細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的日常,都是跟細(xì)胞培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇這些基本的操作密不可分的。在細(xì)胞凍存和復(fù)蘇領(lǐng)域一直奉行著一條黃金法則,那就是“慢凍快融”!實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。
慢凍細(xì)胞是很脆弱的,尤其是哺乳動(dòng)物細(xì)胞,只有一層薄薄的細(xì)胞膜,沒(méi)有堅(jiān)固的細(xì)胞壁保護(hù),在進(jìn)入凍存狀態(tài)前,緩慢的降溫過(guò)程有助于保存細(xì)胞的活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜(DMSO)作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。
快融細(xì)胞復(fù)蘇,是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細(xì)胞解凍之后重新培養(yǎng),細(xì)胞恢復(fù)生長(zhǎng)的過(guò)程。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成的損傷。
最常見(jiàn)的復(fù)蘇工具水作為一種使用廣泛的導(dǎo)熱介質(zhì),具有良好的導(dǎo)熱性,可以保證快速加熱,同時(shí)也可防止凍存管內(nèi)部的局部過(guò)熱。水浴是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)配置之一,在進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)時(shí),無(wú)需額外的輔助設(shè)備或試劑(IKA水浴產(chǎn)品可登陸 ika.com 官網(wǎng)了解)。然,水浴經(jīng)常是作為實(shí)驗(yàn)室共享的設(shè)備,若無(wú)專人值守,則水浴槽內(nèi)的水不會(huì)定期進(jìn)行更換,就會(huì)攜帶污染,會(huì)間接導(dǎo)致復(fù)蘇細(xì)胞的污染風(fēng)險(xiǎn)。復(fù)蘇過(guò)程,常伴隨著對(duì)凍存管的晃動(dòng)(晃動(dòng)可以防止管內(nèi)樣品產(chǎn)生溫度差異),管蓋處也有滲入水的可能。
復(fù)蘇細(xì)胞新方案為得到細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的一致結(jié)果,就要保證細(xì)胞復(fù)蘇的可重復(fù)性效果,就必須確保每次復(fù)蘇的條件一致(包括溫度、振動(dòng)幅度、細(xì)胞活力等)。在這樣的需求背景下,誕生了諸多用于此應(yīng)用的機(jī)器。Matrix 恒溫混勻儀,選配專門的凍存管適配加熱模塊,即可實(shí)現(xiàn)高效、可重復(fù)性的細(xì)胞復(fù)蘇結(jié)果!
顏值在線
Matrix Orbital Delta Plus高低溫混勻儀,搭配Cryo attachment(24 位凍存管配件,兼容1.5-2.0ml凍存管),可同時(shí)對(duì)多達(dá)24個(gè)凍存管進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇操作,適用于多種細(xì)胞類型,且具有與傳統(tǒng)方法(如水。┑韧膹(fù)蘇效率。儀器自帶編程功能,用戶可進(jìn)行個(gè)性化編輯,預(yù)存儲(chǔ)特定細(xì)胞的復(fù)蘇溫度、混勻速度、反應(yīng)時(shí)間等參數(shù),利于不同細(xì)胞處理時(shí)的程序調(diào)用,方便快速。
為防止冷凝,確保體系內(nèi)的試劑樣本無(wú)損失,高溫反應(yīng)時(shí)還可以選配熱蓋:
具備模塊自檢功能,根據(jù)模塊自動(dòng)限定最大運(yùn)行速度,多達(dá)13 種模塊可按需選配。
溫度范圍:RT-15°C 至 100°C
轉(zhuǎn)速范圍:0 / 300(可調(diào)節(jié)最小轉(zhuǎn)速) – 3,000 rpm(由模塊決定)
程序控溫:包括Ramp模式,即斜率控溫,允許自動(dòng)執(zhí)行混合、加熱和冷卻任務(wù)
加熱速率:6°C/分鐘
冷卻速率: 2.5°C/分鐘
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