�?谔阋卟《綩型抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理與方法
瀏覽次數(shù):989 發(fā)布日期:2021-10-18
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檢測(cè)原理:
如果待檢樣品中含有口蹄疫病毒O型抗體,就會(huì)與包被板上的口蹄疫病毒O型重組抗原及第二步加入的抗牛二抗酶標(biāo)結(jié)合物特異性結(jié)合。間接結(jié)合在包被板上的抗牛二抗酶標(biāo)結(jié)合物與底物反應(yīng)的顯色狀況即可反映出樣品中是否含有保護(hù)水平的口蹄疫病毒O型抗體。
樣品要求:
1. 本試劑僅適用于檢測(cè)牛血清或血漿。
2. 為取得最佳實(shí)驗(yàn)效果,避免使用含疊氮鈉、高血脂、長(zhǎng)菌以及嚴(yán)重溶血的樣品;
3. 短期(3天內(nèi))將進(jìn)行檢測(cè)的血清樣品可存放于2~8℃;如需長(zhǎng)期保存,應(yīng)置于-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
檢測(cè)方法:
1. 洗滌液配制:用蒸餾水或去離子水將洗滌液10×(2號(hào)液)按1:10稀釋(例如,取100mL洗滌液10×,加900mL蒸餾水或去離子水混合),充分混勻即為工作濃度洗滌液。
2. 樣品稀釋及加樣:用樣品稀釋液(5號(hào)液)將待檢血清按1:100稀釋(如5μL血清+495μL樣品稀釋液),在樣品孔每孔僅加入已稀釋的待檢樣品100μL;如果采用血清稀釋板稀釋樣品,其使用方法詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)背面。
3. 加對(duì)照品:陰性、陽(yáng)性對(duì)照品不用稀釋,直接加樣。 陰性對(duì)照2孔,每孔僅加入100μL陰性對(duì)照品;陽(yáng)性對(duì)照2孔,每孔僅加入100μL陽(yáng)性對(duì)照品。蓋好封板膜,37℃避光
反應(yīng)30分鐘。
4. 洗板:甩去孔內(nèi)液體,每孔注滿工作濃度洗滌液洗滌3次,每次均需停留1分鐘;最后一次甩凈,拍干。
5. 加酶反應(yīng):每孔加酶標(biāo)結(jié)合物(1號(hào)液)50μL,蓋好封板膜,37℃避光反應(yīng)30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,如上洗板,拍干。
6. 顯色反應(yīng):按所需用量,臨用前取等體積底物液(3號(hào)液)和顯色液(4號(hào)液)充分混勻,每孔加100μL,蓋好封板膜,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
7. 終止反應(yīng): 加終止液(6號(hào)液)50μL,用酶標(biāo)儀雙波長(zhǎng)(450nm作為主波長(zhǎng),630nm作為參比波長(zhǎng))讀取OD值。