SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞簡單介紹：
  骨髓原始間充質(zhì)干細(xì)胞(SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞)是骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，是人們?cè)诓溉閯?dòng)物的骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的一種具有分化形成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)及成肌細(xì)胞的多種分化潛能的細(xì)胞亞群。它們對(duì)骨髓中的造血干細(xì)胞（HSC）不僅有機(jī)械支持作用，還能分泌多種生長因子（如IL-6，IL-11，LIF，M-CSF及SCF等）來支持造血。
　常用的分離MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法，(SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞)全骨髓法即根據(jù)干細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基中有貼壁優(yōu)勢特性，定期換液除去不貼壁細(xì)胞，從而達(dá)到純化及擴(kuò)增MSC的目的。密度梯度離心法即根據(jù)骨髓中各細(xì)胞成分比重的不同，分離單核細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)。二者本質(zhì)上無多大區(qū)別。隨著對(duì)MSC表面抗原認(rèn)識(shí)的深入，又有人利用免疫方法如流式細(xì)胞儀法、免疫磁珠法等對(duì)其進(jìn)行分離純化。但經(jīng)過流式或磁珠分選后的細(xì)胞出現(xiàn)了增殖緩慢等一些問題，加之成本較高和技術(shù)的難度，在某種程度上限制了這些方法的廣泛應(yīng)用。

常見分離方法
目前BMSCs的分離方法主要有:
✦ 貼壁分離法：根據(jù)BMSCs的粘附特性來實(shí)現(xiàn)分離貼壁的方法；
✦ 密度梯度離心法：根據(jù)BMSCs與其他細(xì)胞的密度不同來分離的方法；
✦ 流式細(xì)胞儀分離法：根據(jù)細(xì)胞大小或者根據(jù)細(xì)胞表面的一些特殊標(biāo)志來分離的方法。
 
密度梯度離心法與流失細(xì)胞儀分離法價(jià)格昂貴且操作復(fù)雜、容易導(dǎo)致細(xì)胞大量流失，應(yīng)用相對(duì)較少。貼壁培養(yǎng)法應(yīng)用最早，具有操作簡單，對(duì)細(xì)胞干擾少，不易發(fā)生污染等特點(diǎn)較為廣泛應(yīng)用，其缺點(diǎn)是細(xì)胞純度較低，但有關(guān)研究表明，BMSCs細(xì)胞擴(kuò)增到P1、P2代后細(xì)胞的純度分別可達(dá)到95%、98%。
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞傳代能力測試 
批次323363
 
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長快速，高密度會(huì)影響細(xì)胞干性，建議按照1:3比例傳代細(xì)胞，傳代建議使用胰酶濃度為0.05%進(jìn)行消化。消化每t25培養(yǎng)瓶加胰酶1ml。消化時(shí)間約1-2min內(nèi)，t25培養(yǎng)瓶培養(yǎng)液約7ml完全培養(yǎng)基。
本次驗(yàn)證：傳代圖如下（4X）
P1-P5代，按照1:3比例傳代，48H(隔天)傳代一次。每次細(xì)胞狀態(tài)和增殖能力均良好。
P6-p8代1:3傳代，72h（隔兩天）傳代一次。
P8-P10代1:3傳代，144h（隔6三天）傳代一次。
此時(shí)細(xì)胞個(gè)體變大，生長速度明顯減慢。



SD大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞質(zhì)檢報(bào)告
 
貨號(hào)：ZQ0277
細(xì)胞形態(tài)圖：
細(xì)胞處于快速分裂的狀態(tài)，良好的MSCs顯示較小的紡錘狀的形態(tài)，伴有較多的折光的雙聯(lián)體，為新的正在分裂的細(xì)胞。細(xì)胞首代狀態(tài)較好，多數(shù)呈長梭形生長，部分不規(guī)則，極性良好，經(jīng)傳代 5次后，細(xì)胞仍較有活力。以1:2 的分種率傳代，約48h可長滿。


