豌豆胰蛋白酶抑制因子(STI)elisa試劑盒
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。 以下文字為產(chǎn)品簡介,詳情以說明書為準(zhǔn),植物總氨基酸(T-AA)ELISA試劑盒 植物總氨基酸(T-AA)ELISA試劑盒 使用目的 適用于檢測人動植物組織勻漿、細(xì)胞上清、血清、血漿、尿液或其他相關(guān)生物液體中濃度。 檢測原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被抗體的微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
試劑盒規(guī)格及配置
自備物品 ①.酶標(biāo)儀(450nm) ②.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL ③.37℃恒溫箱 操作步驟 ①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 ②.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL; ③.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。 ④.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 ⑤.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次 (也可用洗板機(jī)洗板)。 ⑥.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 ⑦.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。 結(jié)果判斷 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。 |