高架十字迷宮(Elevated Plus Maze, EPM)是一種在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域中被廣泛用于焦慮與其相關(guān)癥狀研究的行為實(shí)驗(yàn),此種實(shí)驗(yàn)充分利用了嚙齒動(dòng)物不喜歡開(kāi)闊地并盡可能的去追求遮蔽的天性。高架十字迷宮為一個(gè)擁有四種選擇的迷宮,其中兩個(gè)方向?yàn)殚_(kāi)闊且無(wú)圍墻保護(hù)的空間(Open Arms) ,而另外兩個(gè)為封閉空間(Close Arms) ,動(dòng)物在天性驅(qū)使之下會(huì)去追求遮蔽,因此會(huì)在擁有遮蔽的封閉臂待上較久的時(shí)間,利用老鼠害怕開(kāi)闊地的天性進(jìn)而觀察其焦慮或恐懼所造成的行為。
高架十字迷宮硬體設(shè)備介紹
標(biāo)準(zhǔn)的高架十字迷宮擁有一個(gè)小型的中間出發(fā)區(qū)域,此區(qū)域有4條向四方延伸的開(kāi)闊/封閉臂,四條臂長(zhǎng)約30-50公分且寬約為5-10公分,彼此間保持90度夾角,實(shí)際的大小由您要使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類而定(大鼠、小鼠甚至是小型靈長(zhǎng)目) 。開(kāi)闊臂與封閉臂采交叉間隔,封閉臂通常擁有高達(dá)40公分但無(wú)天花板的墻面,墻面可以是透明或是霧面 ,至于開(kāi)闊臂的末端建議可以加裝一塊擋板,防止動(dòng)物在開(kāi)闊臂探索時(shí)掉落。迷宮的顏色應(yīng)該與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的顏色形成對(duì)比以利觀察或分析 (例如白鼠配深色迷宮) 。整組迷宮需離地至少50公分,防止動(dòng)物從開(kāi)闊臂逃離。
由于封閉臂的墻面可能會(huì)產(chǎn)生陰影,而陰影可能會(huì)影響動(dòng)物本身的視野或行為,因此在架設(shè)高架十字迷宮時(shí)需特別考量燈光的位置,將燈源架設(shè)在迷宮的正上方會(huì)是個(gè)好選擇。
大小鼠高架十字迷宮
1、實(shí)驗(yàn)之前,一定要確保高架十字迷宮整個(gè)裝置的清潔。盡可能創(chuàng)造一個(gè)清潔、無(wú)味道的理想試驗(yàn)環(huán)境。同時(shí),實(shí)驗(yàn)員需要記錄動(dòng)物的編號(hào)、日期、狀態(tài)等信息;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提前運(yùn)送到行為學(xué)實(shí)驗(yàn)室專用臨時(shí)籠架 ,適應(yīng)環(huán)境至少3H左右, 減少動(dòng)物緊張。
2、將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(大鼠或者小鼠)從飼養(yǎng)籠中取出,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物盡量背向?qū)嶒?yàn)員,將動(dòng)物輕輕放在儀器宮體的中央?yún)^(qū)域,動(dòng)物面向開(kāi)臂,然后實(shí)驗(yàn)員迅速安靜的離開(kāi);
3、打開(kāi)小動(dòng)物行為記錄分析系統(tǒng),設(shè)置好參數(shù),跟蹤動(dòng)物在高架十字迷宮儀器內(nèi)的軌跡運(yùn)動(dòng),自動(dòng)計(jì)算指標(biāo);
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,取出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,放入飼養(yǎng)籠,做好實(shí)驗(yàn)完成動(dòng)物的標(biāo)記信息,同時(shí),用酒精和紙巾清潔迷宮。
1、進(jìn)入開(kāi)放臂次數(shù):進(jìn)入到任一開(kāi)放臂的次數(shù),以動(dòng)物的四肢均進(jìn)入臂內(nèi)為準(zhǔn)或者以動(dòng)物身體80%進(jìn)入臂內(nèi)為準(zhǔn)。
2、開(kāi)臂活動(dòng):動(dòng)物四肢全部進(jìn)入或者身體80%進(jìn)入開(kāi)臂內(nèi)的持續(xù)時(shí)間,單位:秒。
3、進(jìn)入閉臂次數(shù):進(jìn)入到任一閉臂的次數(shù),以動(dòng)物的四肢均進(jìn)入臂內(nèi)為準(zhǔn)或者以動(dòng)物身體80%進(jìn)入臂內(nèi)為準(zhǔn)。
4、閉臂活動(dòng):動(dòng)物四肢全部進(jìn)入或者身體80%進(jìn)入閉臂內(nèi)的持續(xù)時(shí)間,單位:秒。
5、向下探究次數(shù):實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置身于中央?yún)^(qū)域或者開(kāi)臂時(shí),一邊用前爪握住迷宮邊緣一邊把頭部和肩部伸出開(kāi)臂的邊緣向迷宮下面探究的行為次數(shù)。
6、閉臂后腿直立次數(shù):也叫閉臂支撐性站立,動(dòng)物在閉臂前腿抬起以后腿支持身體直立的次數(shù)。
7、中央?yún)^(qū)域活動(dòng):中央?yún)^(qū)域指的是開(kāi)臂和閉臂鏈接交叉的區(qū)域,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在這個(gè)區(qū)域內(nèi)的活動(dòng)路程和滯留時(shí)間。
注意事項(xiàng)
· 高架十字迷宮最常被用來(lái)進(jìn)行焦慮相關(guān)研究
· 高架十字迷宮擁有對(duì)稱的開(kāi)闊臂跟封閉臂,彼此以90度夾角
· 主要記錄動(dòng)物對(duì)于開(kāi)闊臂與封閉臂的偏好相關(guān)數(shù)據(jù)
· 較不焦慮(或是施以抗焦慮藥物)的動(dòng)物會(huì)進(jìn)行較多次的開(kāi)闊臂探索,且較不易產(chǎn)生焦慮行為
· 有焦慮癥狀(或是施以焦慮促進(jìn)藥物)的動(dòng)物會(huì)減少探索開(kāi)闊臂的次數(shù)與頻率,且易產(chǎn)生焦慮行為并偏好待在封閉臂
· 高架十字迷宮很適合使用者改裝并加入想研究的元素
· 不同品系的動(dòng)物對(duì)高架十字迷宮會(huì)有不同的反應(yīng),設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)需特別注意
經(jīng)過(guò)多次的驗(yàn)證,訓(xùn)練階段會(huì)讓動(dòng)物熟悉環(huán)境,大大降低實(shí)驗(yàn)階段探索的頻率,動(dòng)物很有可能在實(shí)驗(yàn)一開(kāi)始就躲在它熟悉的角落休息,因此在最新的實(shí)驗(yàn)流程中,進(jìn)行高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)是不需要訓(xùn)練的。
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