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一種活細(xì)胞倒置熒光顯微鏡溫度校準(zhǔn)方法的介紹

瀏覽次數(shù):6725 發(fā)布日期:2018-4-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

活細(xì)胞培養(yǎng)熒光顯微鏡由于可以進(jìn)行活細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)條件,例如:溫度控制,濕度控制,CO2濃度控制,O2濃度控制,同時配置高速攝像頭可以進(jìn)行時間序列(Time-Lapse),結(jié)合多色熒光濾片切換,LED單波長光源激發(fā),可配備相差(Phase Contrast),微分干涉(DIC),熒光等對照方式可以更加直觀詳細(xì)的進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)記錄而受到廣大科研用戶的認(rèn)可。近年來,倒置熒光顯微鏡配置活細(xì)胞培養(yǎng)裝置的相關(guān)實驗越來越普遍,目前市面上集成的熒光成像系統(tǒng)很多,例如:GE公司的DELTAVISION活細(xì)胞成像系統(tǒng),ZEISS公司的CELL OBSERVER系統(tǒng),或其它大品牌公司的整套活細(xì)胞成像系統(tǒng),價格昂貴(20萬美元以上),維護(hù)成本高,廠家工程師上門速度通常比較慢或者收費貴,常規(guī)實驗室難以負(fù)擔(dān)。目前各實驗室通常都配備有倒置熒光顯微鏡,活細(xì)胞培養(yǎng)裝置是模塊化設(shè)計的產(chǎn)品,廣州科適特科學(xué)儀器有限公司提供一種優(yōu)惠簡便的解決方案,定制整套活細(xì)胞或?qū)ΜF(xiàn)有的熒光顯微鏡進(jìn)行活細(xì)胞升級,購置成本低,拆裝方便,兼容目前市場主流的各大顯微鏡平臺,例如:徠卡,尼康,奧林巴斯,蔡司等都可以提供定制的適配器。

活細(xì)胞培養(yǎng)裝置中溫度控制是一個重要的實驗參數(shù),但是由于活細(xì)胞培養(yǎng)的探測器通常位于培養(yǎng)腔室的上壁邊緣,由于室溫(例如22℃)與培養(yǎng)箱中設(shè)定溫度(例如37℃)偏差比較大,溫度傳導(dǎo)散熱效應(yīng),顯微鏡細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)皿中細(xì)胞真實的溫度難以達(dá)到設(shè)定溫度,為了保證真實培養(yǎng)溫度精確,顯微鏡活細(xì)胞培養(yǎng)在不同的實驗室環(huán)境首次使用前通常需要進(jìn)行校準(zhǔn)(Calibration)。

最近剛好廣州科適特科學(xué)儀器有限公司裝機(jī)的客戶有跟我們問到溫度校準(zhǔn)的問題,順便以我們公司代理的IBIDI活細(xì)胞培養(yǎng)裝置為例介紹一下活細(xì)胞培養(yǎng)裝置溫度校準(zhǔn)的問題。廣州科適特科學(xué)儀器有限公司是德國IBIDI活細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品的國內(nèi)授權(quán)代理,價格優(yōu)惠,發(fā)貨速度快。

一.顯微鏡活細(xì)胞裝置的組成通常包含活細(xì)胞培養(yǎng)腔體,控制模塊單元,加濕柱,連接導(dǎo)管,CO2氣瓶,壓縮空氣瓶等配件。

二、培養(yǎng)箱腔體由上蓋(LID)和加熱

底板(PLATE)組成,通過適配器固定在倒置顯微鏡的載物臺上,內(nèi)部有溫度探頭,氣體輸入輸出接口,控制面板可以設(shè)置氣體的流速,CO2及O2濃度等參數(shù)。

三.取出校準(zhǔn)專用小工具,校準(zhǔn)用溫度探頭,即一條可插入培養(yǎng)皿內(nèi)部的線纜。上蓋有開孔的校準(zhǔn)培養(yǎng)皿。將探頭插入校準(zhǔn)培養(yǎng)皿的小孔,用此探頭監(jiān)測實時培養(yǎng)皿內(nèi)部的溫度。目的是將內(nèi)部溫度設(shè)置為活細(xì)胞目標(biāo)溫度(例如:37℃)。

四.打開溫度控制器電源開關(guān),在控制器的前端LED面板上會顯示相關(guān)的參數(shù)?刂破髯疃嗫梢钥刂4個通道的溫度設(shè)置,活細(xì)胞培養(yǎng)裝置上蓋和底板是可以加熱的,通常只需要占用前面兩個通道,I指示的內(nèi)部探頭的溫度,S指示的設(shè)定溫度,E指示的是外部探頭的溫度。例如我們希望活細(xì)胞培養(yǎng)皿內(nèi)的溫度為37℃,則我們可以通過調(diào)節(jié)上蓋(通道1)和低加熱板(通道2)的設(shè)定溫度,當(dāng)E指示的外部探頭溫度達(dá)到37℃,并能持續(xù)15分鐘保持不變。則校準(zhǔn)工作完成。

五.校準(zhǔn)工作完成后,記錄下上蓋(LID)和下加熱板(PLATE)的設(shè)定溫度。每次開始實驗工作時,只需要將設(shè)定溫度保持在我們已經(jīng)校準(zhǔn)好的溫度,則可以認(rèn)為培養(yǎng)皿內(nèi)部實驗環(huán)境的溫度可以保持在目標(biāo)溫度,例如37℃。此過程類似于在開展活細(xì)胞培養(yǎng)實驗之前進(jìn)行的預(yù)實驗。

六.倒置熒光顯微鏡活細(xì)胞培養(yǎng)模塊化設(shè)計,此設(shè)備可以兼容各大顯微鏡品牌,如果實驗室有多臺不同品牌倒置顯微鏡,只需要一臺即可隨用隨裝,方便實用。如果有問題可以咨詢廣州科適特科學(xué)儀器有限公司的服務(wù)工程師。

來源:廣州科適特科學(xué)儀器有限公司
聯(lián)系電話:020-38102730
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