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LS18平鋪光片顯微鏡成像案例:脂肪組織神經(jīng)和血管的3D重構(gòu)

瀏覽次數(shù):909 發(fā)布日期:2022-11-3  來(lái)源:锘海生命科學(xué)
脂肪組織在機(jī)體能量穩(wěn)態(tài)調(diào)控和體溫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要的作用。脂肪組織由不同類型的脂肪細(xì)胞以及脂肪細(xì)胞前體、免疫細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管和神經(jīng)投射物組成。目前分析脂肪組織的免疫組織化學(xué)和免疫熒光方法主要是基于對(duì)具有相對(duì)高倍率成像的薄切片。然而,這種方法存在著明顯的局限性。首先,復(fù)雜的絲狀結(jié)構(gòu),如交感神經(jīng)和脈管系統(tǒng),已知在脂肪功能中起著重要的作用,薄切片僅捕獲一小部分組織,這可能導(dǎo)致結(jié)論因分析的組織部分不同而產(chǎn)生差異,很難通過(guò)薄切片進(jìn)行評(píng)估。其次,由于脂肪組織獨(dú)特的無(wú)定形形態(tài)特征,很難僅根據(jù)切片染色來(lái)評(píng)估脂肪組織的三維結(jié)構(gòu)。鑒于這些因素,非常需要一種可提供整個(gè)脂肪組織的三維可視化并且保持高分辨率的方法。
 
锘海生命科學(xué)自主研發(fā)的平鋪光片顯微鏡具有三維成像速度快、對(duì)比度高、低光毒性、低光漂白等諸多優(yōu)點(diǎn)。此外,依托于顯微鏡測(cè)樣服務(wù)工作積累的豐富的組織透明化、組織免疫熒光染色及成像經(jīng)驗(yàn),锘海生命科學(xué)自主研發(fā)出了快速高效的锘海組織透明化試劑盒,大大提高樣本組織透明化的效率,為廣大科研工作者提供一套更為專業(yè)、完整的服務(wù)解決方案!
 
我們使用TH對(duì)脂肪組織的神經(jīng)進(jìn)行標(biāo)記,如下圖1、2所示,為小鼠附睪脂肪神經(jīng)成像3D重構(gòu)結(jié)果。該脂肪組織大小為6.0x8.5x2.5 mm,成像分辨率為橫向4 μm,縱向10 μm,成像時(shí)長(zhǎng)僅4分鐘。

圖1 小鼠附睪脂肪組織神經(jīng)成像

圖2 小鼠附睪脂肪組織神經(jīng)成像(局部圖)
視頻鏈接:https://v.qq.com/x/page/b3357z7f0qt.html
 
我們使用SM22對(duì)脂肪組織的大血管進(jìn)行標(biāo)記,如下圖3、4所示,為小鼠附睪脂肪組織大血管成像3D重構(gòu)結(jié)果。該脂肪組織大小為6.0x8.5x4.0 mm,成像分辨率為橫向2 μm,縱向10 μm,成像時(shí)長(zhǎng)僅10分鐘。

圖3 小鼠附睪脂肪組織大血管成像

圖4 小鼠附睪脂肪組織大血管成像(局部圖)
視頻鏈接:https://v.qq.com/x/page/j3361f0z4bi.html
 
參考文獻(xiàn):
[1] Chi J, Crane A, Wu Z, Cohen P. Adipo-Clear: A Tissue Clearing Method for Three-Dimensional Imaging of Adipose Tissue. J Vis Exp. 2018 Jul 28;(137):58271. doi: 10.3791/58271. PMID: 30102289; PMCID: PMC6126572.
[2] Wang P, Loh KH, Wu M, Morgan DA, Schneeberger M, Yu X, Chi J, Kosse C, Kim D, Rahmouni K, Cohen P, Friedman J. A leptin-BDNF pathway regulating sympathetic innervation of adipose tissue. Nature. 2020 Jul;583(7818):839-844. doi: 10.1038/s41586-020-2527-y. Epub 2020 Jul 22. PMID: 32699414.
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