細胞實驗室預(yù)防污染的幾個小技巧
瀏覽次數(shù):1131 發(fā)布日期:2022-8-23
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在我們進行細胞實驗時,最重要的是杜絕一切可能的污染源,如果造成污染,實驗結(jié)果就會出現(xiàn)偏差,所以必須重新檢測,這一套流程下來即浪費工作時間,又增加了實驗成本。而且以污染細胞和未污染細胞為基礎(chǔ)進行實驗時,有可能得到的實驗結(jié)果會截然不同。所以如何預(yù)防污染的發(fā)生是細胞實驗室最重要的一項工作。
如果實驗室引入一種新的細胞系,或者一直培養(yǎng)保存的細胞系,但對該細胞系從未鑒定或檢測過,就有可能給實驗室?guī)砦廴。因此使用前?yīng)先鑒定新引入細胞系,或檢測保存的細胞系是否無污染。
細胞系STR分析已被權(quán)威機構(gòu)作為金標準應(yīng)用于細胞鑒定
對于培養(yǎng)基等試劑的選擇,必須在符合GMP/GLP規(guī)定的廠房生產(chǎn),并且需要對血清進行常規(guī)污染檢測,以及建立良好的分裝習慣和體系。
所有分裝使用或備用的試劑(如血清、胰酶)都應(yīng)該去記錄批次號,并且要保證實驗室干凈、衛(wèi)生,實驗的設(shè)備是無菌的、以及操作環(huán)節(jié)無誤,這些做好了都可避免污染的發(fā)生。所以必須遵照嚴格的無菌操作規(guī)范和管理。
遵照嚴格的無菌操作規(guī)范和管理步驟:
1)利用合適的工具進行移液操作
如果移液操作過程誤操作,那么分裝樣品有可能存在污染。因此選擇合適的移液器和高品質(zhì)耗材,是確保分裝樣品潔凈的保證。跟實驗室常用的雙按鈕移液器相比,單按鈕移液器能更好的減少氣溶膠污染,因為單按鈕移液器打出吸頭時活塞無需回彈,而且直接按下去。
2)「具有生物安全柜功能」的濾芯吸頭
移液操作中除移液器外,還可通過使用濾芯吸頭來降低氣溶膠污染。優(yōu)先選用雙濾芯吸頭,它具有兩層濾芯和不同孔徑,確保超高的阻隔效率。其濾芯性能符合EN1822標準(空氣過濾的級別),具有HEPAE12級的過濾性能。
3)用培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細胞,特別是透氣蓋培養(yǎng)瓶
相比培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶只有瓶口可以與外界聯(lián)通,因此減少外界氣體及微生物與培養(yǎng)細胞接觸,減少污染的幾率。具有濾膜的透氣瓶蓋,可更加有效的防止細菌、病毒,以及支原體等的污染。
4)水浴設(shè)備必須做好清潔和維護
水也是主要污染源之一,所以在我們使用水浴設(shè)備進行細胞復(fù)蘇時,一定要注意防止細菌或霉菌的污染,相關(guān)設(shè)備要帶蓋,每周徹底清潔,水浴中可添加抑菌劑限制細菌增殖,錐形瓶/樣品管等從水浴中取出后,需進行有效消毒。相較而言,金屬浴可提供無污染的溫控條件。