產(chǎn)品名稱：11鴨肝炎病毒1型PCR檢測試劑盒
英文名稱：Duck Hepatitis Virus 1(DHV1)1RTPCR
編號：YS30941-R

需要自備的器材：
1．11鴨肝炎病毒1型PCR檢測試劑盒儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 專用反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn):
1.11鴨肝炎病毒1型PCR檢測試劑盒反應(yīng)時(shí)間最短為16分鐘,是目前反應(yīng)時(shí)間最短的鱟試劑。
2.不依賴凝固蛋白形成凝膠,抗干擾能力強(qiáng),特別適用于生物制品(蛋白、疫苗等)的內(nèi)毒素檢測。
3.不需要特殊的檢測儀器就能準(zhǔn)確定量。
4.配套偶氮化染色劑,可以避開有色檢品自身顏色對鱟實(shí)驗(yàn)的干擾。
組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
11鴨肝炎病毒1型PCR檢測試劑盒技術(shù)特點(diǎn)：
1準(zhǔn)確可靠，臨床雙盲對照試驗(yàn)＞1000例，結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對，結(jié)果一致性大于99%。
2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速：整個(gè)檢測流程只需3小時(shí)。
4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需完全配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對，在延伸中產(chǎn)生熒光。使用及效果:
在無內(nèi)毒素試管中,加入100 uL細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液,或待測樣品。再加入100 uL鱟試劑溶液,混勻,37ºC溫育T1分鐘。溫育結(jié)束,加入100 uL顯色基質(zhì)溶液,混勻,37ºC溫育T2分鐘。溫育結(jié)束,加入500 uL偶氮化試劑1溶液,混勻,加入500uL偶氮化試劑2溶液,混勻加入500 uL偶氮化試劑3溶液,混勻,靜置5分鐘,于545nm波長處讀取吸光度值。
內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)范圍(EU/mL)為0.01-0.1,T1為60分鐘,T2為6分鐘；內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)范圍(EU/mL)為0.1-1,T1為10分鐘,T2為6分鐘。
運(yùn)輸及保存:
常溫運(yùn)輸,4℃避光保存,有效期年。