Namocell單細(xì)胞鋪板基本工作原理

瀏覽次數(shù)：8654　發(fā)布日期：2018-4-23　來(lái)源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

單細(xì)胞鋪板新選擇

傳統(tǒng)的細(xì)胞鋪板一般采用手動(dòng)的有限稀釋法來(lái)進(jìn)行，這種方法在需要的操作簡(jiǎn)單，只需要普通的排槍就能實(shí)現(xiàn)，但是效果卻很不理想。主要體現(xiàn)在：一致性差，有效孔比例低下，耗費(fèi)時(shí)間等。

近年來(lái)，單抗藥物的開(kāi)發(fā)領(lǐng)域又被推上了一個(gè)新的高度，越來(lái)越多的公司都紛紛投入到這個(gè)熱潮當(dāng)中，隨之而來(lái)的相關(guān)法規(guī)的要求也是越來(lái)越嚴(yán)格。在眾多的要求當(dāng)中，F(xiàn)DA對(duì)藥物來(lái)源的單克隆源性的要求非常嚴(yán)格，這就要求生產(chǎn)和研發(fā)的企業(yè)在細(xì)胞株開(kāi)發(fā)階段做到嚴(yán)格的單克隆驗(yàn)證。目前市面上已經(jīng)有幾款孔板掃描設(shè)備能夠得到FDA的認(rèn)可，他們的數(shù)據(jù)可以用來(lái)作為單克隆源性的證明。在這里我們要討論的是在驗(yàn)證前的分離階段，如何快速、準(zhǔn)確、高效的獲得單細(xì)胞。除了上面提到的有限稀釋法之外，昂貴的流式細(xì)胞分選儀也可以用來(lái)作為單細(xì)胞鋪板工具之一，當(dāng)然流式除了操作復(fù)雜，需要專人維護(hù)之外，分選得到的細(xì)胞常常復(fù)蘇比例比較低。在流式分選中，細(xì)胞的損傷比較大。

Namocell單細(xì)胞分離儀為細(xì)胞鋪板提供了全新解決方案。該設(shè)備采用最新的微流體專利技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)快速，高效，準(zhǔn)確的細(xì)胞鋪板工作。并且分離過(guò)程輕柔，不會(huì)影響細(xì)胞的后續(xù)生長(zhǎng)。能廣泛應(yīng)用于單抗開(kāi)發(fā)中的CLD環(huán)節(jié)，以及單細(xì)胞測(cè)序等。

Namocell單細(xì)胞分離用于細(xì)胞鋪板的原理如下：

將細(xì)胞通過(guò)一次性的芯片上端加樣孔，注入到芯片腔體中。單細(xì)胞流在微流控通道中流過(guò)激光檢測(cè)區(qū)域，機(jī)器能對(duì)細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別，去除掉細(xì)胞碎片，死細(xì)胞以及狀態(tài)較差的細(xì)胞，使得最終落到孔板中的細(xì)胞都具有很好的活性。高速電子閥門(mén)能夠精確捕獲每一個(gè)活性細(xì)胞，最終形成1ul體積的液滴，輕柔地落進(jìn)孔板中。整個(gè)過(guò)程對(duì)細(xì)胞的損傷可以忽略不計(jì)，所以分選得到的細(xì)胞絕大多數(shù)的細(xì)胞都能再次分裂生長(zhǎng)。

整個(gè)過(guò)程非�？焖�，一般一塊9孔板分選需要1min左右，單個(gè)細(xì)胞一個(gè)孔的比例在85%~90%，一般細(xì)胞復(fù)蘇的比例在40%~65%（復(fù)蘇比例跟細(xì)胞本身有很大關(guān)系）。