乳酸乳球菌nz3900的應用
瀏覽次數(shù):1273 發(fā)布日期:2022-6-13
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乳酸乳球菌是發(fā)酵工業(yè)中常用的的發(fā)酵劑之一,特別是在發(fā)酵乳制品中。另外,乳酸乳球菌是常用的誘導表達型宿主菌之一,具有重要的研究和應用價值。乳酸乳球菌歸屬于硬壁菌門(Firmicutes)、桿菌綱(Bacilli)、乳桿菌目(Lactobacillales)、鏈球菌科(Streptococcaceae)、乳球菌屬(Lactococcus)。一般認為乳酸乳球菌包括三個亞種,其中乳源的有乳酸乳球菌乳酸亞種(L.lactissubsp.lactis)和乳酸乳球菌乳脂亞種(L.lactissubsp.cremoris),還有分離自葉蟬的乳酸乳球菌霍氏亞種(L.lactissubsp.hordniae)。乳酸乳球菌主要通過表型特征(生理生化、細胞壁組成、蛋白質(zhì)印記等)和基因特征(與已知菌相比較,從而得知分類位置)進行鑒定,其中遺傳分析具有快速、準確、分辨率高的優(yōu)點,已經(jīng)成為乳酸乳球菌鑒定的主要方法。同時16SrRNA技術(shù)已經(jīng)普遍用于乳酸乳球菌的分離和鑒定
基本信息:
菌種名稱:乳酸乳球菌nz3900
平臺編號:zl-059660
抗性:無
培養(yǎng)基:GM17:M17培養(yǎng)基基礎上添加5g/L葡萄糖
菌株類別:乳酸菌
培養(yǎng)條件:30℃,有氧,GM17
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化:電轉(zhuǎn)
保存方式:20%甘油,-80℃
乳酸乳球菌的應用:
乳酸乳球菌生長快速、代謝相對簡單,分解與合成代謝分開;基因組小但包含足夠的生物信息,胞內(nèi)外蛋白易于分離、純化,這些優(yōu)勢使乳酸乳球菌在代謝調(diào)控方面具有的重大研究價值。乳酸乳球菌在乳制品中已經(jīng)得到廣泛的應用,它可作為發(fā)酵劑用于酸奶油、酸奶、大豆酸奶、乳飲料等乳制品的生產(chǎn)。它也是制備干酪常用的發(fā)酵劑,例如切達干酪、農(nóng)家干酪、夸克等,乳酸乳球菌對于干酪等發(fā)酵乳制品的風味有重要影響。
食品工業(yè)中
由于工業(yè)化的快速發(fā)展,生活水平大幅度提高,人們開始注重食物的營養(yǎng)成分含量。人們不再滿足于水分占百分之八十多的牛奶,而要吃牛奶的精華,于是奶油、干酪(cheese)成為人們飲食中的重要食品。干酪是在牛乳(或脫脂乳、稀奶油、酪乳等)中加入適量的乳酸菌發(fā)酵劑和凝乳酶,使乳中的蛋白質(zhì)凝固,分離乳清而制得的新鮮或發(fā)酵成熟的乳制品。干酪的營養(yǎng)價值很高,主要成分是水、脂肪和蛋白質(zhì)。干酪中的蛋白質(zhì)經(jīng)過發(fā)酵后,由于凝乳及微生物中蛋白酶的分解作用,形成胨、肽、氨基酸等,非常易于被人體消化吸收,干酪中蛋白質(zhì)的消化率為96-98%:干酪中的鈣、磷含量在所有食品中含量是最高的,而且接近人體的需要量,最易被人體消化吸收;干酪中水溶性維生素和脂溶性維生素含量也相當豐富。所以,在日常生活中增加干酪的攝入,對增強體質(zhì)、保持健康有重要意義。對于乳糖不耐癥人群,干酪是一種非常好的乳制品,因為牛奶中的大部分乳糖在干酪加工過程中隨著乳清的排除被帶走。
在西方國家,干酪是一種非常普遍的食品,應用于人們的日常飲食,消費量是相當大的。2001年歐洲人均干酪消費量為18kg,而我國年人均消費量只有0.1kg。究其原因,一方面是由于人們能購買到的干酪大部分是進口商品,價格較高;另一方面是由于其口味很難被國人接受,因此發(fā)展適合中國人口昧的干酪產(chǎn)業(yè),對于提高我國人民的營養(yǎng)水平具有實際意義。
