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                                當前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 三維基因組(Hi-C)技術(shù)解析

                                三維基因組(Hi-C)技術(shù)解析

                                瀏覽次數(shù):7393 發(fā)布日期:2018-3-9  來源:原創(chuàng)

                                Hi-C (High-through chromosome conformation capture) 是以整個細胞核為研究對象,利用高通量測序技術(shù),結(jié)合生物信息分析方法,研究全基因組范圍內(nèi)整個染色質(zhì)DNA在空間位置上的關(guān)系,獲得高分辨率的染色質(zhì)調(diào)控元件相互作用圖譜。Hi-C可以與RNA-Seq、ChIP-Seq等數(shù)據(jù)進行聯(lián)合分析,從基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和表觀遺傳網(wǎng)絡(luò)來闡述生物體性狀形成的相關(guān)機制。


                                 
                                圖1. 染色體三維結(jié)構(gòu)圖

                                一、技術(shù)優(yōu)勢
                                1、無需專門構(gòu)建群體,單個樣本實現(xiàn)輔助基因組組裝;
                                2、精確率高,人類基因組錨定染色體精確率為98%,排序和定;
                                3、周期短,性價比高。

                                二、技術(shù)流程
                                1、用甲醛對細胞進行固定,使DNA與蛋白,蛋白與蛋白之間進行交聯(lián);
                                2、進行酶切(如Hind III等限制性內(nèi)切酶),使交聯(lián)兩側(cè)產(chǎn)生粘性末端;
                                3、末端修復(fù),引入生物素標記,連接;
                                4、解交聯(lián),使DNA和蛋白、蛋白和蛋白分開,提取DNA,打斷,捕獲帶有生物素標記片段,進行建庫;
                                5、測序。


                                 
                                圖2. Hi-C實驗流程

                                三、生物信息學(xué)分析流程
                                 

                                四、輔助基因組組裝流程圖
                                 

                                五、應(yīng)用領(lǐng)域
                                1.染色體跨度的單倍型圖譜構(gòu)建
                                為疾病風(fēng)險預(yù)測提供思路
                                為腫瘤形成機制提供依據(jù)
                                為農(nóng)業(yè)動植物經(jīng)濟性狀連鎖標記及基因組進化奠定基礎(chǔ)

                                2.探索基因組的3D結(jié)構(gòu)
                                有助于了解基因組折疊對基因表達的影響
                                有助于了解基因組三維結(jié)構(gòu)對細胞發(fā)育,分化及細胞命運的決定

                                3.開發(fā)調(diào)控基因的DNA元件
                                揭示基因組遠程調(diào)控元件介導(dǎo)的分子網(wǎng)絡(luò)
                                通過分析調(diào)控元件空間互作熱點,開發(fā)潛在的藥物作用靶點

                                4.Hi-C輔助基因組組裝
                                輔助動植物基因組組裝
                                宏基因組組裝及菌群精確分類

                                六 、送樣要求
                                1、細胞交聯(lián)
                                2.5×106細胞量滿足一個標準Hi-C文庫,建議培養(yǎng)5×107至1×108,保證實驗可重復(fù)性

                                2、組織DNA
                                提供組織DNA量為15-20ug

                                3、運輸方式
                                足量干冰運輸

                                來源:武漢金開瑞生物工程有限公司
                                聯(lián)系電話:027-62431110
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