一、枯草芽孢桿菌相關(guān)
 
在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，微生態(tài)環(huán)境起著養(yǎng)殖生物排泄物及殘餌的分解、轉(zhuǎn)化、水質(zhì)因子的調(diào)節(jié)與穩(wěn)定等作用。它的正常與否決定著水質(zhì)的優(yōu)劣，進(jìn)而影響?zhàn)B殖生物能否健康成長(zhǎng)。我國(guó)的水產(chǎn)養(yǎng)殖多以靜水為主，池塘老化嚴(yán)重，自凈與調(diào)節(jié)能力較差，這是預(yù)防病害的關(guān)鍵。目前，相對(duì)于物理和化學(xué)方法，應(yīng)用微生物治理養(yǎng)殖水體已成為新興的熱點(diǎn)。枯草芽孢桿菌分解、轉(zhuǎn)化和適應(yīng)能力強(qiáng)，對(duì)養(yǎng)殖生物和人體無(wú)害，因而目前被大量的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中。
 
⒈枯草芽孢桿菌的特性
 
枯草芽孢桿菌呈直桿狀，單個(gè)，無(wú)莢膜，能運(yùn)動(dòng)，革蘭陽(yáng)性菌（凡是購(gòu)買自行繁育的菌體不具備這些特征，則有可能非枯草芽孢桿菌，謹(jǐn)慎在水產(chǎn)養(yǎng)殖上使用，其中蠟樣芽胞桿菌不適用于蝦類養(yǎng)殖[很多產(chǎn)品混淆視聽(tīng)，簡(jiǎn)單寫芽孢桿菌]），是我國(guó)農(nóng)業(yè)部正式批準(zhǔn)使用的益生菌，具有菌種單一、對(duì)抗生素?zé)o耐藥性及對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物無(wú)毒性等特點(diǎn)。作為益生菌特性為：（1）耐酸、耐鹽、耐高溫及耐擠壓。（2）在腸道內(nèi)不增殖，在腸道的上段迅速發(fā)展成具有新陳代謝作用的營(yíng)養(yǎng)型細(xì)胞，參與菌群的平衡調(diào)節(jié)。（3）提高短鏈脂肪酸含量，降低腸道pH及氨濃度（4）繁殖過(guò)程中產(chǎn)酸、酶和多種維生素。
 
⒉枯草芽孢桿菌的作用機(jī)制
 
枯草芽孢桿菌在水產(chǎn)動(dòng)物腸道的作用主要表現(xiàn)在以下幾方面：（1）能產(chǎn)生抗弧菌和酵母菌的活性物質(zhì)，對(duì)魚(yú)類嗜水氣單胞菌、細(xì)菌性敗血病病菌、大黃魚(yú)致病菌、中華絨螯蟹致病菌及金黃色葡萄球菌有強(qiáng)烈的抑制作用。（2）繁殖過(guò)程中分泌大量的蛋白酶脂肪酶和淀粉酶，能補(bǔ)充機(jī)體內(nèi)原酶的不足，提高飼料的降解和吸收速率，促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物消化。（3）大量好氧，形成腸道厭氧環(huán)境，有益于乳酸菌等有益菌增殖，完善腸道生物屏障的作用，抵抗病原菌的定植和侵害。（4）枯草芽孢桿菌細(xì)胞的主要成分葡聚糖能發(fā)揮免疫刺激物的作用，提高魚(yú)類的非特異性免疫功能。
 
