引言

脂肪作為人體的三大供能營養(yǎng)素之一， 對人體有許多重要的生理作用。 油脂中 90% 以上是脂肪酸， 而脂肪酸又分為飽和脂肪酸、 單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸。多不飽和脂肪酸中含有的 n-6和 n-3脂肪酸屬必需脂肪酸，是人體無法合成而必須從食物中獲取的。

嬰兒體格、 智力和行為的發(fā)育除了受先天因素和早期教育的影響外， 還與后天的營養(yǎng)狀況有很大關(guān)系。 日本營養(yǎng)學(xué)專家飯野節(jié)夫的研究結(jié)果表明， 兒童的腦力發(fā)展 80%以上取決于營養(yǎng)。 而在眾多營養(yǎng)素中， 脂肪酸與智力發(fā)育有密切關(guān)系是受到學(xué)術(shù)界肯定的。 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院營養(yǎng)與食品安全系系主任何計(jì)國副教授說：“在注意膳食脂肪合理攝入量的同時(shí)， 必須考慮各種脂肪酸的搭配。 適宜比例的脂肪酸攝入， 能降低患肥胖、 心血管疾病的危險(xiǎn)性， 并促進(jìn)胎兒、 嬰幼兒大腦和視覺的發(fā)育�！币虼耍� 嬰幼兒食品中脂肪酸的組成引起人們的重視， 衛(wèi)生部于 2010 年發(fā)布食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)《GB 5413.27-2010 嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的測定》^[1]， 規(guī)定了脂肪酸的檢測方法， 本方法依據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)方法中第一法用氣相色譜法對嬰幼兒食品和乳品中的脂肪酸進(jìn)行了測定。

實(shí)驗(yàn)部分

主要儀器設(shè)備與試劑

儀器： 氣相色譜儀， Trace 1310， 美國 ThermoFisher。試劑： 碳酸鈉溶液， 準(zhǔn)確稱取 6 g 無水碳酸鈉， 加水溶解并定容至 100 mL； 甲苯， 色譜純； 乙酰氯甲醇溶液： 量取40 mL 甲醇于 100 mL 干燥的燒杯中， 準(zhǔn)確吸取 5.0 mL 乙酰氯逐滴緩慢加入， 不斷攪拌， 冷卻后轉(zhuǎn)移并定容至 50 mL干燥的容量瓶中； 脂肪酸甲酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液， 100 mg/L。

氣相色譜條件：色譜柱TR-FAME,100m,0.25mm,0.20μm(P/N:260M238P,S/N:0036515)；柱溫采用程序升溫條件如下：60℃(保持1min)；20℃/min到160℃，保持2min，4℃/min到240℃(保持15min)。載氣為高純氮?dú)?純度99.999%)；流速1.0mL/min。進(jìn)樣口為SSL進(jìn)樣口，溫度：260℃，進(jìn)樣模式split，分流比，10:1。檢測器溫度：280℃，氫氣35mL/min，空氣350mL/min，尾吹氣氮?dú)?0mL/min。

樣品前處理方法

稱取 0.5 g 待測樣品于 15 mL 干燥螺口玻璃管中，加入 5.0mL 甲苯， 加入 10% 乙酰氯甲醇溶液 6.0 mL， 旋緊螺旋蓋，振蕩混合后于 80℃ ±1℃水浴中放置 2 h， 期間每隔 20min 取出振搖一次， 水浴后取出冷卻至室溫。 將反應(yīng)后的樣液轉(zhuǎn)移至 50 mL 離心管中， 分別用 3.0 mL 碳酸鈉溶液清洗玻璃管三次， 合并碳酸鈉溶液于 50 mL 離心管中，混勻， 5000 轉(zhuǎn) / 分鐘離心約 5 min。 取上清液作為試液，氣相色譜儀測定。

樣品的測定

上述衍生后的樣品中， 分析物濃度范圍較寬， 樣品直接進(jìn)樣、 稀釋 10 倍、 100 倍后分別進(jìn)樣， 各組分分別以適合稀釋倍數(shù)的樣品進(jìn)行定量。 用 Thermo Scientific 全新一代的 Trace1310 氣相色譜儀配 FID 檢測器進(jìn)行檢測。 樣品中衍生得到的脂肪酸甲酯可以用保留時(shí)間進(jìn)行定性分析， 峰面積進(jìn)行外標(biāo)法定量。

結(jié)果與討論

標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖和線性范圍

標(biāo)準(zhǔn)樣品中 37 種脂肪酸甲酯的色譜圖如圖 1 所示。 37 種The world leader in serving science 脂肪酸甲酯的保留時(shí)間和名稱列于表 1 中用標(biāo)準(zhǔn)樣品配制成總濃度分別為 20 μg/mL, 40 μg/mL, 100 μg/mL, 200 μg/mL, 400 μg/ml 的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液， 進(jìn)樣 1μL， 然后按照以上所述的測定方法進(jìn)行 GC-FID 測定， 以標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的濃度為橫坐標(biāo)， 以各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線， 得到各種脂肪酸甲酯的線性相關(guān)系數(shù)列于表 1 中。 檢測限以 3 倍信噪比計(jì)算， 結(jié)果列于表 1 中。

實(shí)際樣品測定

采用本方法測定了大豆粉、 豆奶粉、 奶粉 I、 米粉、 奶粉II 五種樣品中的脂肪酸含量， 測定譜圖見圖 2， 各檢測結(jié)果列于表 2 中。

C22:6ns 是二十二碳六烯酸 (Docosahexaenoic Acid， DHA)，C20:5 是二十碳五烯酸 (EicosaPentaenoic acid， EPA)， C20:4n6是花生四烯酸（Arachidonic acid， ARA）。 研究表明 DHA 有益于嬰兒的大腦和眼睛。 DHA 在視神經(jīng)細(xì)胞及視網(wǎng)膜組織中的含量高達(dá) 40%-47%， 如果食物中缺乏 DHA， 可使視網(wǎng)膜組織中 DHA 含量下降， 從而導(dǎo)致視力下降。 大部分嬰兒配方奶粉中會(huì)添加這三種脂肪酸， 研究表明這三種脂肪酸對嬰兒智力和視力發(fā)育起到關(guān)鍵作用。 本文測定結(jié)果表明嬰幼兒配方奶粉中這三種脂肪酸的含量明顯高于其它食品。、

結(jié)論

嬰幼兒食品中的脂肪酸采用乙酰氯甲醇甲酯化法生成脂肪酸甲酯， 甲苯提取后進(jìn)行氣相色譜儀測定。 該方法操作簡單， 重復(fù)性好， 37 種脂肪酸甲酯采用 100m 的脂肪酸甲酯分析專用柱， 得到了良好的分離。 賽默飛世爾科技的 Trace1300 系列氣相色譜儀用于嬰幼兒食品中脂肪酸甲酯的測定靈敏度高， 結(jié)果準(zhǔn)確。

參考文獻(xiàn)

[1] GB 5413.27-2010 嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的測定