鋅離子熒光染料探針的應(yīng)用
瀏覽次數(shù):996 發(fā)布日期:2020-7-2
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鋅離子在許多生理和病理過程中都起到至關(guān)重要的作用,因此對鋅離子進(jìn)行探測和識(shí)別有重要理論和實(shí)際意義。熒光探針因其設(shè)計(jì)簡單、易于操作、靈敏度高、可細(xì)胞成像等諸多優(yōu)點(diǎn)而廣泛應(yīng)用于鋅離子的識(shí)別研究。
鋅是生物中含量第二高的過渡金屬(僅次于鐵), 大腦中大多數(shù)Zn
2+緊密結(jié)合,因此細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)的游離Zn
2+水平可能為pmol級(jí),但一部分谷氨酸能神經(jīng)元在突觸前按鈕中具有弱結(jié)合的鋅,這部分的鋅會(huì)以u mol水平釋放,從而響應(yīng)各種刺激,在大多數(shù)細(xì)胞中,游離Zn
2+的細(xì)胞內(nèi)濃度極低(<1 nM),其余的則與蛋白質(zhì)或核酸結(jié)合。
越來越多的證據(jù)表明,鋅在細(xì)胞生物學(xué)中具有多種作用,作為金屬酶催化位點(diǎn)的一部分,作為基因調(diào)節(jié)蛋白的結(jié)構(gòu)成分,以及作為自由信號(hào)離子,特別是在大腦皮層中, 這在基因表達(dá)的調(diào)節(jié)中特別重要,因?yàn)閆n
2+結(jié)合蛋白占人類基因組中轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白的近50%。Zn
2+在胰腺胰島素分泌中也具有功能活性,同時(shí)也是包括癲癇病和阿爾茨海默氏病在內(nèi)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病的一個(gè)促成因素, 氧化應(yīng)激期間,金屬蛋白復(fù)合物中會(huì)釋放出游離的Zn
2 +。
在了解了鋅的多種作用后,下面我們來看看熒光Zn
2+指示劑系統(tǒng),該系統(tǒng)可使用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)對細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外的鋅通量和水平上的寬濃度范圍內(nèi)的鋅通量和水平進(jìn)行定量測定及成像。目前,我們提供經(jīng)典的TSQ,zinquin以及我們新開發(fā)的靈敏的Metal Fluor™Zn 520,以幫助闡明胞內(nèi)Zn
2+釋放的作用以及游離或可螯合Zn
2+在細(xì)胞中的定位。
鋅指標(biāo)選擇指南
|
TSQ |
Zinquin, AM |
Metal Fluor™ Zn 520 AM |
Metal Fluor™ Zn 520 K+ |
檢測原理 |
指示劑對鋅的飽和水平作出反應(yīng),熒光發(fā)射隨鋅離子濃度顯著增加 |
Ex/Em (nm) |
344/385 |
360/480 |
490/514 |
490/514 |
濾光片 |
DAPI |
FITC |
滲透性 |
可滲透 |
可滲透 |
可滲透 |
不可滲透 |
染料加載 |
加載到細(xì)胞培養(yǎng)基中 |
通過顯微注射,貼片移液器或松果體加載劑加載 |
規(guī)格 |
5 mg |
1 mg |
1 mg |
1 mg |
貨號(hào) |
21254 |
21261 |
21263 |
21262 |
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