T淋巴細(xì)胞是一種重要的免疫活性細(xì)胞，由一群功能不同的異質(zhì)性淋巴細(xì)胞組成，在胸腺內(nèi)分化成熟，在整個(gè)免疫應(yīng)答中處于中心環(huán)節(jié)。在T細(xì)胞發(fā)育不同階段，其細(xì)胞膜分子表達(dá)的種類和數(shù)量均不相同。譬如，初始T細(xì)胞胞體小，細(xì)胞質(zhì)少，表達(dá)CD45RA、CCR7、CD62L、CD127和CD132等，但不表達(dá)一些活化相關(guān)的標(biāo)志物，例如CD25（晚期）、CD44、CD69、CD45RO或HLA-DR（較晚期）。因此T淋巴細(xì)胞在活化的不同階段細(xì)胞表面會(huì)表達(dá)不同的活化分子，它們是檢測(cè)T淋巴細(xì)胞是否被有效誘導(dǎo)活化的標(biāo)準(zhǔn)。

 

 

1、細(xì)胞毒T細(xì)胞（cytotoxic T cell）：消滅受感染的細(xì)胞。這些細(xì)胞的功能就像一個(gè)“殺手”或細(xì)胞毒素，因?yàn)樗鼈兛梢詫?duì)產(chǎn)生特殊抗原反應(yīng)的目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行殺滅。細(xì)胞毒T細(xì)胞的主要表面標(biāo)志是CD8，也被稱為殺手T細(xì)胞。

 

2、輔助T細(xì)胞（helper T cell）在免疫反應(yīng)中扮演中間過(guò)程的角色：它可以增生擴(kuò)散來(lái)激活其它類型的產(chǎn)生直接免疫反應(yīng)的免疫細(xì)胞。輔助T細(xì)胞的主要表面標(biāo)志是CD4。 T細(xì)胞調(diào)控或“輔助”其它淋巴細(xì)胞發(fā)揮功能。

 

3、調(diào)節(jié)/抑制T細(xì)胞（regulatory/suppressor T cell）：負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)。通常起著維持自身耐受和避免免疫反應(yīng)過(guò)度損傷機(jī)體的重要作用。調(diào)節(jié)/抑制T細(xì)胞有很多種，目前研究最活躍的是CD25+ CD4+ T細(xì)胞。

 

4、記憶T細(xì)胞 (memory T cell)：在再次免疫應(yīng)答中起重要作用。記憶T細(xì)胞由于暫時(shí)沒有非常特異的表面標(biāo)志。

 

由此可知，T細(xì)胞及其亞群可以根據(jù)細(xì)胞表面表達(dá)的不同標(biāo)志物而區(qū)分，如CD3，CD4，CD8和CD25等。使用這些結(jié)合了熒光的抗體直接標(biāo)記這些標(biāo)志物之后，多色流式分析技術(shù)就可以幫助研究者對(duì)單個(gè)細(xì)胞同時(shí)進(jìn)行多個(gè)標(biāo)志物的測(cè)量，而這可以提供特定樣品關(guān)于細(xì)胞系以及細(xì)胞亞群分化階段的信息。

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結(jié)果分析——新冠病毒患者外周血樣本分析：

 

 

COVID-19患者中免疫細(xì)胞頻率動(dòng)力學(xué)的事例。

 

上圖設(shè)門分析用于鑒定患者外周血中活化的細(xì)胞毒性CD8 + T淋巴細(xì)胞。下圖顯示了患者住院期間幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)得的細(xì)胞頻率（占T細(xì)胞的百分比）。

 

流式細(xì)胞術(shù)表型分析策略，用于鑒定正常人外周血中活化的T細(xì)胞。

 

1.單重態(tài)細(xì)胞

2.白細(xì)胞

3.淋巴細(xì)胞

4.CD3 + T淋巴細(xì)胞

5.CD4 +與CD8 + T淋巴細(xì)胞

 

下中部：活化的CD8 +細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞

 

右下：循環(huán)的濾泡輔助性T淋巴細(xì)胞

右上：激活的CD4 +輔助/誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞

 

COVID-19患者中免疫細(xì)胞頻率動(dòng)力學(xué)的示例。

 

上圖設(shè)門分析用于鑒定患者外周血中活化的輔助/誘導(dǎo)劑CD4 + T淋巴細(xì)胞。

 

下圖顯示了患者住院期間幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)得的細(xì)胞頻率（占T細(xì)胞的百分比）。

 

需要住院的COVID-19患者中免疫細(xì)胞頻率動(dòng)力學(xué)的示例。

 

上圖顯示了用于識(shí)別患者外周血中循環(huán)性T輔助濾泡細(xì)胞的設(shè)門策略。

 

下圖顯示了患者住院期間幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)得的細(xì)胞頻率（占T細(xì)胞的百分比）。

 

 

使用ED7705 活性T細(xì)胞篩選試劑盒在正常人外周血中對(duì)活化的細(xì)胞毒性CD8 + T淋巴細(xì)胞（左），活化的輔助/誘導(dǎo)性CD4 + T淋巴細(xì)胞（中）和循環(huán)T輔助濾泡細(xì)胞（右）進(jìn)行流式細(xì)胞儀表面染色。 圖顯示了每種細(xì)胞亞群的頻率（占T細(xì)胞的百分比）。

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