LaVision UltraMicroscope光片顯微鏡——結(jié)合新型透明化方法,實(shí)現(xiàn)動(dòng)物整體透明化并成像
瀏覽次數(shù):6316 發(fā)布日期:2019-3-28
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通過對(duì)各種疾病的觀察與研究,我們現(xiàn)在廣泛認(rèn)識(shí)到:大部分疾病,起源于身體的一部分,但最終都會(huì)影響到整體。這意味著,對(duì)于疾病的整體性研究至關(guān)重要。傳統(tǒng)的組織病理成像的研究方法,更側(cè)重于單個(gè)器官、組織的病理形態(tài)觀察與檢測,整體的病理研究需要一種能夠完整地保存整個(gè)機(jī)體的形態(tài)并整體成像的方法。接下來我們將介紹Ali Erturk教授開發(fā)的vDISCO組織整體透明技術(shù)并使用LaVision UltraMicroscope光片顯微鏡進(jìn)行動(dòng)物整體成像。
視頻1:vDISCO透明方法視頻演示
(1)高壓強(qiáng)灌注是vDISCO的核心步驟(2)vDISCO透明化后,光通過動(dòng)物體不產(chǎn)生折射(3)完整的神經(jīng)系統(tǒng)(4)可以通過透明的顱骨觀察到腦膜的血管分布(5)整體透明后,單獨(dú)神經(jīng)的標(biāo)記區(qū)分可以在整個(gè)動(dòng)物體中進(jìn)行
動(dòng)物整體透明化的難點(diǎn)在于動(dòng)物內(nèi)部由于組織厚而密集,透明化程度相對(duì)較低,同時(shí)熒光標(biāo)記難以深入組織內(nèi)部。vDISCO使用高壓強(qiáng)的液體來執(zhí)行心臟灌流,從而更徹底地清除血液等影響透明效果的因素,同時(shí)使熒光免疫標(biāo)記能夠達(dá)到更深層的組織實(shí)現(xiàn)整體均勻標(biāo)記。
UltraMicroscope光片顯微鏡可以容納整個(gè)動(dòng)物進(jìn)行整體成像
視頻2:光片顯微鏡成像過程視頻演示
透明化完成后,余下的問題就是應(yīng)該如何對(duì)大組織樣本進(jìn)行整體成像。LaVision UltraMicroscope具有8*8*5cm3的超大樣品腔,可以容納整個(gè)動(dòng)物進(jìn)行整體成像。vDISCO的極佳整體透明化效果與LaVision UltraMicroscope光片顯微鏡的大樣品整體成像結(jié)合,使得疾病的宏觀整體研究不再是水中月。
小鼠的整體神經(jīng)連接。肌肉(紅色);骨與器官(白色);神經(jīng)系統(tǒng)(綠色)