                                                                             分化測試


1. 成脂誘導(dǎo)分化
細(xì)胞匯合度約達(dá) 80%時(shí)，加入間質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)液后，細(xì)胞回縮較明顯。11 天后已有大量脂滴出現(xiàn)，培養(yǎng)21天后進(jìn)行油紅O 染色，可見被染為紅色的較標(biāo)準(zhǔn)的脂滴。

油紅O染色試劑盒描述：
 
     油紅O是一種脂溶性重氮染料，用于染色細(xì)胞和組織中的脂質(zhì)和脂肪沉積物。雖然樣品可能是新鮮的，冷凍的或福爾馬林固定的，但油紅O與石蠟包埋的組織切片不相容。觀察油紅O沉淀是正常的。因此，必須使用Whatman紙或注射器驅(qū)動(dòng)的過濾器單元通過過濾新鮮制備工作溶液。
貨號(hào)：0843。可點(diǎn)擊官網(wǎng)咨詢查看哦！

2.成骨誘導(dǎo)分化

細(xì)胞匯合度約達(dá) 70%時(shí)，加入間質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)液，誘導(dǎo) 21 天可見鈣結(jié)質(zhì)，進(jìn)行茜素紅染色鑒定， 茜素紅與類骨質(zhì)結(jié)合，形成同心圓狀的深紅色小結(jié)節(jié)。

茜素紅S染色試劑盒描述：

 茜素紅S （Alizarin Red S,簡稱ARS ）作為一種染料型配位劑在分光光度分析方面已有了廣泛的應(yīng)用。近年來，很多作者把 ARS 及其金屬配位物在汞電極上的吸附催化波用于電分析中，提高了測定的靈敏度和選擇性。貨號(hào)：0223，可點(diǎn)擊官網(wǎng)咨詢查看哦！

3.成軟骨細(xì)胞分化
細(xì)胞匯合度約達(dá) 70%時(shí)，加入間質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)液誘導(dǎo) 21 d 后，使用甲苯胺藍(lán)染色可見較廣泛的細(xì)胞外基質(zhì)藍(lán)紫色，尤其在細(xì)胞堆積區(qū)，圖中為細(xì)胞密度稍低的區(qū)域也可見明顯的異染顆粒。

 

阿利新藍(lán)染色試劑盒描述：

 

  阿爾辛藍(lán)是一種用于檢測細(xì)胞軟骨形成的染料，它可以染色軟骨組織中的硫酸化蛋白多糖。阿爾辛藍(lán)染色試劑盒含有1%的阿爾辛藍(lán)溶液，0.1%的核固紅，方便，即用型溶液。在pH 2.5時(shí)，阿爾辛藍(lán)染色酸性粘多糖并顯示藍(lán)色，而核固紅染色核粉紅色至紅色，細(xì)胞質(zhì)淡粉紅色。貨號(hào)：8378，可點(diǎn)擊官網(wǎng)咨詢查看哦！


表面分子流式檢測
 
CD29:來源  THermoFisher      PE
CD90:來源  THermoFisher      PE
CD45:來源  THermoFisher     FITC


*產(chǎn)品詳情請(qǐng)見中喬新舟官網(wǎng)：https://www.zqxzbio.com/
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上海中喬新舟生物科技有限公司
1、原代細(xì)胞：人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞、iPS誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（可提供細(xì)胞流式及免疫熒光鑒定報(bào)告，需簽訂MTA協(xié)議）。
2、培養(yǎng)基：原代細(xì)胞專用低血清、無血清、無異源蛋白無動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑：胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測試劑盒、細(xì)胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系（株）：種類豐富，已通過STR鑒定；提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品：支原體檢測/清除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù)：細(xì)胞熒光標(biāo)記服務(wù)（GFP/RFP/LUC）、干擾/過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建、細(xì)胞基因敲除、細(xì)胞系鑒定服務(wù)（STR）、原代細(xì)胞永生化、腫瘤細(xì)胞耐藥株構(gòu)建、原代細(xì)胞分離等。