豬源性成分核酸檢測(cè)試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/p>

請(qǐng)于-20℃條件下保存，有效期 12 個(gè)月

◆ 產(chǎn)品說(shuō)明

 物種鑒定系列基于獨(dú)特的恒溫?zé)晒鈾z測(cè)技術(shù)，可針對(duì)食品、飼料等樣品中動(dòng)物源性成分的特異核酸片段進(jìn)行擴(kuò)增，儀器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增過(guò)程中的熒光信號(hào)變化，自動(dòng)判讀結(jié)果。本產(chǎn)品用于豬源性成分的檢測(cè)，檢出限

為 0.5%。

◆ 產(chǎn)品組成（48 測(cè)試）

 

	021011M
試劑	含量
A-Sus-I	1200μL Χ1 支
B-I	55μL Χ1 支
C-I	1200μL Χ1 支
NG-I	50μL Χ1 支
PG-Sus-I	50μL Χ1 支

 

◆ 適用儀器

 

ZYD-S1、ESE Tube Scanner、Genie II、Deaou-308c 等恒溫?zé)晒鈾z測(cè)儀， ABI 7500，LightCycler480，CFX 96

 

等熒光 PCR 儀。

 

◆ 自備耗材和儀器

 

①滅菌 1.5mL 或 2.0mL 離心管；②滅菌 0.2mL PCR 管或八聯(lián)管；③冰盒；④移液器（1-10μL，10-100μL，100-1000μL）

 

及配套滅菌吸頭；⑤離心機(jī)；⑥渦旋混勻器；⑦金屬浴。

 

◆ 注意事項(xiàng)

 

1．本試劑檢測(cè)靈敏度高。為了防止污染，實(shí)驗(yàn)要分區(qū)操作。

 

1）第一區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū)。

 

2）第二區(qū)：樣本制備區(qū)。

 

3）第三區(qū)：擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)。

 

★ 分區(qū)之間最好進(jìn)行物理性隔離，避免人為因素造成的污染。

 

2. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中穿戴工作服和乳膠手套，使用移液器，試驗(yàn)產(chǎn)生的所有廢棄物及時(shí)處理。

 

3．嚴(yán)格按照操作步驟操作，試劑配制和加樣等步驟請(qǐng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求在冰上操作。

 

4．反應(yīng)液中的成分對(duì)光敏感，應(yīng)避光保存。試劑使用前要完全解凍，但應(yīng)避免反復(fù)凍融，推薦使用前離心 30

 

秒，并按檢測(cè)頻次將反應(yīng)液以適當(dāng)體積分管保存。

 

5．反應(yīng)結(jié)束后，擴(kuò)增管請(qǐng)置于密封袋內(nèi)丟棄，當(dāng)日清理，開(kāi)蓋易造成氣溶膠污染，禁止開(kāi)蓋。

 

6．不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿混合使用，在有效期內(nèi)使用。

 

◆ 樣品處理

 

參照《SN/T 3730.-2013 食品及飼料中常見(jiàn)畜類(lèi)品種的鑒定方法 第 8 部分：豬成分檢測(cè) 實(shí)時(shí) 熒光 PCR 法》或其他標(biāo)準(zhǔn)處理樣品，制備的樣本保存待用。

 

①樣品的采集和制備是動(dòng)物源性鑒別的重要步驟，為防止交叉污染，應(yīng)使用一次性消耗品，研缽應(yīng)經(jīng) 160℃干烤 2 h，其他不宜干烤或高壓處理的器皿應(yīng)使用 1%次氯酸鈉溶液浸泡。②取樣應(yīng)盡量采取肌肉組織，對(duì)于同一批樣品，應(yīng)多點(diǎn)采集合并后，作為一份樣品進(jìn)行均質(zhì)，提取 DNA。③采樣過(guò)程應(yīng)快速完成，將采取的樣品迅速放入組織攪碎機(jī)中進(jìn)行均質(zhì)成糜狀，充分混勻，取 0.1 g 充分混勻的樣品，采用液氮研磨或均質(zhì)器均質(zhì)。

 

詳細(xì)步驟請(qǐng)按照標(biāo)準(zhǔn)操作或查閱食安通軟件。

◆ 實(shí)驗(yàn)操作

 

將試劑完全解凍，各組分離心 30s。

 

1. 試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)，放置于冰盒中進(jìn)行）：

 

若有 N 個(gè)待檢樣品，則參照下表，按照 N+2 個(gè)數(shù)量計(jì)算各組分用量（N 個(gè)待檢樣品+1 個(gè)陰性對(duì)照+1 個(gè)陽(yáng)性對(duì)照），將反應(yīng)液置于 1.5mL 或者 2.0mL 離心管中，漩渦混勻，離心 30 秒，分裝于 0.2mL PCR 管中，并向每管加入 1

   滴 C-I（約 20μL）。

 

 

 

 

 

 

2．模板制備（樣本制備區(qū)）

 

試劑 使用量

 

A-Sus-I 22Χ(N+2)μL

 

B-I 1Χ(N+2)μL

 

 反應(yīng)液總體積   23Χ(N+2)μL