng)中。植物可達(dá)到83%的光合效率。只意味著達(dá)83%的葉綠素捕獲光真正用于光合作用,用于糖和淀粉生產(chǎn)。當(dāng)光合作用不起作用時,光合效率為零,沒有光被吸收用于光合作用。


葉綠素?zé)晒?/strong>

植物體內(nèi)的葉綠素在光照射時發(fā)出熒光。這意味著一旦植物被紅光照射,植物發(fā)射出較深顏色的紅彩色。 使用鏡頭中的光學(xué)濾波輪,可以拍攝熒光圖片。采用特殊測量程序,可從這些熒光信號計算光合效率。
 


下圖為利用WIWAM葉綠素?zé)晒獬上衲K拍攝的高分辨率紅掌圖像。使用了CF圖: F0 and Fm, 計算了Fv/Fm 圖像。 使用的假彩表顯示了光合效率。 黑色和紅色顯示光合效率低 ,黃色和綠色顯示高光合效率 。在Fm圖中,可實(shí)現(xiàn)大景深(30cm)。
 

擬南芥


高分辨葉綠素?zé)晒獬上癜姹究捎糜诟咄繙y量。1秒內(nèi)對四株大型擬南芥進(jìn)行拍攝。 圖像分辨率為1.4Mp,將圖片分到4個區(qū),每幅圖像大小為 0.35 Mp 。每小時較大處理通量可達(dá)14400株。
 

小麥白粉病感染


下圖為高分辨率小麥白粉病感染圖

潛伏時間為 11 天。左圖,很難看出白粉病與葉片間的影響 (僅葉間有棕點(diǎn))。計算的Fv/Fm 圖顯示葉尖大面積感染區(qū)  (紅點(diǎn))。葉片下端感染 Fv/Fm圖 (右側(cè)), 人眼無法分辨。
 


WIWAM葉綠素?zé)晒獬上衲K應(yīng)用案例
防御素對真菌作用模式

 

以百萬像素分辨率對Photosystem II進(jìn)行全植物成像


該葉綠素?zé)晒獬上衲K以百萬像素分辨率測量熒光圖像,提供光系統(tǒng)II的Kautsky誘導(dǎo)曲線的0、I和P。熒光參數(shù)按像素計算并顯示為圖像。使用與熒光圖像相同的光學(xué)布局和光學(xué)濾光片輪捕獲多光譜圖像。這將生成葉綠素指數(shù)(與葉綠素含量相關(guān))、花青素指數(shù)(與花青素含量相關(guān))、NDVI(歸一化差異植被指數(shù))、NIR和顏色的圖像。
 

新型橄欖樹防御素對近緣子囊真菌病原菌的抗真菌活性和作用模式
 


抗菌肽在植物的天然免疫中起著關(guān)鍵作用。防御素是富含半胱氨酸的抗真菌肽,具有多種作用方式。在野生和栽培的多年生橄欖樹木犀的基因組序列中發(fā)現(xiàn)了一個新的木犀科特異性防御素基因家族。OefDef1。1是該防御素家族的一員,在體外可有效抑制子囊菌病原菌灰霉病菌和三種鐮刀菌的生長。OefDef1.1快速滲透灰雙歧桿菌分生孢子和生殖細(xì)胞的質(zhì)膜。有趣的是,它只在胚芽中誘導(dǎo)活性氧物種并轉(zhuǎn)移到細(xì)胞質(zhì)中,而不在分生孢子中。在含有高濃度Na1+的培養(yǎng)基中,OefDef1.1的抗真菌活性顯著降低。令人驚訝的是,嵌合的OefDef1.1含有截形苜蓿防御素γ-核心基序肽MtDef4具有耐Na1+的抗真菌活性。在磷脂-蛋白質(zhì)重疊分析中,嵌合肽與其磷脂酰肌醇伙伴的結(jié)合比OefDef1.1更強(qiáng)。OefDef1.1在抑制煙草和萵苣葉表面灰霉病方面也比OefDef1.1更有效。在生長培養(yǎng)基中添加或不添加提升濃度的Na1+,四種子囊菌病原體對OefDef1.1的反應(yīng)存在顯著差異。密切相關(guān)的子囊菌病原體對這種防御素的不同反應(yīng)對植物的工程抗病性具有重要意義。
 

