1. 基因槍轉(zhuǎn)化法對(duì)受體有啥要求？
基因槍對(duì)動(dòng)物：任何可暴露于基因槍口外的組織（皮膚、器官）細(xì)胞、外植體和器官培養(yǎng)；

植物：田間和溫室使用、植物培養(yǎng)細(xì)胞和外植體；
酵母、細(xì)菌、其它微生物細(xì)胞器、葉綠體、線粒體；
受體廣泛。

2. 基因槍（顆粒轟擊法）相比傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)化那些優(yōu)勢(shì)？
簡單快速功能靈活，各類細(xì)胞類型通用
只需要少量的DNA和細(xì)胞
能進(jìn)行多質(zhì)粒共同導(dǎo)入
能輸送大片段DNA
沒有無光的基因或蛋白被轉(zhuǎn)導(dǎo)

3. 基因槍都應(yīng)用哪些方面比較多？
基因表達(dá)研究、基因治療、遺傳免疫、神經(jīng)細(xì)胞染料標(biāo)記、遺傳育種

4. 基因槍轉(zhuǎn)化過程中氣源對(duì)人體是否有傷害？
基因槍轉(zhuǎn)化過程中使用的氣源一般是純度比較高的氮?dú)饣蛘吆�氣，氮�(dú)庹伎諝獾?4% 完全無害= = 氦氣稀有氣體，比氮?dú)飧�穩(wěn)定，不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)（除了物理方法）

5. 作為轉(zhuǎn)化的動(dòng)力源氮?dú)夂秃�氣哪個(gè)更好？
氫氣易燃易爆 氧氣助燃且可能影響宿主 ，氦氣是惰性氣體，動(dòng)力強(qiáng)勁較適合用于轉(zhuǎn)基因
另外氮?dú)庖部梢缘摹?br />
6. 基因槍法可以得到永久轉(zhuǎn)基因植株嗎？
基因槍法注入基因后，該植物原則上一直都是轉(zhuǎn)基因植物，無性繁殖的后代也一直是轉(zhuǎn)基因植物，而其種子繁殖的下一代則不一定，有可能種子繁殖的下一代含有目標(biāo)基因，也可能沒有。

7. 影響基因槍轉(zhuǎn)化的因素？
首先是氣源的壓力大小，以及射擊距離，實(shí)驗(yàn)證明轟擊次數(shù)太多也會(huì)造成對(duì)細(xì)胞的傷害，因此一般以2-3次為宜。

8. 子彈制備過程中標(biāo)配的金粉一瓶能打多少次？
一瓶標(biāo)配的金粉是250mg，每槍金粉含量為0.5mg，理論值是可以打500槍左右

9. 子彈制備過程中標(biāo)配的亞精胺，CaCl₂ 都什么品牌的比較好？
亞精胺選擇sigama的就行，CaCl₂   選擇國藥的就行

10. 子彈制備過程中需要準(zhǔn)確稱取金粉嗎？這么小的重量如何保證準(zhǔn)確性？
在沉淀的金粉中加入4ml 50%的甘油或者超純水制作成母液，這樣100μl懸浮液于離心管中（此管可打12槍，根據(jù)實(shí)驗(yàn)樣品多少預(yù)先分幾個(gè)小管），根據(jù)實(shí)際需求取液體，這樣保證了重量的準(zhǔn)確性

11. 子彈制備過程中金粉如何滅菌？
制作成的母液直接全自動(dòng)高壓滅菌鍋滅菌即可，千萬注意沖蓋，以免造成損失

12. 子彈制備過程中金粉母液如何保存？
制作成的母液直接4度冰箱保存即可，最多可以存放2年左右

13. 基因槍轉(zhuǎn)化的效率大概為多少？瞬時(shí)表達(dá)需要打多少槍才可能出效果？
遺傳育種的轉(zhuǎn)化效率大概是10^-3，瞬時(shí)表達(dá)大概每個(gè)樣品打2-3槍，每個(gè)樣品打三個(gè)重復(fù)即可

14. 制作好的母液，再下次取的時(shí)候怎么保證均勻？
直接旋渦振蕩器，然后超聲波清洗機(jī)，這樣再取母液之前樣品均一，保證了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

15. 載體DNA純度越高，轉(zhuǎn)化效果越好，如何保證濃度呢？
DNA純度越高，轉(zhuǎn)化效果越好，但轉(zhuǎn)化頻率并不與DNA的濃度成正比，相反，DNA的終濃度過高會(huì)與微彈形成大的凝結(jié)，反而降低了轉(zhuǎn)化頻率，目前普遍采用DNA 濃度為1μg/μl，但是一般試劑盒提取濃度為400ng/ul左右，因此要么選擇濃縮，要么選擇手提為宜。

16. 手提基因槍和臺(tái)式基因槍應(yīng)用范圍有啥區(qū)別？
手提基因槍主要應(yīng)用于活體或者戶外植物以及需要貼壁轟擊的受體，臺(tái)式主要適用于組織，或者外植體以及細(xì)胞器、葉綠體、線粒體。原理沒有啥區(qū)別主要是受體選擇上，原則上可以通用

17. 金粉或者鎢粉一般選用直徑是多少？
金粉或鎢粉.(植物細(xì)胞選用1.0μm，大部分動(dòng)物細(xì)胞用1.6-1.7μm，微生物一般用0.6μm)。鎢粉是可以進(jìn)行試驗(yàn)的，只是要在3-4天內(nèi)用完制作好的子彈，容易氧化抱團(tuán)。

18. 子彈制備儀的作用？
子彈制備儀其實(shí)是一個(gè)自動(dòng)旋轉(zhuǎn)的吹氣裝置，主要作用是把液體里面的金粉均勻鋪蓋在子彈管上面，如果需要制作大量子彈時(shí)候，子彈制備儀的優(yōu)勢(shì)就出來了

19. 子彈制備儀試用注意事項(xiàng)是什么？
子彈制備儀最大的注意事項(xiàng)就是在吹氣之前，鋼瓶的壓力要調(diào)到0.1MPa以下，太大了容易爆破子彈制備儀的軟管。

20. 如果做瞬時(shí)表達(dá)只需要做幾個(gè)子彈怎么辦？
選擇手動(dòng)制作，直接用移液器加樣與子彈槍孔中，360度旋轉(zhuǎn)加入，防止流出，然后樹立與超凈臺(tái)中，打開最小檔位的風(fēng)吹5分鐘左右，具體時(shí)間看金粉掛壁情況。