本期摘要：核酸降解環(huán)節(jié)在分子生物學(xué)技術(shù)中非常重要。它被廣泛用于重組DNA技術(shù)中，用以去除不需要的DNA和RNA片段。核酸降解酶簡(jiǎn)稱核酸酶，類型不同所具備的功能也不相同。用于降解DNA的核酸酶被稱為DNA酶，而降解RNA的核酸酶被稱為RNA酶。這些酶主要用于體外分離純化DNA，RNA或蛋白質(zhì)。全能核酸酶是一種能同時(shí)降解DNA和RNA的核酸酶，而DNA酶（DNase）僅能降解DNA。這是全能核酸酶和DNA酶之間的關(guān)鍵區(qū)別。

什么是全能核酸酶

全能核酸酶是一種來(lái)自粘質(zhì)沙雷氏菌的核酸內(nèi)切酶。這種酶在工業(yè)上由重組大腸桿菌產(chǎn)生，能夠切割雙鏈DNA，線性DNA，環(huán)狀DNA和單鏈RNA。全能核酸酶是一種蛋白二聚體，具有245個(gè)氨基酸，分子量約為30kDa，具有兩個(gè)必需的二硫鍵。功能上全能核酸酶在核酸的5'末端切割，并產(chǎn)生具有游離5'末端的片段，可以在任何序列上切割核酸，但更喜歡富含GC的區(qū)域。

全能核酸酶儲(chǔ)存溫度為-20℃，酶活最佳pH值為8.0-9.2。可用于蛋白質(zhì)2D凝膠電泳的樣品制備中的核酸污染物去除、降低蛋白質(zhì)提取物的粘度，防止細(xì)胞混合物中的細(xì)胞結(jié)塊。

什么是DNA酶（DNase）

DNA酶是一種核酸水解酶，只能切割雙鏈DNA。有兩種主要類型的DNA酶：DNase I和Nase II。DNaseI切割雙鏈DNA以產(chǎn)生具有5'游離端的多核苷酸。DNase II則在切割雙鏈DNA過(guò)程中產(chǎn)生具有3'游離末端或懸垂的多核苷酸鏈。

DNase I

DNase I 最適pH在7.0-8.0之間，酶活取決于輔助離子，包括Ca2+，Mg2+或Mn2+，Mg2+和Mn2+決定了DNA酶I的活性與功能。在只有Mg2+存在的情況下，DNase I 會(huì)隨機(jī)切割雙聯(lián)DNA的每條鏈。而只存在Mn2+的情況下，該酶在大致相同的位點(diǎn)切割兩條DNA鏈，這種切割將導(dǎo)致產(chǎn)生兩種類型的DNA片段：一種類型具有平末端，另一種類型具有一個(gè)或兩個(gè)核苷酸粘性末端。

DNase II

DNase II的最適pH在4.5-5.0之間，其活性依賴二價(jià)金屬離子，類似于DNase I。已知DNA酶II的作用機(jī)制分為以下三個(gè)步驟。

●在DNA骨架內(nèi)誘導(dǎo)多個(gè)單鏈斷裂。
●產(chǎn)生酸溶性核苷酸和寡核苷酸。
●非線性增色位移。

DNase II 的主要抑制劑包括金屬螯合劑、過(guò)渡金屬和化學(xué)物質(zhì)，如十二烷基硫酸鈉和β-巰基乙醇。

DNase II 主要應(yīng)用包括制備無(wú)DNA的RNA提取物和蛋白提取物，以及在體外轉(zhuǎn)錄中去除模板DNA。

全能核酸酶和DNase酶的相似之處

●兩者都是水解酶。
●兩者都是核酸酶。
●兩者都通過(guò)切割核酸的磷酸二酯鍵來(lái)作用。
●兩者都需要最佳的pH值和儲(chǔ)存溫度來(lái)維持酶的活性。
●酶抑制劑包括螯合劑、過(guò)渡金屬和洗滌劑化學(xué)品。
●應(yīng)用主要集中在獲得DNA，RNA和蛋白質(zhì)的高純度提取物上。
●這兩種酶都可以通過(guò)基因工程產(chǎn)生。

全能核酸酶和DNase酶的區(qū)別

總結(jié)：全能核酸酶 vs DNase

核酸酶廣泛用于分子生物學(xué)和基因工程的不同實(shí)驗(yàn)中。全能核酸酶和DNA酶是兩種類型的核酸酶，其中全能核酸酶參與降解DNA和RNA，而DNA酶僅參與切割雙鏈DNA。這是全能核酸酶和脫氧核糖核酸酶之間的基本區(qū)別。目前，這兩種核酸酶類型都是通過(guò)重組DNA技術(shù)生產(chǎn)，能夠更高質(zhì)量的酶，通過(guò)優(yōu)化可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。

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●杰出單位比酶活，更高效的核酸降解能力
●規(guī)范的液相標(biāo)準(zhǔn)品定量，出色的質(zhì)譜均一性認(rèn)證
●嚴(yán)格的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，確保單位酶活的準(zhǔn)確性以及批次間穩(wěn)定性
●先進(jìn)的生產(chǎn)工藝，非傳統(tǒng)His標(biāo)簽純化，排除引入金屬離子風(fēng)險(xiǎn)
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