關(guān)鍵詞:防御素,抗真菌,作用方式,橄欖樹,真菌病原體 
 

利用禾谷鐮刀菌感染的小麥穗篩選競爭性生防細(xì)菌的一種新的植物內(nèi)富集方法

這項(xiàng)工作介紹了一種在小麥中發(fā)現(xiàn)新的抗赤霉病細(xì)菌生防劑的替代工作流程。與隔離物收集的大規(guī)模測試不同,我們從不同的接種物開始,在灌漿期從田間種植的小麥穗中提取微生物組。在感染禾谷鐮刀菌PH1的分離小麥穗上,產(chǎn)生了四個不同的微生物群落,這些微生物群落暴露在3個14天的非培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)富集物中。我們發(fā)現(xiàn),一個細(xì)菌群落在3個周期后減少了感染癥狀,隨后選擇該細(xì)菌群落通過限制稀釋來分離細(xì)菌。所有94個分離株均在體外和植物試驗(yàn)中進(jìn)行了測試,并選擇了14個分離株在分離的小麥穗上進(jìn)行了進(jìn)一步測試。結(jié)果似乎表明,我們的富集方法導(dǎo)致細(xì)菌在FHB控制方面具有不同的作用模式。波斯歐文氏菌(Erwinia persicina)分離物C3的疾病嚴(yán)重程度(Fv/Fm)顯著降低,波斯歐文氏菌(Erwinia persicina)C3和假單胞菌(Pseudomonassp.)B3的真菌生物量(cGFP)顯著降低。然而,這兩種治療的真菌毒素分析顯示,DON水平?jīng)]有降低。盡管如此,安那提泛球菌(Pantoea ananatis)H3和H11以及波斯歐文氏桿菌(Erwinia persicina)H2能夠?qū)ON濃度降低50%以上,盡管這些影響在統(tǒng)計學(xué)上并不顯著。最后,波斯歐文氏菌(Erwinia persicina)H2也顯示出DON對植物毒性較小的DON-3G的顯著更高的糖基化。據(jù)報道,通過富集循環(huán)分離的細(xì)菌屬在開放棲息地發(fā)育的微生物群落中占主導(dǎo)地位,這表明分離的細(xì)菌可以降低禾谷鐮刀菌在穗葉層上的感染壓力。


關(guān)鍵詞:小麥;禾谷鐮刀菌;生物防治;病理生物群落;獨(dú)立培養(yǎng);微生物組工程;連續(xù)通過;實(shí)驗(yàn)富集;葉層
 


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高通量版葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)的應(yīng)用

高通量版葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)可用于高度可控環(huán)境中進(jìn)行高清多光譜成像。6Mp-16 bit相機(jī)安裝在直角坐標(biāo)型機(jī)器人系統(tǒng)上,用于監(jiān)控大量幼苗以小植株(15cm)生物脅迫效應(yīng)(例如,真菌病害 ) 和生物脅迫(如干旱)。基于高度自動化sensor-to-plant原理,疾病擴(kuò)散或脅迫因子效應(yīng)可在植物生長時進(jìn)行追蹤。另外,系統(tǒng)可進(jìn)行小植株如浮萍Lemna minor或生長在多孔板中的部分進(jìn)行成像。
 

系統(tǒng)還整合了RGB成像、葉綠素?zé)晒狻⒒ㄇ嗨、NIR以及GFP/RFP成像,系統(tǒng)可以多種方式對生物、非生物脅迫進(jìn)行成像。另外,可咨詢在LAMP組織(或緊密協(xié)作單位)內(nèi)的有圖像處理經(jīng)驗(yàn)的研究者,通過這些圖像科學(xué)計算相關(guān)測量參數(shù),從而獲取現(xiàn)象可視化植物的解讀。系統(tǒng)安裝在高度可控的環(huán)境中,可控環(huán)境參數(shù)包括溫度、相對濕度以及照明光光譜特征(可達(dá)1000 8molm-2 s-1)。系統(tǒng)專門定制了自動澆水系統(tǒng),用于植物澆水,同時可執(zhí)行多個澆水方案。


