抗體的制備方法及原理有哪些？分兩個層面為大家一一介紹：
    一、抗血清的制備
    有了質量好的抗原，還必須選擇適當?shù)拿庖咄緩剑�才能產(chǎn)生質量好（特異性強和效價高）的抗體。
    （一）用于免疫的動物
    作免疫用的動物有哺乳類和禽類，主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等，實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學特性和所要獲得抗血清數(shù)目，如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因動物反應良好，而且能夠提供足足數(shù)目的血清，用于免疫的動物應適齡，健壯，無感染性疾患，最好為///雄性，此外還需十分留意動物的飼養(yǎng)，以消除動物的個體差異以及在免疫過程中死亡的影響。若用兔，最好用純種新西蘭兔，一組三只，兔的體重以2～3kg為宜。
    （二）免疫途徑
    免疫途徑有多種多樣，如靜脈內、腹腔內、肌肉內、皮內、皮下、淋巴結內注射等，一般常用皮下或背部多點皮內注射，每點注射0.1ml左右。途徑的選擇決定于抗原的生物學特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物學活性抗原，一般不宜采用靜脈注射。
    （三）佐劑
    由于不同個體對同一抗原的反應性不同，而且不同抗原產(chǎn)生免疫反應的能力也有強有弱，因此經(jīng)常在注射抗原的同時，加進能增強抗原的抗原性物質，以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫反應，這種物質稱為免疫佐劑。
    佐劑除了延長抗原在體內的存留時間，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)，使參與免疫反應的免疫活性細胞增多，促進T細胞與B細胞的相互作用，從而增強機體對抗原的細胞免疫和抗體的產(chǎn)生。
    常用的佐劑是福氏佐劑（Freundadjuvant）,其成分通常是羊毛脂1份、石臘油5份，羊毛脂與石臘油的比例，視需要可調整為1：2～9（V/V），這是不完全福氏佐劑，在每毫升不完全佐劑加進1～20mg卡介苗就成為完全佐劑。
    （四）免疫方法
    抗原劑量，首次劑量為300～500μg，加強免疫的劑量約為首次劑量為1/4左右。每2～3周加強免疫一次。加強免疫時用不完全佐劑，首次免疫時皮下注射百日咳疫苗0.5ml，加強免疫時不必注射百日咳疫苗。
    在第2次加強免疫后2周，從耳緣靜脈取2～3ml血，制備血清，檢測抗體效價（見后）。如未達到預期效價，需再進行加強免疫，直到滿足時為止（圖2-3）。當抗體效價達到預期水平時，即可放血制備抗血清。
    （五）抗血清的采集與保存
    家兔是最常用以產(chǎn)生抗體的動物，因此這里主要討論兔血的收集。羊等較大動物以頸靜脈、動脈取血，鼠等小動物取血可參閱有關資料。取兔血有兩種方法，一是耳緣靜脈或耳動脈放血，一是頸動脈進血，也可心臟采血。取動脈或靜脈放血時，將兔放進一個特造的木匣或籠內，耳露于箱（籠）外，也可由另一人捉住兔身。剪往耳緣的毛，用少許二甲苯涂抹耳廓，30s后，耳血管擴張、充血。用手輕拉耳尖，以單面剃須刀或尖的手術刀片，快速切開動脈或靜脈，血液即流出，每次可收集30～40ml。然后用棉球壓迫止血，凝血后洗往二甲苯。二星期后，可在另一耳放血。此法可反復多次放血。頸動脈放血時，將兔仰臥，固定于兔臺，剪往頸部的毛，切開皮膚，暴露頸動脈，插管，放血。放血過程中要嚴格按無菌要求進行。
    收集的血液置于室溫下1h左右，凝固后，置4℃下，過夜（切勿冰凍）析出血清，離心，4000rpm,10min。在無菌條件，吸出血清，分裝（0.05～0.2ml），貯于-40℃以下冰箱，或凍干后貯存于4。C冰箱保存。
    （六）抗血清質量的評價
    在免疫期間，不僅各個不同的動物，而且同一動物在不同的時間內抗血清效價、特異性、親協(xié)力等都可能發(fā)生變化，因而必須經(jīng)常地采血測試。只有在對抗血清的效價、特異性、親協(xié)力等方面作徹底的評價后，才可使用所取得的抗血清。
    （七）免疫失敗的可能原因及應采取的措施
    有時不能獲得滿足的抗血清，可從下列幾方面找原因，并改進之。
    （1）免疫動物的種屬及品系是否合適，可考慮改變動物的種屬或品系，或擴大免疫動物的數(shù)目。
    （2）抗原質量是否良好，可改用其它廠家的產(chǎn)品或改用同一廠家的其它批號，也可考慮改變抗原分子的部分結構，或改進提取方法。
    （3）制備的免疫原是否符合要求，可從偶聯(lián)劑，載體、抗原或載體的比例、反應時間等多方面往考慮，并加以改進。
    （4）所用的佐劑是否合適，乳化是否完全，可改用其它佐劑，或加強乳化。
    （5）免疫的方法、劑量，加強免疫的間隔時間和次數(shù)，免疫的途徑是否合適。
    （6）動物的飼養(yǎng)是否得當，如營養(yǎng)（飼料、飲水）、環(huán)境衛(wèi)生（透風、采光、溫度）是否符合要求，動物的健康情況是否良好等。
   
 二、單克隆抗體的制備
    1975年Kohler和Milstein發(fā)現(xiàn)將小鼠骨髓瘤細胞與和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合，形成的雜交瘤細胞既可產(chǎn)生抗體，又可無性繁殖，從而創(chuàng)立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破使血清學的研究進進了一個高度精確的新紀元。

免疫細胞化學的技術關鍵之一是制備特異性強、親協(xié)力大、滴度高的特異性抗體，由于每種抗原都有幾個抗原決定簇，用它免疫動物將產(chǎn)生對各個決定簇的抗體，即多克隆抗體。單克隆抗體則是由一個產(chǎn)生抗體的細胞與一個骨髓瘤細胞融合而形成的雜交廇細胞經(jīng)無性繁殖而來的細胞群所產(chǎn)生的，所以它的免疫球蛋白屬同一類型，質地純一，而且它是針對某一抗原決定簇的，因此特異性強，親合性也一致。