線蟲(chóng)研究新技術(shù)----NanoLive實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記3D顯微鏡

3D cell Explorer 實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記技術(shù)對(duì)C.elegans活細(xì)胞成像的重要性

秀麗隱桿線蟲(chóng)（C.elegans）是生物醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用最廣泛的模式生物之一。當(dāng)前成像技術(shù)的一個(gè)主要問(wèn)題是光毒性，它導(dǎo)致對(duì)活細(xì)胞動(dòng)力學(xué)觀察的干擾，開(kāi)發(fā)新的無(wú)標(biāo)記、高分辨率成像對(duì)于更好地理解這種珍貴生物體的解剖學(xué)和生理學(xué)是至關(guān)重要的。

在這里，我們展示了用3D cell explorer對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)無(wú)標(biāo)記成像的視頻，即如何克服了上述問(wèn)題。首先3D cell explorer對(duì)樣本的照射能量比作為參照物的光片顯微鏡(~1nW/m2)小100倍(~0.2nW/m2)， 極大減少對(duì)活細(xì)胞的損傷，同時(shí)分辨率高達(dá)200 nm，因此能對(duì)線蟲(chóng)活細(xì)胞進(jìn)行高分辨率和高頻率成像。

下面這些視頻和圖片是來(lái)自于柏林馬克斯·德布魯克分子醫(yī)學(xué)中心的弗里德里希·普魯瑟和尼基塔·弗拉基米羅夫的研究結(jié)果。
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3D cell Explorer 能對(duì)不同胚胎發(fā)育階段的C.elegans 成像

視頻中展示了3D cell Explorer對(duì)秀麗隱桿線蟲(chóng)早期發(fā)育不同階段實(shí)時(shí)標(biāo)記斷層3D掃描過(guò)程：A.子宮中的未受精卵細(xì)胞（右邊的綠色箭頭）和精子（左邊的綠色箭頭）；C.胚胎期AB：兩個(gè)細(xì)胞之間的隔膜用綠色箭頭標(biāo)記；D.胚胎期AB²：胚胎由4個(gè)細(xì)胞組成。卵殼清晰可見(jiàn)，用綠色箭頭表示；E.胚胎期ABⁿ：胚胎由許多（n）細(xì)胞組成。在視野里也可以看到母體的嘴，如綠色箭頭所示；F.這種蠕蟲(chóng)的子宮里有兩種不同的胚胎以不同的速度發(fā)育：底部的AB²和頂部的ABⁿ。
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3D cell Explorer可對(duì)C. elegans生殖系統(tǒng)無(wú)標(biāo)記高清晰成像

下圖顯示未受精的卵母細(xì)胞待在卵巢中，一個(gè)接一個(gè)地通過(guò)精囊轉(zhuǎn)移到子宮，在那里它們與精子相遇并受精。

3D Cell Explorer 在線蟲(chóng)研究中的突出優(yōu)勢(shì)

﹡360度旋轉(zhuǎn)光源的全息技術(shù)成像；

﹡非侵入式或無(wú)需染色標(biāo)記成像；

﹡無(wú)損傷：低功率激光，基于RI的無(wú)損傷實(shí)時(shí)3D 細(xì)胞結(jié)構(gòu)成像；

﹡任意的數(shù)字染色：高達(dá)7色；

﹡納米級(jí)分辨率 ：XY=200nm；

﹡超高成像速度：2秒鐘快速3D全息成像；

﹡高通量：整合3通道熒光，最高同時(shí)10色標(biāo)記（7DI+3色熒光）