關(guān)鍵詞

ECD；化妝品； TG-1701 色譜柱

目標(biāo)

建立高效的氣相色譜檢測方法，靈敏、快速、準(zhǔn)確測定化妝品中的氯丁醇

引言

三氯叔丁醇是無色晶體，作為一種高效的防腐劑，廣泛用于醫(yī)藥、食品、化妝品等領(lǐng)域，有殺滅細(xì)菌和真菌的活性，常以0.5%溶液用于注射劑、滴眼劑及化妝品中的防腐劑^[1]。而化妝品中可能存在微量的三氯叔丁醇，大多是由于防腐劑的添加引入的。由于三氯叔丁醇可抑制中樞系統(tǒng)抑制癥狀，表現(xiàn)為意識喪失，呼吸因難等癥狀，可能給廣大消費者健康安全造成潛在危害^[2]。

我國《化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》、《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》及《歐盟化妝品法規(guī)》(Cosmetic Regulation EC 1223/2009)等均規(guī)定三氯叔丁醇為化妝品組分中限用物質(zhì)，限量為0.5%[3,4]。

本方法根據(jù)中國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T1780-2006所述方法(測定低限0.1ppm)，采用賽默飛模塊化氣相色譜1310檢測化妝品中的三氯叔丁醇，分別分析了常見化妝品種類中乳液、爽膚水、護(hù)手霜和唇膏中的三氯叔丁醇，利用ECD檢測器，所得結(jié)果準(zhǔn)確，靈敏度高，重現(xiàn)性好，能夠滿足目前化妝品中三氯叔丁醇檢測的需要。

儀器

Trace1310 氣相色譜儀， 配ECD檢測器（Thermo Scientific）；AS1310 自動進(jìn)樣器（Thermo Scientific）

耗材

色譜柱： TG-1701MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）（Thermo Scientific, PN: 26090-1420）

試劑與標(biāo)準(zhǔn)品

三氯乙醇（內(nèi)標(biāo)）、 三氯叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)品： 含量≥ 99%；無水乙醇： 色譜純 (Thermofisher)

標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

目標(biāo)物儲備液： 準(zhǔn)確稱取適量氯丁醇標(biāo)準(zhǔn)品（精確至0.1 mg）， 以無水乙醇溶解、 定容、 混勻， 配制成濃度為 100 μg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。 標(biāo)準(zhǔn)工作液根據(jù)需要用乙醇稀釋到使用濃度。

內(nèi)標(biāo)儲備液： 準(zhǔn)確稱取適量三氯乙醇標(biāo)準(zhǔn)品（精確至0.1 mg）， 以無水乙醇溶解、 定容、 混勻， 配制成濃度為 25 μg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。

標(biāo)準(zhǔn)中間液： 精密移取標(biāo)準(zhǔn)儲備液及內(nèi)標(biāo)儲備液適量，用無水乙醇稀釋得到終濃度為 10 μg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)中間液，其中內(nèi)標(biāo)液濃度為 3 μg/ml。

樣品前處理

稱取化妝品試樣約 0.5g( 精確到 1 mg)， 于 50 ml 具塞錐形瓶中， 加入內(nèi)標(biāo)物 3 ml（25 μg/ml）， 加入 15 ml 無水乙醇，提取超聲 20 min， 將提取液用漏斗過濾至 25 ml 容量瓶中，用無水乙醇定容至刻度， 混勻。 濾液供氣相色譜測定用。

實驗條件

色譜柱： TG-1701MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；
柱溫： 80℃（0 min）， 5℃ /min 到 150℃（0min）， 35℃ /min到 210℃（3 min）；
進(jìn)樣模式： 分流進(jìn)樣， 分流比 50 : 1；
進(jìn)樣口溫度： 280℃ ；
載氣： 氦氣（99.999%）， 恒流模式， 1 mL/min；
ECD 檢測器溫度： 300℃ ， 尾吹氣流速： 15mL/min， 默認(rèn)脈沖設(shè)置；

方法學(xué)驗證及實驗結(jié)果

線性關(guān)系及測定低限：將標(biāo)準(zhǔn)中間液（10.40μg/ml）用3μg/ml的內(nèi)標(biāo)溶液逐級稀釋，配制成濃度分別26ng/ml、260ng/ml、520ng/ml、2600ng/ml和5200ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)工作液供氣相色譜測定。以測定峰面積峰面積比為縱坐標(biāo)，對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1，具體結(jié)果見表1。方法檢出限以標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級稀釋至信噪比=3檢測得到，本方法中三氯叔丁醇的測定低限為52.0μg/kg（0.052ppm），檢測限為10.4μg/kg（10.4ppb）。分別進(jìn)空白乙醇溶劑，標(biāo)準(zhǔn)工作液（500ng/ml）及各樣品，所得的色譜圖見圖2.。由譜圖可見所采用的色譜方法無干擾。

回收率及精密度實驗： 以護(hù)手霜基質(zhì)來做加標(biāo)回收率，分別做濃度為 52ng/ml、 520 ng/ml、 5200ng/ml 的加標(biāo)回收率（n=5）， 護(hù)手霜本底為 74.27ng/ml。 所得結(jié)果見表 2.。低、 中、 高濃度加標(biāo)回收率的譜圖見圖 3。

[1] 馬淑飛 ; 馬永紅 ; 氣相色譜法測定復(fù)方托吡卡胺滴眼液中三氯叔丁醇的含量 [J]; 齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報 ; 2010 年22 期
[2] 張世磊 ; 賀艷麗 ; 眼用制劑中抑菌劑的應(yīng)用 [J]; 食品與藥品 ; 2010 年 09 期
[3] 王喆 ; 邱澤武 ; 彭曉波 ; 孫成文 ; 消痔靈注射液治療頰部血管痣致三氯叔丁醇中毒 [J] ; 藥物不良反應(yīng)雜志 ;2009 年 04 期
[4] 王強 ; 安代志 ; 王莉莉 ; 史云 ; 張瑩 ; 戚紅卷 ; 孫如寶 ;張傳福 ; 劉雪林 ; 靳連群 ; 手消毒劑中復(fù)合醇鑒定與含量測定 [J]; 中國消毒學(xué)雜志 ; 2010 年 06 期