實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

總體要求

1、受試物：采用工藝相對(duì)穩(wěn)定、純度和雜質(zhì)含量能反映臨床試驗(yàn)擬用樣品和/或上市樣品質(zhì)量和安全性的樣品。名稱、來源、批號(hào)、含量（或規(guī)格）、保存條件、有效期及配制方法等，并提供質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告。 

2、試驗(yàn)動(dòng)物：成年和健康。常用動(dòng)物有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬、小型豬和猴等。

動(dòng)物選擇原則：

（1）首選動(dòng)物：在考慮與人體藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)相關(guān)性的前提下，盡可能選擇與毒理學(xué)和藥效學(xué)研究相同的動(dòng)物。

（2）盡量在動(dòng)物清醒狀態(tài)下進(jìn)行試驗(yàn)，最好從同一動(dòng)物多次采樣獲取藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

（3）創(chuàng)新性藥物應(yīng)選用兩種或兩種以上的動(dòng)物（嚙齒類+非嚙齒類）。其他藥物，可選用一種動(dòng)物，建議首選非嚙齒類動(dòng)物。

（4）經(jīng)口給藥不宜選用兔等食草類動(dòng)物。

百奧賽圖自產(chǎn)優(yōu)質(zhì)模式小鼠

3、劑量選擇：動(dòng)物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究應(yīng)設(shè)置至少三個(gè)劑量組，高劑量最好接近最大耐受劑量，中小劑量根據(jù)動(dòng)物有效劑量的上下限范圍選取。

4、給藥途徑：盡可能與臨床用藥一致，也要兼顧藥效學(xué)研究和毒理研究的給藥途徑。

實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1、血藥濃度-時(shí)間曲線 

1.1、 受試動(dòng)物數(shù)：最好從同一受試動(dòng)物個(gè)體取樣，如由多只動(dòng)物的數(shù)據(jù)共同構(gòu)成一條血藥濃度-時(shí)間曲線，需增加動(dòng)物數(shù)，以反映個(gè)體差異對(duì)結(jié)果的影響。

1.2、采樣點(diǎn)：

（1）給藥前需采血作為空白樣品。

（2）采樣時(shí)間點(diǎn)的設(shè)計(jì)應(yīng)兼顧藥物的吸收相、平衡相（峰濃度Cmax附近）和消除相。

（3）整個(gè)采樣時(shí)間應(yīng)持續(xù)到3~5個(gè)半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為Cmax的1/10~1/20。

（4）注意采血途徑和整個(gè)試驗(yàn)周期的采血總量不影響動(dòng)物的正常生理功能和血液動(dòng)力學(xué)，一般不超過動(dòng)物總血量的15％~20%。

1.3、口服給藥：給藥前應(yīng)禁食12小時(shí)以上，以排除食物對(duì)藥物吸收的影響。

1.4、多次（重復(fù)）給藥：對(duì)于臨床需長期給藥或有蓄積傾向的藥物，應(yīng)考慮進(jìn)行多次（重復(fù)）給藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究。多次給藥試驗(yàn)時(shí), 一般可選用一個(gè)劑量(有效劑量)。

圖片來源于網(wǎng)絡(luò)^[1]

2. 吸收

經(jīng)口給藥的新藥，進(jìn)行整體動(dòng)物試驗(yàn)時(shí)應(yīng)盡可能同時(shí)進(jìn)行血管內(nèi)給藥的試驗(yàn)，提供絕對(duì)生物利用度。

對(duì)于其他血管外給藥的藥物及某些改變劑型的藥物，應(yīng)根據(jù)立題目的，提供絕對(duì)生物利用度或相對(duì)生物利用度。

3. 分布

大鼠或小鼠，選擇一個(gè)劑量（有效劑量），給藥后，至少測定藥物及主要代謝產(chǎn)物在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、體脂、骨骼肌等組織的濃度。參考藥-時(shí)曲線的變化趨勢(shì)，選擇至少3個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別代表吸收相、平衡相和消除相的藥物分布。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，一般應(yīng)有6個(gè)動(dòng)物（雌雄各半）的數(shù)據(jù)�？煽紤]進(jìn)行多次給藥后特定組織的藥物濃度研究，進(jìn)行組織分布試驗(yàn)，必須注意取樣的代表性和一致性。

