β‑瓊膠酶因的制備方法步驟
瀏覽次數(shù):166 發(fā)布日期:2020-3-24
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1.一種β-瓊膠酶,其氨基酸序列如序列表中SEQIDNO:1所示。2.一種β-瓊膠酶基因,編碼權(quán)利要求1所述的β-瓊膠酶,其核苷酸序列如序列表中SEQIDNO:2所示。3.權(quán)利要求2所述β-瓊膠酶基因的制備方法,包括以下步驟:以檸檬假交替單胞菌PseudoalteromonascitreaYTW1-15-1的基因組DNA為模板,在上游引物、下游引物的作用下進(jìn)行PCR反應(yīng);PCR反應(yīng)結(jié)束后,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳,切膠回收產(chǎn)物,即得到所述的β-瓊膠酶基因。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于:所述的上游引物為5’-CGCGGATCCGCAGATTGGGACGCATATAG-3’,所述的下游引物為5’-CCGCTCGAGTTAGTTTGCTTTGTAAACACG-3’。5.一種β-瓊膠酶基因重組載體,由權(quán)利要求2所述的β-瓊膠酶基因與表達(dá)載體pET28a(+)構(gòu)建而成。6.權(quán)利要求5所述β-瓊膠酶基因重組載體的制備方法,包括以下步驟:1)取權(quán)利要求2所述的β-瓊膠酶基因與pMD19T載體連接,構(gòu)建β-瓊膠酶基因克隆載...
技術(shù)保護(hù)點(diǎn)
一種β‑瓊膠酶,其氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。
一種β‑瓊膠酶及其編碼基因和應(yīng)用,所述β‑瓊膠酶的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,所述β‑瓊膠酶的編碼基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)所述的β‑瓊膠酶,具有良好的熱穩(wěn)定性和酶活性,能夠特異性降解瓊脂糖,產(chǎn)生單一的終產(chǎn)物新瓊四糖,為瓊膠寡糖的制備提供了新的酶源。