⒊枯草芽孢桿菌的作用方式
 
⑴作為飼料添加劑
 
由于枯草芽孢桿菌能耐受高溫高壓，保持良好的穩(wěn)定性和生物活性，因此，當(dāng)前以飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用較多�？莶菅挎邨U菌的防病能力源于對(duì)養(yǎng)殖對(duì)象體內(nèi)微生態(tài)環(huán)境的改善和機(jī)體免疫力的提高。當(dāng)枯草芽孢桿菌被吞食人腸道后，消耗氧氣，造成充滿二氧化碳的厭氧環(huán)境，從而扶持和促進(jìn)雙歧桿菌、乳酸菌等有益菌的增殖，有益菌能與腸系膜上皮細(xì)胞緊密結(jié)合，迅速定植，形成微生物膜，構(gòu)成腸道生物屏障，阻礙病菌的人侵和定植，又通過(guò)發(fā)酵作用產(chǎn)生大量乳酸、乙酸，降低腸內(nèi)pH，維持正常的腸蠕動(dòng)并使致病菌被排出體外。枯草芽孢桿菌細(xì)胞的主要成分葡聚糖，能發(fā)揮免疫刺激物的作用，提高養(yǎng)殖對(duì)象的非特異性免疫功能。機(jī)體吞噬細(xì)胞的活性也因枯草芽孢桿菌的進(jìn)人而被激活，吞噬和消化能力大大加強(qiáng)，從而提高機(jī)體的免疫力。飼料中添加枯草芽孢桿菌能提高南美白對(duì)蝦免疫功能和抗氧化能力，從而促進(jìn)其生長(zhǎng)，適宜添加量為0.05%（干粉計(jì)）。飼料中添加枯草芽孢桿菌能有效地提高血細(xì)胞的吞噬活性，同時(shí)能使克氏原螯蝦溶菌酶的產(chǎn)量提高。飼料中添加枯草芽孢桿菌后，斑節(jié)對(duì)蝦的酚氧化酶的活性和抗菌活性得到了提高。
 
⑵作為水質(zhì)改良劑
 
在水產(chǎn)養(yǎng)殖中作為水質(zhì)改良劑的主要是光合細(xì)菌。枯草芽孢桿菌能大量消耗水體中的有機(jī)質(zhì)，將其分解為小分子有機(jī)酸、氨基酸及氨，改善水質(zhì)，為單胞藻提供營(yíng)養(yǎng)，還可使氨濃度降低，凈化水質(zhì)。在水體中使用枯草芽孢桿菌制劑后，對(duì)氨氮、亞硝酸鹽和硫化物均有大幅度降低。在蟹池和魚(yú)池中分別加入枯草芽孢桿菌作為水質(zhì)改良劑發(fā)現(xiàn)，其對(duì)池塘氨氮、亞硝酸鹽氮和硫化物有明顯的降解作用，最大降解峰值出現(xiàn)在3~4天，有效時(shí)間持續(xù)超過(guò)7天。因此，作為水質(zhì)改良劑可視水質(zhì)情況每7天潑灑全池1次，使用后及時(shí)開(kāi)增氧機(jī)，以保證達(dá)到最好的使用效果。
 
⒋枯草芽孢桿菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用效果
 
⑴蝦類養(yǎng)殖中的應(yīng)用
 
2002年4月海南英州江海養(yǎng)殖廠進(jìn)行了斑節(jié)對(duì)蝦精養(yǎng)高位養(yǎng)殖池應(yīng)用實(shí)驗(yàn)，施用枯草芽孢桿菌后，由于枯草芽孢桿菌的繁殖和代謝作用，養(yǎng)殖池中的有害物質(zhì)——亞硝酸鹽、硫化氫減少，亞硝酸鹽濃度從0.0769μg/L下降到0.0599μg/L，而同期對(duì)照池亞硝酸鹽濃度則從0.0677μg/L上升到0.079μg/L；硫化氫對(duì)照池濃度在0.00515-0.0246mg/L的范圍內(nèi)波動(dòng)，而處理池硫化氫濃度10天內(nèi)從0.068mg/L降到0.0109mg/L，并且開(kāi)始兩天內(nèi)，更是驟降了0.0422mg/L之多。 衡量水質(zhì)污染狀況的化學(xué)耗氧量COD值明顯降低，10天內(nèi)COD值從投放前的9.054下降到8.222，而對(duì)照的每次測(cè)量值都高于處理池，COD值從9.072上升至9.57并且總堿度（ALK）降低，pH值也維持在適宜對(duì)蝦生長(zhǎng)的安全水平。證明枯草芽孢桿菌能夠達(dá)到凈化水質(zhì)，優(yōu)化養(yǎng)殖水體環(huán)境，保持養(yǎng)殖池微生態(tài)平衡的效果。并研究了枯草芽孢桿菌在蝦塘中的消長(zhǎng)規(guī)律，發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌施人養(yǎng)殖池后，能夠很好的適應(yīng)海水鹽度和滲透壓、溫度等環(huán)境并通過(guò)自身的繁殖，使菌數(shù)逐漸增加，5-8天達(dá)到高峰。因此，投放枯草芽孢桿菌的時(shí)間間隔以一周左右為宜。
 