4. 排泄

同時(shí)提供嚙齒類和非嚙齒類動(dòng)物的排泄數(shù)據(jù)，嚙齒類每個(gè)性別3只動(dòng)物，非嚙齒類每個(gè)性別2~3只動(dòng)物。數(shù)據(jù)包括：尿和糞的藥物排泄、膽汁排泄。記錄藥物及主要代謝產(chǎn)物自糞、尿、膽汁排出的速度及總排出量（占總給藥量的百分比），提供物質(zhì)平衡的數(shù)據(jù)。

圖片來源網(wǎng)絡(luò)^[2]

5. 與血漿蛋白的結(jié)合

建議根據(jù)藥理毒理研究所采用的動(dòng)物種屬，進(jìn)行動(dòng)物與人血漿蛋白結(jié)合率比較試驗(yàn)。 

采用方法：平衡透析法、超過濾法、分配平衡法、凝膠過濾法、色譜法等�？蛇x擇使用一種方法進(jìn)行至少3個(gè)濃度（包括有效濃度）的血漿蛋白結(jié)合試驗(yàn)，每個(gè)濃度至少重復(fù)試驗(yàn)3次，以了解藥物與血漿蛋白結(jié)合率以及可能存在的濃度依賴性和血漿蛋白結(jié)合率的種屬差異。 

除上述實(shí)驗(yàn)內(nèi)容外，創(chuàng)新型藥物還需要進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)

6. 生物轉(zhuǎn)化

臨床前可先采用色譜方法或放射性同位素標(biāo)記方法分析和分離可能存在的代謝產(chǎn)物，并用色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等方法初步推測其結(jié)構(gòu)。

體內(nèi)藥物生物轉(zhuǎn)化可考慮與藥-時(shí)曲線和排泄試驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行，應(yīng)用這些試驗(yàn)采集的樣品進(jìn)行代謝產(chǎn)物的鑒定及濃度測定。 

7.藥物代謝酶及轉(zhuǎn)運(yùn)體研究

體外試驗(yàn)體系是評(píng)價(jià)藥物代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體作用機(jī)制，結(jié)合體內(nèi)試驗(yàn)，綜合評(píng)價(jià)藥物的處置過程。非臨床ADME研究應(yīng)主要采用人源化材料（如：人肝微粒體、肝S9、原代肝細(xì)胞及P450重組酶等），鑒定藥物是否是代謝酶的底物或抑制劑。

藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體在藥物吸收、分布、代謝、排泄中的作用^[3]

8. 物質(zhì)平衡

臨床前和臨床早期，毒性劑量和有效治療劑量范圍確定時(shí)，運(yùn)用放射性標(biāo)記化合物，收集動(dòng)物和人體糞、尿以及膽汁以研究藥物的物質(zhì)平衡。這些研究能夠獲得化合物的排泄途徑和排泄速率等信息，而且有助于代謝產(chǎn)物的性質(zhì)鑒定，并通過有限的數(shù)據(jù)比較它們的體內(nèi)吸收和分布特點(diǎn)。

非臨床藥代實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物很重要哦，百奧賽圖自產(chǎn)的模式小鼠非常優(yōu)秀呢，大家感興趣要記得聯(lián)系我們啊~~

篇幅有限，今天的內(nèi)容就到這里啦，后續(xù)會(huì)持續(xù)更新毒理藥理相關(guān)內(nèi)容，敬請(qǐng)期待呀~本文參考國家藥品監(jiān)督管理局藥品評(píng)審中心2014年5月頒布的《藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》^[4]。

參考圖文

[1]http://pic.sogou.com/d?query=%B3%E9%D1 %AA%CD%BC%C6%AC%B4%F3%C8%AB%BF%A8%CD%A8%CD%BC%C6%AC&mode=1&did=8#did7

[2]http://pic.sogou.com/d?query=%F4%CE%F 4%CE%B1%ED%C7%E9%B0%FC&mode=1&did=10#did9

[3]http://pic.sogou.com/d?query=%D2%A9%C E%EF%CC%E5%C4%DA%B4%FA%D0%BB&mode=1&did=18#did17

[4]http://www.cde.org.cn/zdyz.do?method= largePage&id=191