在進行生物技術(shù)藥物研發(fā)時，使用免疫原性檢測技術(shù)快速、可靠地預測生物技術(shù)藥物在體內(nèi)的免疫原性對于開發(fā)新的蛋白治療藥物如疫苗具有非常重要的意義。進行抗病毒疫苗研發(fā)時，判斷某種疫苗是否具有免疫效果，體現(xiàn)在免疫機體后能否產(chǎn)生足夠的中和抗體。對于一些致病性和傳染性很強的病毒，操作活菌面臨著危險性高、周期長、實驗條件要求比較苛刻和對實驗室要求嚴格和等情況。此時，假病毒技術(shù)是一種非常有效的研究手段。

在對病毒進行研究的過程中，準確評價病毒感染后體內(nèi)中和抗體反應不僅對確診具有重要價值，而且對研究免疫保護相關(guān)性較為重要。中和抗體也是病毒消除、疾病預后以及疫苗效果評價的重要指標。關(guān)于中和抗體的解釋，網(wǎng)上有資料報道中和抗體是由適應性免疫應答細胞分泌的一種可溶性蛋白, 能夠與病原體表面的抗原結(jié)合。病毒入侵人體后，免疫細胞把中和抗體分泌到血液中，后者與血液里的病毒顆粒結(jié)合，從而阻止病毒黏附靶細胞受體，這樣病毒就被「中和」掉了。

由于 HPV 難以在體外大量培養(yǎng),目前 HPV 中和抗體檢測方法主要是依賴于假病毒的檢測。世界衛(wèi)生組織(WHO)在其 HPV 疫苗指南中指出中和抗體是評價 HPV 預防性疫苗免疫保護效果的金標準。與傳統(tǒng)的免疫原性檢測方法ELISA相比，假病毒體外中和試驗和ELISA方法的檢測結(jié)果具有相關(guān)性。如有研究者比較了兩種重組人乳頭瘤狀病毒52型(HPV52)免疫原性檢測方法的相關(guān)性，分別采用假病毒體外中和試驗(pseudovirus based neutralization assay,PBNA)及酶聯(lián)免疫吸試驗(ELISA)檢測免疫后小鼠血清中HPV52型中和抗體滴度,比較兩種檢測方法的相關(guān)性^[1]。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)采用PBNA法檢測的HPV52型中和抗體滴度與ELISA法檢測的抗體滴度具有較高的相關(guān)性。

抗體滴度用來衡量某種抗體（antibody)識別特定抗原決定部位(epitope)所需要的最低濃度（也即最大稀釋度)。一般表示為仍能產(chǎn)生陽性結(jié)果的最大稀釋度。通常通過ELISA方法來檢測抗體滴度。在HPV預防性疫苗臨床試驗中用于抗體滴度檢測的方法主要有直接ELISA法、單表位競爭ELISA法和假病毒法等。直接ELISA法具有檢測方法簡便、適于進行高通量檢測的優(yōu)點。美迪西提供免疫原性檢測服務，主要使用小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬、非人靈長類動物做免疫原性毒性試驗。

假病毒技術(shù)是近幾年興起的一種研究基礎病毒學的新型手段，假病毒是指一種反轉(zhuǎn)錄病毒，能夠整合另外一種不同種類病毒的包膜糖蛋白，從而形成具有外源性病毒的包膜，而基因組保持著反轉(zhuǎn)爿乏病毒本身基因組特性的病毒.目前國內(nèi)外已經(jīng)建立了多種假病毒體系，如HIV、SARS和HCV等，被廣泛應用于研究病毒與宿主細胞的相互關(guān)系、鑒定病毒受體、測定患者體內(nèi)中和抗體的效價等諸多方面. 假病毒技術(shù)被廣泛應用于中和抗體效價的評價以及抗病毒藥物的篩選中。

假病毒體外中和試驗在疫苗研發(fā)中的應用有很多如有研究者通過構(gòu)建SARS假病毒而建立一套完整的SARS體外中和試驗檢測體系,還有研究者對人乳頭瘤病毒假病毒中和抗體檢測方法在疫苗臨床樣本檢測中的應用進行驗證，發(fā)現(xiàn)HPV 假病毒中和抗體檢測方法具有較好的特異性、準確性、精密度和耐用性,可以應用于 HPV 疫苗臨床血清樣本的免疫原性評價。也有研究者構(gòu)建了H5N1 AIV假病毒，為評價血清的中和活性以及進一步篩選單克隆中和抗體搭建了高效、安全的基礎平臺。

然而假病毒法存在檢測周期長，影響因素很多等問題，因此要將其應用于臨床試驗中需要對其進行充分的方法學驗證，以保證檢測結(jié)果的準確、可靠。

[1] 兩種重組人乳頭瘤病毒52型免疫原性檢測方法相關(guān)性的比較[J].