熒光顯微鏡照明在研究癌癥抗原抗體在癌細(xì)胞巨噬細(xì)胞吞噬作用的應(yīng)用

瀏覽次數(shù)：1182　發(fā)布日期：2021-12-7　

CoolLED pE-300life光源的應(yīng)用——使用癌癥相關(guān)抗原的抗體研究癌細(xì)胞的巨噬細(xì)胞吞噬作用

（Debbie Wilkinson 博士 – 阿伯丁大學(xué)（蘇格蘭）顯微鏡和組織學(xué)核心設(shè)施的高級(jí)顯微鏡應(yīng)用專(zhuān)家。）

阿伯丁大學(xué)的顯微鏡和組織學(xué)核心設(shè)施為各種研究小組以及外部客戶(hù)提供支持，這意味著我們擁有廣泛的設(shè)備來(lái)處理不同類(lèi)型的樣品。海洋實(shí)驗(yàn)室為我們帶來(lái)了鯨脂和海水，其他樣本包括納米顆粒、酵母、蜜蜂和螨蟲(chóng)，以及標(biāo)準(zhǔn)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞。我們還致力于開(kāi)發(fā)技術(shù)，例如使用我們的熒光顯微鏡的相關(guān)顯微鏡。

像許多成像設(shè)施一樣，我們依賴(lài)傳統(tǒng)的燈進(jìn)行熒光顯微鏡照明。然而，當(dāng)旋轉(zhuǎn)圓盤(pán)共聚焦系統(tǒng)的燈泡出現(xiàn)故障時(shí)，Alan Tilley (Atlantic Imaging) 提供了一個(gè)CoolLED pE-300^life照明系統(tǒng)作為臨時(shí)措施。隨著用戶(hù)對(duì)其易用性、簡(jiǎn)單的開(kāi)/關(guān)切換和 0-100% 輻照度控制的認(rèn)可，照明系統(tǒng)變得流行起來(lái)。不需要更換燈泡也方便我們這些在工廠工作的人。因此，我們決定用 pE-300^life（圖 1）替換我們的廣角熒光倒置顯微鏡上的燈。

圖 1：Tatties*。 Zeiss Axio Observer Z1 和 CoolLED pE-300^lite 照明系統(tǒng)，用于熒光和相差成像，配備電動(dòng)濾光片、Zeiss 503 相機(jī)和長(zhǎng)距離 x20 和 x40 物鏡。

Tatties 是日常應(yīng)用中使用非常頻繁的主力系統(tǒng)，例如在應(yīng)用其他技術(shù)（如共聚焦激光掃描顯微鏡）之前檢查樣品染色。一位用戶(hù)是博士生 Ellen Main，她正在研究如何重新編程先天免疫系統(tǒng)以治療惡性腫瘤——特別是針對(duì)卵巢癌。她的項(xiàng)目的主要目的是使用針對(duì)癌癥相關(guān)抗原的抗體來(lái)增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞的巨噬細(xì)胞吞噬作用。作為其中的一部分，她一直在開(kāi)發(fā)方法來(lái)確定抗體結(jié)合的最佳條件，并評(píng)估不同條件下的吞噬作用，如圖 2 所示。CD14+ 單核細(xì)胞首先從外周血中分離出來(lái)，并在巨噬細(xì)胞出現(xiàn)之前培養(yǎng)了 5 到 7 天。然后用于吞噬作用測(cè)定。

圖 2：優(yōu)化用于研究卵巢癌免疫療法的吞噬作用檢測(cè)。比較非貼壁和貼壁靶標(biāo) OVCAR3（卵巢癌）細(xì)胞的分析優(yōu)化。圖像顯示 CD14+ 巨噬細(xì)胞標(biāo)記有 Cell Tracker Green（綠色），OVCAR3 細(xì)胞標(biāo)記有 Cell Trace Far Red（紅色）。用藍(lán)色箭頭標(biāo)記的吞噬作用事件。使用 Zeiss Axio Observer Z1 和 CoolLED pE-300lite 照明系統(tǒng)（“Tatties”）獲取的圖像。由艾倫·梅恩 (Ellen Main) 提供。

CoolLED pE-300life光源簡(jiǎn)介：

pE-300 lite是一種用于顯微鏡的簡(jiǎn)單白光 LED 照明器。它提供了廣泛的照明范圍，涵蓋了常見(jiàn)熒光團(tuán)的激發(fā)波段，例如 DAPI、CFP、Aqua、FITC、TRITC、TxRed、Cy5 等等。操作是通過(guò)遠(yuǎn)程手動(dòng)控制艙與即時(shí)開(kāi)/關(guān)和輻照度控制從 0-100%。一系列用于熒光成像，光遺傳學(xué)，電生理學(xué)和其他高速應(yīng)用的LED照明系統(tǒng)，適用于熒光成像，光遺傳學(xué)領(lǐng)域，電生理學(xué)領(lǐng)域和其他高速應(yīng)用的LED照明系統(tǒng)

LED光源的壽命更長(zhǎng)：傳統(tǒng)光源的亮度會(huì)隨著使用而降低，這意味著照明效果會(huì)隨著時(shí)間大打折扣。LED光源的壽命遠(yuǎn)遠(yuǎn)長(zhǎng)過(guò)傳統(tǒng)光源，且亮度在使用期間能夠保持基本恒定，為用戶(hù)提供穩(wěn)定、可重復(fù)的照明。

pE-300lite專(zhuān)為市面上主流的熒光顯微鏡而設(shè)計(jì)，裝置緊湊，價(jià)格實(shí)惠，適宜更多用途。

購(gòu)買(mǎi)方便：為日常的熒光團(tuán)研究提供照明，例如DAPI, FITC, TRIT和Cy5，符合常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室耗材預(yù)算。

安裝簡(jiǎn)便：可直接安裝至顯微鏡的落射熒光端口，簡(jiǎn)單調(diào)整后，便可優(yōu)化顯微鏡光源，一步到位。

使用簡(jiǎn)單：即時(shí)開(kāi)關(guān)，可通過(guò)桌面控制終端優(yōu)化亮度，減少樣本損傷。

pE-300lite：簡(jiǎn)單的白光——易于購(gòu)買(mǎi)、安裝和使用。