⑵河蟹育苗中的應(yīng)用
 
（2001）在江蘇江洋特種水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)河蟹育苗階段進(jìn)行投放枯草芽孢桿菌試驗(yàn)：選用8m3的水泥育苗池一組，水溫19-25℃。每天投喂12次，其中蛋黃、藻粉各3次，輪蟲(chóng)、枝角6次。對(duì)照池每天換水2次，換水量每天15%-30%，312小時(shí)共換水7倍，并且先后施用了土霉素、痢特靈、高錳酸鉀。試驗(yàn)池312小時(shí)中投放枯草芽孢桿菌3次，每次3克，正常投餌，不換水，不用藥。試驗(yàn)結(jié)果：對(duì)照池平均氨氮量為0.313mg/L，試驗(yàn)池為0.285mg/L，比對(duì)照池降低8.9%，節(jié)約用水85.7%
 
⒌使用枯草芽孢桿菌的注意事項(xiàng)
 
（1）枯草芽孢桿菌雖然能夠凈水防病，但它并非能防止所有病害的發(fā)生，養(yǎng)殖者應(yīng)密切關(guān)注水體狀況，以多種手段綜合防治。
 
（2）枯草芽孢桿菌并非用的越多越好，因?yàn)樗�是一種好氧菌，過(guò)量使用會(huì)造成水體缺氧，引發(fā)養(yǎng)殖水產(chǎn)品因缺氧而死亡，所以需要在水體施入枯草芽孢桿菌后，及時(shí)進(jìn)行增氧，防止出現(xiàn)缺氧現(xiàn)象，造成損失。
 
（3）使用枯草芽孢桿菌時(shí)，經(jīng)過(guò)擴(kuò)配培養(yǎng)然后再水體潑灑施入更加高效。因?yàn)楫a(chǎn)品中的細(xì)胞均以芽孢狀態(tài)存在，處于休眠狀態(tài)，不具備代謝能力，如果直接投人會(huì)效果緩慢且不顯著；經(jīng)過(guò)培養(yǎng)擴(kuò)配的枯草芽孢桿菌，不但能夠有效快速激活孢子，并且迅速增殖菌體，達(dá)到原菌數(shù)的N倍，投人水體后，代謝旺盛，能在池塘中迅速增殖，分解大量有機(jī)質(zhì)，效果顯著。擴(kuò)配培養(yǎng)不但有效的節(jié)約了成本，提高了單袋菌體的使用面積及畝數(shù)，而且會(huì)迅速作用水體。
 
（4）枯草芽孢桿菌不要與殺菌劑一同使用。否則枯草芽孢桿菌會(huì)被殺死，起不到凈水作用。根據(jù)水體狀況、養(yǎng)殖密度及天氣情況，結(jié)合增氧設(shè)備，既能保證水體得以凈化，又能保證養(yǎng)殖對(duì)象的正�；顒�(dòng)。
 
二、枯草芽孢桿菌擴(kuò)培的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)
 
⒈充氧設(shè)備的選擇：充氧泵的功率根據(jù)培育水體的體積大小而定，可以采用森森魚(yú)缸用的小型增氧泵，如果培養(yǎng)菌液體積為100斤，則可以采用45W功率的充氧泵，如果培養(yǎng)的菌液體積為200斤，則可以采用55W功率的充氧泵，如果在200斤以上，可以根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行充氧泵的選擇，充氣頭全部接入，增加出氣量及均勻度，充氣頭請(qǐng)選擇氣泡石為最佳；
 
 
⒉容器的選擇：容器可以選擇透明或者不透明的都可以，一般容器體積較大的多為白色或者藍(lán)色；容器的體積根據(jù)自己每次的水體潑灑施入量進(jìn)行選擇，可以選擇100斤或者200斤甚至更大一點(diǎn)的；
 
⒊培育環(huán)境的選擇：培育環(huán)境干凈整潔，沒(méi)有揚(yáng)塵，操作過(guò)程越干凈越整潔，所能夠獲得的擴(kuò)配代數(shù)就越多【所以，擴(kuò)配代數(shù)同操作是緊密相關(guān)的】，不能置于陽(yáng)光直射的環(huán)境下進(jìn)行培育，切勿選擇錯(cuò)誤，其他光線環(huán)境均可【晚間無(wú)需光照】；
 
⒋培育水源的選擇：水源請(qǐng)選擇靜止曝氣24小時(shí)的自來(lái)水或者干凈含雜菌少的地下淡水；推薦曝氣過(guò)的自來(lái)水（某些地區(qū)的地下水重金屬超標(biāo)，對(duì)于菌體的繁育會(huì)產(chǎn)生負(fù)面效應(yīng)）；
 
