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詳解動物行為學之學習記憶研究方法

瀏覽次數(shù):1128 發(fā)布日期:2020-12-29  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
學習記憶是人和動物與生俱來的能力,記憶是學習的認知側(cè)面,二者不可分割,學習產(chǎn)生新的記憶,記憶承載學習過程。

學習記憶功能異常是絕大多數(shù)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的臨床特征,如阿爾茨海默癥,帕金森病,癲癇,精神分裂,腦癱,腦卒中等。

我們一般把記憶分為短期記憶和長期記憶。而根據(jù)記憶機能系統(tǒng)不同,可分為參考記憶、工作記憶、恐懼記憶等;根據(jù)內(nèi)容不同,可分為情景記憶、情緒記憶、動作記憶、邏輯記憶等,相關行為學就是由此為原理而產(chǎn)生。

1948年,心理學家愛德華·托爾曼第一個嘗試研究空間內(nèi)老鼠的行為。他把饑餓的老鼠放在迷宮的入口處,迷宮出口處提供食物。托爾曼觀察到動物的錯誤率隨著訓練次數(shù)增加而降低。隨著神經(jīng)科學的快速發(fā)展,行為學已經(jīng)是必不可少的研究手段,常見的學習記憶動物行為學方法如下:
 
1.T/Y迷宮
 
依據(jù)動物天生的探索習性(傾向于每次探索未探索方向),檢測動物在T型/Y型迷宮中不同臂的探索情況,結合行為學記錄分析軟件,可以分析運動速度,穿梭次數(shù),繪制運動軌跡等。相關的實驗范式很多,有加入食物獎勵的,也有加入氣味/聲音作為cue, 也有加入delay延遲期的,適用于工作記憶,參考記憶檢測。
 

Y迷宮/Y-maze
 
 
T迷宮/T-maze
 
SMART3.0行為學分析系統(tǒng)/Panlab SMART 3.0
 
2.八臂迷宮/Barnes迷宮
 
放射性八臂迷宮,不同臂的方向可粘貼不同形狀的圖案提示,每個臂的盡頭有食物裝置,食物隨機放置,或者將食物與相應圖案對應起來,根據(jù)動物本能探索和取食的策略,記錄動物進入每個臂的次數(shù)、時間、正確次數(shù)、錯誤次數(shù)、路線等參數(shù)可以反應空間記憶能力
 
Barnes迷宮由周邊布滿孔洞的圓形平臺構成,在其中一個洞的底部放置盒子作為動物的躲避場所,可使用光,噪音,風等刺激作為動物找到躲避洞口的動機。實驗時將動物放在平臺中央,記錄動物找到目標洞口的時間,進入錯誤洞口的次數(shù)反應參考記憶,也可以記錄重復進入錯誤洞口的次數(shù)反應工作記憶。
 
 

3.水迷宮
 
水迷宮由恒溫圓形水池,隱藏在水面下的目標平臺和水池正上方的視頻采集系統(tǒng)組成,嚙齒類動物雖然善于游泳,但是它們比較厭惡長期處于水環(huán)境中,會本能性的尋找水中的休息場所。水迷宮實驗記錄動物在規(guī)定時間內(nèi)尋找平臺的情況,結合行為學記錄系統(tǒng),可以分析小鼠每次找到平臺所花的時間,游泳速度,不同象限的穿梭次數(shù),活動軌跡等,適用于空間記憶和工作記憶檢測。
 
 
 水迷宮/Morris water maze(圖片來源參考文獻)
 
4.新物體識別
 
將動物在兩個或者更多的物體周邊停留一段時間進行熟悉,然后用一個新物體代替原來的物體。如果記憶正常,小鼠會花費更長時間去探索新物體;如果探索兩種物體花費的時間相同,就可以被視為記憶缺失。
 

新物體識別實驗范式/Novel Object Recognition
 
5.主動回避/被動回避實驗
 
前者要求動物主動從厭惡刺激的環(huán)境中逃離,后者要求動物克制自己不進入有惡性刺激的環(huán)境。二者原理都是利用動物的好暗避光(明暗穿梭),對厭惡刺激(例如足底刺激)的恐懼等相關的記憶而建立。
 
(圖片來源參考文獻)
 