乳酸菌是干酪生產(chǎn)的靈魂。乳酸乳球菌是乳球菌屬最重要和最典型的一個種,包含兩個亞種,即乳酸乳球菌乳脂亞種和乳酸乳球菌乳酸亞種。一直以來,這兩個亞種被人們用來作為乳制品發(fā)酵劑,前者可用于生產(chǎn)軟干酪,后者可用于生產(chǎn)質(zhì)地較硬的干酪。全世界范圍內(nèi)每年有超過一千萬噸的乳酸乳球菌細胞,應用于干酪、黃油和酪乳的發(fā)酵工業(yè)中。在乳制品發(fā)酵工業(yè)中乳酸乳球菌的主要作用,除了將牛奶中的乳糖通過發(fā)酵轉(zhuǎn)變成乳酸,產(chǎn)生風味物質(zhì)雙乙酰和乙醛外,在于酪成熟過程中,它胞內(nèi)的肽酶和胞外的蛋白酶可以促進干酪中的蛋白質(zhì)水解,從而對成熟干酪風味物質(zhì)的形成具有重要作用。
切達干酪(cheddarcheese),其名來源于十六世紀的英國原產(chǎn)地切達郡,是一種硬質(zhì)全脂牛乳干酪。色澤白或金黃,組織細膩,口味柔和,含乳脂45%。其制作工藝如今已廣傳于世界許多地區(qū),尤其是美國,由于美國產(chǎn)量之高和食用者之多,甚至有人將它稱之為“美國干酪”。它是最基本的干酪之一,也極具“全能性”,因為在烹調(diào)過程中,從澆汁到干酪醬到烘烤,它幾乎可以取代所有的干酪。然而,在切達干酪成熟過程中,由于蛋白質(zhì)水解而形成的某些苦味肽會影響干酪的口感。研究表明,乳酸乳球菌乳脂亞種SK11胞內(nèi)的肽酶可以降解這些苦味肽,從而提高切達干酪的可接受度,因而,乳酸乳球菌SK11被認為是生產(chǎn)切達干酪的一種優(yōu)良菌株。
代謝工程
生物技術(shù)產(chǎn)品的安全性歷來部受到人們的關(guān)注,其中,宿主菌是一個至關(guān)重要的因素。由于大腸桿菌會產(chǎn)生內(nèi)毒素,因而如果采用傳統(tǒng)的大腸桿菌克隆與表達外源基因,其表達產(chǎn)物需經(jīng)過復雜的分離純化才能達到食品醫(yī)藥標準。建立食品級基因表達系統(tǒng),為有益于人類健康的外源基因表達產(chǎn)物在功能食品、保健品及化妝品等領(lǐng)域的廣泛應用創(chuàng)造了條件。已經(jīng)在一些乳酸菌菌株中建立了食品級基因表達系統(tǒng),如干酪乳桿菌、瑞士乳桿菌和乳酸乳球菌。其中乳酸乳球菌最有代表性,也可能是最有價值的,也是最受重視、研究得最深入的一類。乳酸乳球菌生長快速、代謝相對簡單,分解與合成代謝分開,不產(chǎn)生任何內(nèi)毒素或毒性物質(zhì);不產(chǎn)生孢子;不會形成包涵體;不產(chǎn)生任何胞外蛋白酶;單層細胞膜,利于分泌外源蛋白;基因組小,胞內(nèi)外蛋白相對較少,易于純化。這些特性使乳酸乳球菌成為代謝工程不可多得的實驗對象,被譽為生產(chǎn)食品級代謝產(chǎn)物的超級“細胞加工廠”。
乳酸乳球菌中存在大量的染色體外因子(如質(zhì)粒和噬菌體),為其分子生物學研究和基因載體系統(tǒng)的發(fā)展提供了極好的材料。在近十多年中,隨著乳酸乳球菌內(nèi)源性質(zhì)粒的去除和電穿孔轉(zhuǎn)基因技術(shù)的建立以及乳酸乳球菌各類表達信號的分離和克隆,已建立和發(fā)展了一系列具有不同用途的乳酸乳球菌載體和受體系統(tǒng)。這些載體包括基本的克隆載體,啟動子、終止子及分泌信號等的選擇載體,各類整合載體及基因表達載體。如今,乳酸乳球菌已成為研究得最透徹的一種乳酸菌。
該誘導表達系統(tǒng)具有以下優(yōu)點:食品級的誘導物和宿主菌,嚴謹性高,本底表達水平低,誘導效率高,表達產(chǎn)量高。該食品級基因表達系統(tǒng)可控制并高水平表達同源和異源基因,在食品工業(yè)及其它相關(guān)領(lǐng)域?qū)⒕哂泻芎玫膽们熬啊?