建立生理相關(guān)的體外模型對于進(jìn)一步了解神經(jīng)疾病的機(jī)制以及靶向藥物開發(fā)至關(guān)重要。iPSC衍生的神經(jīng)元顯示出對化合物篩選和疾病建模的巨大希望,然而目前已經(jīng)開發(fā)出使用三維(3D)培養(yǎng)物作為對神經(jīng)元細(xì)胞的測定開發(fā)的有效方法。3D細(xì)胞培養(yǎng)被認(rèn)為是更接近人類組織的重演方式,包括結(jié)構(gòu)、細(xì)胞組織、細(xì)胞- 細(xì)胞和細(xì)胞- 基質(zhì)相互作用等領(lǐng)域。 目前,比較常見的的兩種3D細(xì)胞球培養(yǎng)模式包括3DProSeedTM水凝膠和微流控OrganoPlate®平臺培養(yǎng)系統(tǒng)。水凝膠通過摻入MMP切割位點來幫助細(xì)胞遷移,并包含RGD細(xì)胞粘連基序以支撐細(xì)胞的粘附作用。這種水凝膠預(yù)制板使用方法簡便,同時能很好地兼容自動化設(shè)備(圖1)。OrganoPlate®是一個高通量平臺,結(jié)合了最新的3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、Phaseguides™和微流體技術(shù),它包含96個適合長期培養(yǎng)活細(xì)胞的組織芯片,適用于篩選目的,并且與標(biāo)準(zhǔn)實驗室設(shè)備或自動化系統(tǒng)兼容,如ImageXpress®Micro Confocal共聚焦高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)(圖2)。 | |||
圖1:圖解3DProSeedTMsurface工作原理以及在模具中培養(yǎng)神經(jīng)元細(xì)胞的過程 | |||
圖2:OrganoPlate中培養(yǎng)的神經(jīng)元細(xì)胞。在充滿基質(zhì)膠的OrganoPlate培養(yǎng)槽內(nèi)對接種的iCell神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行透射光成像。細(xì)胞以每芯片30,000個細(xì)胞的密度培養(yǎng)72h,然后用20X平場熒光物鏡進(jìn)行透射光成像。 | |||
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