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不同種類的鱟試驗法分類標準及使用比較

瀏覽次數(shù):551 發(fā)布日期:2022-11-15  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

根據(jù)反應(yīng)機理的不同又可將鱟試驗法分為以凝膠的形成作為指標的凝膠法,以凝膠的濁度變化作為指標的比濁法以及顯色合成基質(zhì)水解顯色作為指標的比色法,其中以定性的凝膠法收載最為普通(表3)。
 

根據(jù)反應(yīng)機理的不同,主要可分為以下幾類:

(1)凝膠法(Gel-Clot technique):可在0.03Eu/ml的范圍內(nèi)進行半定量測定。

(2)比濁法(Turbidimetric Assay):通常在0.006 ~ 300Eu/ml的范圍內(nèi)進行定量。

(3)比色法(Colorimetric Assay):操作比較復雜,但靈敏度和精確度高。通常在0. 006~15Eu/ml的范圍內(nèi)進行定量。

(4)ELISA(Enzyme-Linked immunosorbent assay):用鱟試劑與酶聯(lián)吸附免疫測定法聯(lián)合檢定微量內(nèi)毒素的方法。

(5)以巨噬細胞產(chǎn)生的細胞分裂素(Cytodines):作為機體反應(yīng)指標的熱原檢查系統(tǒng)。

凝膠法:即在100 x 75mm的小試管內(nèi),加入待檢樣品的鱟試劑混合。37℃60分鐘保溫反應(yīng)后,180°倒轉(zhuǎn),根據(jù)凝膠形成的有無作為判定指標的一種半定量法。此法操作比較簡單、經(jīng)濟,而且不需要專用測定儀器。可在0.03Eu/ml的范圍內(nèi)進行半定量測量。

比濁法:根據(jù)內(nèi)毒素與鱟試劑的(C因子)反應(yīng)機理,被激活的凝固酶切斷凝固蛋白原中特定位置的精氨肽鏈。形成凝固蛋白,產(chǎn)生凝膠的濁度變化,適當?shù)臐岫葴y定儀進行定量的一種方法?煞譃镋ndopoint Assay和Kinetic turbidimetric Assay。此法操作簡單、經(jīng)濟、靈敏度高、檢測范圍廣。通常在0. 006~300ET/ml的范圍同時進行定量。但需要專用儀器。

比色法:根據(jù)被內(nèi)毒素激活的凝固酶水解鱟三肽中精氨酸肽鏈。釋放出對硝基苯胺(PNA黃色A405nm)用冰醋酸中止反應(yīng)進行吸光度測定,或用游離的PNA和偶氮試劑反應(yīng),最終形成偶氮藍復合物顯色(紅色A 545nm)而進行比色測定的一種方法。可分為Endopoint Assay和Kinetic turbidimetricAssay。此法操作比較復雜。但靈敏度、定量性和精度都高。通常在0. 006 ~15Eu/ml的范圍內(nèi)進行定量,而且更微量的內(nèi)毒素也可定量。目前主要用在血液﹑體液中的微量內(nèi)毒素的測定方面。

來源:科德角國際生物醫(yī)學科技(北京)有限公司
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