真菌基因組編輯

進(jìn)行表型組學(xué)以及基因編輯技術(shù)的組合研究:研究者可進(jìn)行植物病害修飾或標(biāo)記和有益菌研究,幫助我們以前所未有的分辨率揭示植物與微生物互作;谕粗亟M技術(shù)和較先進(jìn)基于Crispr技術(shù)的轉(zhuǎn)化平臺可在幾種真菌上進(jìn)行,如鐮刀菌、曲霉以及枯菌。
 

生物分析和生物報告植物


例如該系統(tǒng)可高通量進(jìn)掃描新型生物活性分子或具有除草劑或生物刺激素作用的新農(nóng)業(yè)化學(xué)品。使用生物報告有機(jī)物如啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae,帶人雌激素受體,浮萍Lemna minor以及擬南芥(Arabidopsis thaliana)
 


葉綠素?zé)晒獬上衲K其它應(yīng)用
 


硼酸和苯硼酸防治番茄早疫病
 

摘要

在當(dāng)代農(nóng)業(yè)中,找到一個合適的替代品來替代現(xiàn)有為數(shù)不多的抗真菌藥物是一項(xiàng)至關(guān)重要的任務(wù)。因此,在全球范圍內(nèi)進(jìn)行了深入的研究,以發(fā)現(xiàn)能夠抑制對目前使用的抗真菌藥物具有耐藥性的病原體的環(huán)境友好且高效的藥物。在這里,我們測試了硼酸(BA)及其衍生物苯硼酸(PBA)在控制致病真菌鏈格孢菌侵染番茄植株早期枯萎病癥狀中的活性。通過跟蹤受試植物葉片上病變的外觀和強(qiáng)度,以及測量反映植物健康的四個選定生理因素,我們已經(jīng)證明BA和PBA對真菌感染都有預(yù)防作用?赏ㄟ^減少早疫病癥狀的數(shù)量和嚴(yán)重程度以及防止真菌接種后發(fā)生的生理特性惡化來做到這一點(diǎn)。苯硼酸在抑制交替鏈球菌感染方面更有效。因此,我們得出結(jié)論,BA,甚至PBA,可以作為防治番茄早疫病的藥劑,因?yàn)樗鼈兗扔行в汁h(huán)保。


關(guān)鍵詞:植物病害;抗菌作用;預(yù)防;抗真菌活性;可持續(xù)管理


輪狀鐮刀菌與黃曲霉的植物體內(nèi)外相互作用

受夏季氣溫升高和熱浪發(fā)生率升高的驅(qū)動,僅次于輪狀鐮刀菌,歐洲玉米中黃曲霉的發(fā)病率預(yù)計會增加。在目前的研究中,研究人員調(diào)查了這兩個物種之間的相互作用。黃曲霉/輪狀芽孢桿菌菌落生長在在單一培養(yǎng)基、雙重培養(yǎng)基和混合培養(yǎng)基中。黃曲霉和輪狀假絲酵母菌與其他物種在雙重或混合培養(yǎng)中的生長速度明顯低于在單一培養(yǎng)中的生長速度。在大多數(shù)情況下,雙重或混合接種對真菌毒素產(chǎn)生負(fù)面影響。在植物體內(nèi),雙重接種導(dǎo)致黃曲霉的病變減少,而黃曲霉的存在對黃曲霉的病變大小和毒素產(chǎn)生無影響;旌辖臃N導(dǎo)致的病變比單一黃曲霉接種大112%,比單一輪狀芽孢桿菌接種小9%。伏馬菌素水平比單次接種高17%。在輪狀芽孢桿菌接種前兩天出現(xiàn)黃曲霉的情況下,輪狀芽孢桿菌的病變大小比單次輪狀芽孢桿菌接種小55%,伏馬菌素的產(chǎn)生幾乎被完全抑制。黃曲霉和輪狀假絲酵母菌之間的相互作用是高度動態(tài)的,取決于實(shí)驗(yàn)條件、測量的變量以及它們在兩個接種點(diǎn)、同時在一個接種點(diǎn)或一個物種在另一個接種點(diǎn)的現(xiàn)有病變中的定殖方式。

來源:北京博普特科技有限公司
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