⒌溫度：菌體的繁育時(shí)間跟溫度是相關(guān)的；溫度在30-35度之間需要5-7小時(shí)即可，溫度越低，需要的繁育時(shí)間就越長(zhǎng)；如果在冬季需要使用枯草芽孢桿菌，建議做培養(yǎng)液溫度的提升和恒溫，保證菌體的繁育時(shí)間段為最短，需要置備下列物品：電子溫控器、魚(yú)缸潛水泵、u型潛水加熱管
 
 
⒍菌液成熟的標(biāo)志：枯草芽孢桿菌的代謝物分為胞外蛋白酶及多種酸類；其中胞外蛋白酶對(duì)于有機(jī)質(zhì)分解的作用比較強(qiáng)效；菌液的ph值會(huì)隨著代謝物酸類的增加而降低至5.8-5.2至以下，菌液的投放時(shí)間選擇在菌液ph為5.8-5.5之間最為適宜，這個(gè)ph段活菌含量最多，孢子數(shù)量少；菌液表面張力擴(kuò)大，泡沫豐富；氣味為發(fā)酵的酸味；鏡檢可見(jiàn)：菌體活躍，游動(dòng)能力強(qiáng)，菌體增殖明顯，菌體數(shù)量豐富，有機(jī)質(zhì)明顯減少；
 
⒎下面我們就以培育100斤的枯草芽孢桿菌實(shí)例講解下：
 
準(zhǔn)備好容器，加入90斤曝氣過(guò)的自來(lái)水，取本店鋪的枯草芽孢桿菌或者您比較信賴的枯草芽孢桿菌200克，充分將其溶解于水體中，然后我們?nèi)∨囵B(yǎng)基一袋，并加入10斤溫水，溫度30度左右即可，并將培養(yǎng)基充分的進(jìn)行溶解，并將其導(dǎo)入到容器中，并將其混合均勻，至此，100斤菌液配置完畢；接入充氧機(jī)，并開(kāi)始記錄ph的變化，在菌液ph在5.8-5.5之間時(shí)，即可投入水體的潑灑使用，有條件的養(yǎng)殖人員，可以通過(guò)鏡檢觀察下菌體的狀態(tài)；
 
菌液成熟后，我們留出10斤作為下次培育100斤的原液，剩下的90斤菌液可以投入使用；由于枯草芽孢桿菌的繁育環(huán)境為非密閉性，包括充氧泵的充氣狀態(tài)都決定了在培育的過(guò)程中容易遭受雜菌的感染，所以，操作過(guò)程越嚴(yán)格，環(huán)境越干凈，那么可以獲得的培育代數(shù)就越多；保留菌液容器盡量干凈，容器盛滿并密封保存，置于遮光黑暗環(huán)境下，使菌體全程呈休眠狀態(tài)或者向孢子轉(zhuǎn)變，待下次培育時(shí)再開(kāi)始啟用；
 
⒏自行繁育枯草芽孢桿菌的優(yōu)勢(shì)：
 
菌體增殖，并全部可以呈現(xiàn)活菌狀態(tài)，施入水體后，可以快速作用于水體；活菌更加具有抗逆性，快速適應(yīng)本地的水質(zhì)環(huán)境，不但提高了用量，而且減低了成本；比如：我們一袋枯草芽孢桿菌完全擴(kuò)配可以作用于25-50畝的水面，如果我們只單獨(dú)用藥品進(jìn)行投放，則需要投放16-25袋藥品，如果我們自行擴(kuò)配，則只需要一包培養(yǎng)基加兩袋半的培養(yǎng)基；所投入的成本是顯而易見(jiàn)的，而且效果也許會(huì)超出你使用的16-25袋藥品的效果；
 
⒐枯草芽孢桿菌的用量：
 
各種養(yǎng)殖對(duì)象不盡相同，各地的水質(zhì)環(huán)境和養(yǎng)殖模式也有所區(qū)別，采用本店鋪的枯草芽孢桿菌繁育的菌液我們推薦每畝投放5斤，施入水體后，一定要注意觀察，及時(shí)開(kāi)動(dòng)增氧機(jī)進(jìn)行充氧，防止菌體繁殖及代謝造成水體缺氧，造成不必要的養(yǎng)殖損失現(xiàn)象；在這個(gè)基礎(chǔ)上，并結(jié)合某一個(gè)養(yǎng)殖時(shí)期的水質(zhì)狀態(tài)進(jìn)行增加或者減少的操作。