塑料切片類骨質(zhì)(osteoid)戈德納-馬森(GOLDNER-MASSON)染色試劑盒使用說明書
瀏覽次數(shù):7735 發(fā)布日期:2018-12-28
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塑料切片類骨質(zhì)(osteoid)戈德納-馬森(GOLDNER-MASSON)染色試劑盒
主要用途
塑料切片類骨質(zhì)(osteoid)戈德納-馬森(GOLDNER-MASSON)染色試劑是一種旨在使用三色染料(trichrome),分析和區(qū)分存檔中的塑料包埋組織切片中的類骨質(zhì)膠原纖維的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心改良傳統(tǒng)方法、成功實驗證明的。主要適用于環(huán)氧樹脂類、聚甲基丙烯酸甲酯(methacrylate)、鄰苯二甲酸乙二醇(BMA)等包埋的骨組織切片類骨質(zhì)的鑒別分析。產(chǎn)品即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。
技術背景
類骨質(zhì)(osteoid)是骨基質(zhì)中未礦物化(unmineralized)的有機部分,一旦礦物化,將產(chǎn)生新生骨組織。90%的類骨質(zhì)由I型膠原纖維組成。基于戈德納-馬森(GOLDNER-MASSON)三色系統(tǒng)的方法,提供了鮮明的對比,即呈現(xiàn)綠色的礦物化骨質(zhì)成分和呈現(xiàn)紅色的未礦物化的致密的膠原纖維(類骨質(zhì))。
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液(Reagent A) 200毫升
韋格液A(Reagent B) 5毫升
韋格液B(Reagent C) 5毫升
酸性液(Reagent D) 30毫升
染色液A(Reagent E) 10毫升
修正液(Reagent F) 50毫升
染色液B(Reagent G) 10毫升
染色液C(Reagent H) 10毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,避免光照;試劑具有腐蝕性,注意安全;有效保證3月
用戶自備
小型玻璃染色缸:用于組織或切片處理的容器
控溫熱板上(干式恒溫儀或加熱攪拌儀等)或60瓦白枳燈:用于樣品反應孵育
中性樹脂:用于切片封片
光學顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
實驗步驟
樣本染色開始前,將試劑盒里的試劑置于室溫下預熱,并避光。然后分別移取100微升
韋格液A(Reagent B)和
韋格液B(Reagent C)到1.5毫升離心管里,充分混勻后,標記為
韋格工作液,即刻使用。
- 準備好1至2微米厚的塑料包埋的切片
- 小心加上200微升清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
- 置于60℃控溫熱板上(干式恒溫儀或加熱攪拌儀等)或60瓦白枳燈下孵育,直至液體干化
- 小心加入200微升韋格工作液在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
- 置于60℃控溫熱板上(干式恒溫儀或加熱攪拌儀等)或60瓦白枳燈下孵育2分鐘(注意:避免液體干化)
- 小心移去韋格工作液
- 室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分鐘
- 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
- 小心加入200微升酸性液(Reagent D)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
- 置于60℃控溫熱板上(干式恒溫儀或加熱攪拌儀等)或60瓦白枳燈下孵育30秒(注意:避免液體干化)
- 小心移去酸性液(Reagent D)
- 室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分鐘
- 小心加入200微升清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
- 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
- 小心加入200微升染色液A(Reagent E)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
- 置于60℃控溫熱板上(干式恒溫儀或加熱攪拌儀等)或60瓦白枳燈下孵育2分鐘(注意:避免液體干化)
- 小心移去切片上的染色液A(Reagent E)
- 小心加上200微升 修正液(Reagent F)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
- 置于60℃控溫熱板上(干式恒溫儀或加熱攪拌儀等)或60瓦白枳燈下孵育2分鐘(注意:避免液體干化)
- 小心移去切片上的修正液(Reagent F)
- 小心加上200微升 染色液B(Reagent G)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
- 置于60℃控溫熱板上(干式恒溫儀或加熱攪拌儀等)或60瓦白枳燈下孵育2分鐘(注意:避免液體干化)
- 小心移去切片上的染色液B(Reagent G)
- 小心加上200微升 修正液(Reagent F)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
- 置于60℃控溫熱板上(干式恒溫儀或加熱攪拌儀等)或60瓦白枳燈下孵育2分鐘(注意:避免液體干化)
- 小心移去切片上的修正液(Reagent F)
- 小心加上200微升 染色液C(Reagent H)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
- 置于60℃控溫熱板上(干式恒溫儀或加熱攪拌儀等)或60瓦白枳燈下孵育2分鐘(注意:避免液體干化)
- 小心移去切片上的染色液C(Reagent H)
- 小心加上200微升 修正液(Reagent F)在切片上,鋪滿整個切片樣品表面
- 置于60℃控溫熱板上(干式恒溫儀或加熱攪拌儀等)或60瓦白枳燈下孵育2分鐘(注意:避免液體干化)
- 小心移去切片上的修正液(Reagent F)
- 放上蓋玻片或封片(中性樹脂)
- 即刻在一般光學顯微鏡下觀察:
細胞核――呈現(xiàn)藍灰色
類骨質(zhì)――呈現(xiàn)橘紅色
礦物化骨組織――呈現(xiàn)綠色
軟骨組織——呈現(xiàn)紫色
注意事項
本產(chǎn)品為50次操作
- 操作時,須戴手套
- 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
- 試劑溶液在切片表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿切片表面
- 整個操作,在避光狀態(tài)下進行
- 孵育時間可以根據(jù)樣品的不同、染色深淺的不同而延長或縮短
- 染色完成后,即刻進行光學顯微鏡觀察
- 樣品染色后保存,避免光照
- 本公司提供系列特定組織染色試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標準
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