主動回避
主動回避常用穿梭箱/跑道回避,穿梭箱箱體的一側(cè)有聲音/光聯(lián)系的電擊刺激,另外一側(cè)為安全區(qū)域,當動物進入刺激側(cè)時給與電擊,讓動物形成刺激條件和環(huán)境的關聯(lián),可根據(jù)小鼠再次進入刺激環(huán)境的逃避情況測試記憶保持能力。跑道回避,動物需要穿過固定的斜坡,在規(guī)定時間內(nèi)到達安全區(qū)就可以避免受到電刺激。實驗主要觀察記錄動物在訓練不同天中到達安全區(qū)的時間,逃避的速度,及錯誤次數(shù)(未能及時到達安全區(qū))。研究人員認為主動回避實驗主要反應動物的非陳述記憶的能力。
 

穿梭箱/Shuttle box
 
被動回避(跳臺實驗、爬桿實驗)
跳臺實驗由底部可通電的反應箱和中心安全平臺組成,當箱子底部通電,小鼠會躲避電擊跳到平臺上,訓練階段結束后隔一段時間對動物進行測試,記錄第一次跳下的時間(潛伏期),電擊次數(shù),錯誤次數(shù)等可以動物空間記憶和記憶保持能力。爬桿實驗和跳臺實驗相似,只是平臺換成了質(zhì)地堅硬的爬桿。
 
 
 
6.條件性恐懼實驗
 

(圖片來源參考文獻)
 
用于嚙齒類動物(大小鼠)環(huán)境相關的條件性恐懼記憶的研究。嚙齒類動物在恐懼時會表現(xiàn)出特有的僵直狀態(tài)(Freezing),這種狀態(tài)下的動物會傾向于保持靜止不動的防御姿勢。在實驗過程中,給予聲音信號(條件刺激)后給予電(非條件)刺激,訓練結束后進行聲音信號或者環(huán)境聯(lián)系實驗。一般情況下嚙齒動物在相應的環(huán)境和不同環(huán)境下相同的聲音信號都會出現(xiàn)明顯的Freezing反應,測試也可以在訓練結束后立即或者幾天后檢測,可以反應條件信號下的長期/短期恐懼記憶的保持消退情況。
 

震驚/條件恐懼聯(lián)合測試系統(tǒng)
Panlab Startle and Fear combined system
 
7.操作性條件反射測試箱
 
用于研究操作性條件反射的典型儀器,不同的實驗模式可以檢測動物獎賞,學習記憶,成癮等,并且可以細致分析動物注意力,動機,決策等相關參數(shù)。相對于一般的迷宮類實驗,操作箱關聯(lián)更高級的認知行為,更能反應不同腦區(qū)之間的相互聯(lián)系,在神經(jīng)環(huán)路研究上更具有優(yōu)勢。

Lafayette操作箱由可定制化的箱體,實驗模塊(壓桿,觸鼻,液體獎賞,固體顆粒獎賞,噪音,燈光,觸屏等),靈活化的編程軟件控制系統(tǒng)組成。箱體可根據(jù)不同實驗動物進行定制,包括大小鼠,鳥類,豬,靈長類等,同時箱體支持與外部設備聯(lián)合應用,如電生理,光纖記錄,鈣成像,自主給藥,視頻拍攝等。研究人員可根據(jù)實驗設計選擇帶有觸屏操作模塊,更好的研究視覺相關的學習記憶;或者楔形實驗箱體,更有利于嚙齒類動物學習訓練任務。

 
 模塊化條件行為操作箱
Modular Operant Chamber
 
以上就是常見的學習記憶動物行為學方法介紹!
 
參考文獻:
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Maei HR, Zaslavsky K, Wang AH, Yiu AP, Teixeira CM, Josselyn SA, Frankland PW.Development and validation of a sensitive entropy-based measure for the water maze. Frontiers in Integrative Neurosciences 3, 33, 2009.
Sunita Sharma, Sharlene Rakoczy, Holly Brown-Borg. Assessment of spatial memory in mice. Life Sciences 87(1),521-536,2010.
Zlomuzica A, Ruocco LA, Sadile AG, Huston JP, Dere E. Histamine H1 receptor knockout mice exhibit impaired spatial memory in the eight-arm radial maze. British Journal of Pharmacology 157 (1), 86–91, 2009.
Baker M. Animal Models: Inside The Minds Of Mice And Men. Nature 475(7354),123-8,2011.
 
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