流感的檢測(cè)與預(yù)防：顯微鏡也有一份功勞

今年的甲型流感可謂來(lái)勢(shì)洶洶，不僅患者癥狀較重，而且學(xué)生群體感染比例相當(dāng)高，有些中小學(xué)甚至到了無(wú)法正常線下教學(xué)的程度，流感的有效檢測(cè)和預(yù)防，又再成為關(guān)注焦點(diǎn)，悄悄告訴大家，顯微鏡在這里面可是有重要角色的。

 

一、認(rèn)識(shí)流感病毒

 

流感病毒（Influenza）根據(jù)病毒核蛋白和基質(zhì)蛋白，可分為甲乙丙�。ˋBCD）四型，其中對(duì)人造成比較大威脅的是甲型（Influenza A）和乙型（Influenza B），對(duì)免疫力低下的人群都可能造成致命后果，尤其甲型流感，殺傷力通常比乙型流感更強(qiáng)。
  甲型流感按血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA的蛋白結(jié)構(gòu)和基因型進(jìn)行分型，于是就有了H1N1流感、H3N2流感等分型命名。乙型流感則分為Victoria系和Yamagata系。

我們常看到新聞報(bào)道H1N1之類禽流感，就屬于甲型流感。甲型流感可以感染禽類、豬、馬、海豹、鯨魚、水貂等動(dòng)物，如果H5N1等禽流感、豬流感突然變異成能夠感染人，那往往會(huì)帶來(lái)嚴(yán)重后果，因?yàn)檫@樣的病原體對(duì)人體免疫系統(tǒng)來(lái)說(shuō)是很陌生的，難以應(yīng)對(duì)。

二、如何檢測(cè)是否感染流感

按2020版的流行性感冒診療方案，以臨床表現(xiàn)（癥狀）結(jié)合一種或以上的病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，來(lái)判斷確診流感。病原學(xué)檢測(cè)主要分抗原檢測(cè)、核酸檢測(cè)、培養(yǎng)分離和血清學(xué)檢查四種，其中常用的是前面兩種。
  核酸檢測(cè)大家不陌生，就是拭子采樣然后用PCR檢測(cè)�？乖瓩z測(cè)大家是否還記得？我們?cè)诩揖湍茏约鹤龅哪欠N膠金體檢測(cè)就屬于抗原檢測(cè)，膠金體抗原檢測(cè)屬于低靈敏度檢測(cè)，有時(shí)候可能檢測(cè)不出陽(yáng)性。
  在醫(yī)院等醫(yī)療機(jī)構(gòu)，我們有更高靈敏度、高特異性的抗原檢測(cè)方法，免疫熒光法，比如體現(xiàn)為呼吸道七聯(lián)檢或者呼吸道九聯(lián)檢，使用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察判斷。
  顧名思義，呼吸道七聯(lián)檢/九聯(lián)檢是一次同時(shí)檢測(cè)七種/九種呼吸道病原體，以更快速判斷呼吸道感染情況，其中兩個(gè)孔位包括甲型流感和乙型流感。
  使用熒光顯微鏡400倍視野觀察（40X物鏡），甲型流感檢測(cè)孔位熒光少且弱，視為陰性結(jié)果，熒光亮度強(qiáng)數(shù)量多，平均每個(gè)視野的陽(yáng)性細(xì)胞大于3-5個(gè)，就可以判斷為陽(yáng)性。乙型流感另有一個(gè)孔位，判斷標(biāo)準(zhǔn)和甲型流感一致。
  免疫熒光法檢測(cè)快速，而且準(zhǔn)確性高于膠金體法，因此得到越來(lái)越多醫(yī)療機(jī)構(gòu)的選擇。

三、流感病毒如何預(yù)防

預(yù)防流感病毒，首先當(dāng)然還是提倡勤洗手多通風(fēng)，然而就是盡量接種疫苗，尤其是以下高危人群：5歲以下兒童、65歲及以上老人、肥胖者、妊娠及圍產(chǎn)期婦女，以及有慢性呼吸系統(tǒng)疾病等基礎(chǔ)疾病的人。
  目前國(guó)內(nèi)流感疫苗主要有三類，三價(jià)滅活（IIV3）、四價(jià)滅活（IIV4）和三價(jià)減毒活疫苗（LAIV3），都能為甲型流感H1N1、H3N1和乙型流感Victoria系提供保護(hù)，四價(jià)滅活還能額外保護(hù)乙型流感Yamagata系。
  那么流感疫苗是怎么制作的呢？首先和很多其他滅活疫苗一樣，有細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)裂解疫苗工藝。
  裂解疫苗使用細(xì)胞培養(yǎng)增殖病毒，再通過(guò)裂解，去除大分子蛋白和病毒核酸，僅保留有較高免疫原性的血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA等蛋白，形成裂解疫苗，這個(gè)過(guò)程中會(huì)使用倒置顯微鏡對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的情況進(jìn)行觀察。
  另一種工藝就比較魔性了，用雞蛋培養(yǎng)。這些雞蛋看起來(lái)跟我們買的雞蛋差不多，但又不是一般雞蛋，它們?nèi)�是高潔凈度的SPF受精蛋，里面是有雞胚胎的。
  上一年兩種流感的基因會(huì)在雞蛋清中自然混合，形成適合使用的新流感品種，每個(gè)雞蛋可以做出一劑或幾劑疫苗。這個(gè)工藝把雞蛋當(dāng)成生物反應(yīng)器用，好處是設(shè)備要求低，因此起步成本低，壞處是生產(chǎn)周期長(zhǎng)、產(chǎn)能提升難、以及病毒錯(cuò)配失效等問(wèn)題，比如今年禽流感疫情大大影響雞蛋價(jià)格，這種方式就不靈了，這推動(dòng)了更多企業(yè)要轉(zhuǎn)向細(xì)胞培養(yǎng)方式。 總結(jié)：流感不僅是一種古老的疾病，還是一種講長(zhǎng)期存在、不太可能消失的疾病，對(duì)于老人小孩和慢性疾病患者，還是接種疫苗進(jìn)行保護(hù)好，無(wú)論選擇三價(jià)滅活、四價(jià)滅活還是三價(jià)減毒，都能為比較高危險(xiǎn)的甲型流感提供保護(hù)，所以是值得投入的。

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