首先，需要下載一個(gè)最新版的curve Exert1.4軟件

準(zhǔn)備就緒！�。￠_始我們的教（biao）學(xué)(yan)

1．啟動(dòng)“Curve Expert1.4”。

2．X軸輸入所對(duì)應(yīng)的濃度值，Y軸輸入標(biāo)準(zhǔn)品的OD值。如圖↓
 

3．單擊[運(yùn)行]按鈕，出現(xiàn)如下對(duì)話框。
 

4．單擊[ok]按鈕，出現(xiàn)如下兩個(gè)對(duì)話框，關(guān)閉下面一個(gè)對(duì)話框。
 

5.在對(duì)話框的右上角出現(xiàn)一些曲線的名稱，從“1”開始依次點(diǎn)擊曲線名稱，在右下角會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)擬合的曲線。
 

6.根據(jù)擬合的曲線選取ELISA擬合度最佳的曲線雙擊，出現(xiàn)如下對(duì)話框。
 

　　注意：選擇系數(shù)（即“r”值）最好的曲線方程來進(jìn)行運(yùn)算。在上面的對(duì)話框右上角有“r”值，當(dāng)“r”值越接近1，擬合度越好。

7．按[Ctrl]鍵+[L]鍵或者右鍵單擊選擇[analyze]，出現(xiàn)如下對(duì)話框。
 

8．Y軸輸入對(duì)應(yīng)的樣本OD值，單擊[Calculate]按忸，即可得到待測蛋白的實(shí)際含量。
 

9.如果出現(xiàn),可以調(diào)節(jié)相應(yīng)的值，即根據(jù)預(yù)測的X結(jié)果，選擇附近的數(shù)值即可。
 

　注意：標(biāo)本稀釋了N倍，運(yùn)算出的數(shù)值應(yīng)再乘以N

10.如想得到ELISA擬合曲線的方程，可在步驟6的對(duì)話框空白處右擊，選擇”Information”，得到如下對(duì)話框：點(diǎn)擊“Copy”。
 

11.在你需要的位置粘貼即可得到如下數(shù)據(jù)：

MMF Model:y=(a*b+c*x^d)/(b+x^d)

Coefficient Data:

a=5.02803575349E-002

b=3.54849086120E+002

c=2.67845070065E+000

d=1.19812203348E+000